GRP78在全长丙肝病毒RNA转染细胞中表达的研究

目的 用蛋白质组学的方法研究全长丙肝病毒RNA转染细胞的差异表达蛋白,观察差异表达蛋白GRP78的表达变化。方法 提取全长丙肝病毒RNA转染Huh-7细胞和未转染Huh-7细胞总蛋白,进行双向凝胶电泳和MALDI-TOF质谱分析,鉴定差异表达蛋白。应用RTQ-PCR检测GRP78的相对表达量。结果 经双向凝胶电泳和质谱鉴定,共发现54个差异表达蛋白,其中包括GRP78蛋白。RTQ-PCR检测结果显示,在转染初期GRP78基因转录显著上调,转染24 h的相对表达率是未转染细胞的2.104倍,后随时间推移逐步下调。结论 建立了重复性较好、分辨率较高的全长丙肝病毒RNA转染细胞2D图谱。GRP78蛋白的显著差异表达提示GRP78蛋白在丙肝的发生和发展中起一定的作用。     

微生物学检验实验考核评分方法的探讨

微生物学检验是检验医学专业主要的专业课程之一。对该门课程实验考核具体方法及评分标准的制定,调动了学生实验操作的积极性,使实验教学取得了较好的效果。     

细胞角蛋白8真核表达载体的构建、表达及生物信息学分析

目的:构建人细胞角蛋白8(CK8)全长CDS序列真核表达载体,并转染人肝癌细胞SMMC7721,为研究CK8的生物学功能提供细胞模型。方法:RT-PCR扩增CK8全长CDS,克隆入pMD18-Tsimplevector质粒,鉴定正确后,亚克隆入质粒pEGFP-C1,构建真核表达载体pEGFP-CK8。脂质体介导转染SMMC7721细胞,荧光显微镜、realtimePCR和Westernblot检测CK8的表达。生物信息学软件分析CK8理化特性、信号肽及功能位点等。结果:PCR、酶切和测序结果均证实重组质粒含有人CK8全长CDS序列,转染实验表明CK8在SMMC7721细胞中发生了高表达。结论:成功地构建了人CK8全长CDS真核表达载体,并使其在SMMC7721细胞中获得高表达,为研究CK8的生物学功能奠定了实验基础。     

结核分枝杆菌异烟肼耐药基因katG的检测

目的探讨结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药的分子机制,建立快速检测结核分枝杆菌INH耐药性的方法。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测105株结核分枝杆菌临床分离株的katG基因,运用DNA测序和生物信息分析比对进行验证。结果以H37Rv标准株为对照,34株敏感株中5株(14.7%)存在KatG基因异常,105株耐药株中55株(52.4%)存在KatG基因异常。结论结核分枝杆菌对INH耐药与KatG基因突变有关,PCR-RFLP技术可快速、准确地检测结核分枝杆菌对INH的耐药性。     

经肾上腺腹侧间隙行后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术的临床体会(附30例报告)

目的:探讨经肾上腺腹侧间隙行后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术的临床优势。方法:30例患者经肾上腺腹侧间隙行后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术(改良组),20例患者行传统解剖性后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术(传统组),术前均诊断明确,患者平均(46.5±3.8)岁,瘤体直径平均(3.2±0.6)cm。比较两组患者手术时间、术中失血量、术后引流管放置时间、住院时间等指标。结果:30例后腹腔镜改良术式均获成功,手术时间30~70 min,平均(40.5±18.25)min;术中失血10~30 ml,平均(15.6±6.6)ml;术后引流管留置1~2 d,平均(1.9±0.2)d,平均住院(4.7±0.6)d;均优于传统组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:经肾上腺腹侧间隙行后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术创伤更小,出血更少,手术时间、住院时间缩短,术后患者康复快,值得推广。     

Caveolin-3在白藜芦醇改善高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用

 【目的】在高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠模型上,探讨微囊蛋白3（CAV-3）在白藜芦醇改善骨骼肌胰岛素抵抗中的作用及机制。【方法】实验大鼠分三组:正常饮食组（NORM）,高脂饮食组（HFD）,高脂饮食加白藜芦醇干预组（HFD+ RSV）。通过腹腔糖耐量试验,空腹血糖和空腹血清胰岛素值以及2-脱氧-[3H] 葡萄糖的摄取,从整体上探讨白藜芦醇对胰岛素抵抗的保护作用。再通过免疫印迹检验微囊蛋白3(CAV-3)与葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）在以上过程中的表达情况。【结果】HFD能显著诱导胰岛素抵抗,补充RSV能抑制高脂的诱导作用。离体骨骼肌实验证实,RSV的保护作用与其促进胰岛素诱导的葡萄糖摄取有关。免疫印迹证实RSV能够增加骨骼肌CAV-3蛋白表达,促进GLUT4向细胞膜的转运。【结论】白藜芦醇能改善高脂诱导的胰岛素抵抗,其保护作用与其上调CAV-3蛋白表达,促进GLUT4向细胞膜转运,改善骨骼肌葡萄糖的摄取有关。     

西安地区女性生殖道NUC感染与不孕症的相关性研究

目的 为了解女性生殖道淋菌(NG)、解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)(以下简称Nuc)感染与原发不孕，继发不孕症相关性。方法 应用多重PCR方法同步检测120例原发不孕、20例继发不孕和100例正常生育并均有生殖道感染的妇女宫颈分泌物中特异性NUC-DNA。结果 原发不孕症组NUC-DNA阳性率分别为NG-DNA：24.17％，UU-DNA;51．67％，CT-DNA：7．5％，NUC总阳性率：63.33％，其中NG、UU、Nuc总阳性率与对照组比较均有高度显著性差异(P＜0．005)。继发不孕组NUC阳性率分别为NG-DNA：20％，UU—DNA：50％，CT—DNA：10％，NUC总阳性率：50％，其中UU阳性率与对照组比较有显著性差异(P＜0.025)。我们的检测结果提示女性生殖道NUC感染中NG和UU是不孕症的原因之一。     

PCR技术用于乙型肝炎病毒宫内感染的研究

用多聚酶链反应(PCR)技术从45例HBV血清学指标阳性母亲娩出的48小时内婴儿末稍血白细胞中检出HBV-DNA18份,而在20份HBV血清学指标阴性的健康母亲之婴儿对照组标本中,HBV—DNA阳性者 3份,二组阳性率差异有显著性(P<0.05),从而揭示了西安地区乙肝病毒宫内感染的严重性,本研究结果还表明PCR技术可作为研究HBV宫内感染快速而可靠的检测手段。     

生育期妇女与弓形虫感染的关系

作者用微量间接血凝法检测了2521例有流产、早产、死胎、畸形史生育期妇女和830例无异常产史生育妇女之弓形虫抗体,其结果两者有统计学差异(P<0.05),提示异常孕产史与弓形体感染相关,因而孕前及孕期作弓形虫抗体监测在保证优生工作中有重要意义.     

微小病毒B_（19）致急性造血停滞二例

微小病毒Ｂ＿（１９）致急性造血停滞二例袁则，黄嘉莉，王绮云，金春子，邵明明，贾卉，李萍例１女，８岁，因齿龈出血１天伴皮肤出血点入院。入院前１天齿龈出血不止，约出血８００ｍｌ。体检：体温３８．５℃，贫血貌。全身皮肤有较密集的直径１～３ｍｍ大小的瘀点。咽...