缓释血管内皮生长因子的透明质酸水凝胶对大鼠脑损伤的修复作用

目的:探讨缓释血管内皮生长因子(VEGF)的透明质酸(HA)水凝胶对脑损伤大鼠的修复效果。方法:制备HA水凝胶并在其中添加包封VEGF的聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,形成可缓释VEGF的HA水凝胶复合支架。选用成年SD大鼠制备脑损伤模型,随机分为3组:将HA复合支架植入大鼠脑损伤区作为实验组(HA+PLGA组);单纯模型组;不添加PLGA微球的HA水凝胶植入作为HA对照组(HA组)。结果:HA水凝胶复合支架呈疏松多孔网状结构,可缓慢释放VEGF至少2周;术后8周大体观察可见HA水凝胶和脑组织整合良好,表面光滑; Nissl染色显示支架材料内有大量神经细胞;免疫荧光染色显示单纯HA支架可减轻脑损伤区胶质瘢痕的形成,缓释VEGF的HA复合支架对胶质瘢痕有更强的抑制作用;半薄切片组织学染色可见复合支架植入区有大量新生的血管,有大量细胞,血管周围可见神经纤维,而在单纯HA移植区血管和细胞较少。结论:缓释VEGF的HA水凝胶可与脑组织较好的整合,抑制胶质瘢痕的形成,诱导血管再生,进而促进大鼠脑损伤后的组织修复。     

甲醛挥发抑制剂及其效果研究

[目的 ]寻找一种能减轻甲醛挥发作用的物质。 [方法 ]将甘氨酸钠 (SG)溶液喷淋于解剖教学标本表面 ,同时测定空气中甲醛的浓度。 [结果 ]SG液可明显抑制甲醛的挥发 ,降低空气中甲醛的浓度 (P <0 0 1)。 [结论 ]SG液可作为甲醛挥发的抑制剂 ,从而减轻甲醛对人体健康的危害。     

黄芪甲苷对氧糖剥夺复氧后星形胶质细胞上TNF-α与AQP-4表达的影响

目的:探索黄芪甲苷(astragaloside IV,ASIV)对氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后星形胶质细胞上肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facror-alpha,TNF-α)与水通道蛋-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响。方法:选用第二代第1 d的星形胶质细胞。将星形胶质细胞放入缺氧培养箱(1%O_2、94%N2、5%CO_2),分别干预1、2、3、4 h,复氧24 h后用RT-PCR和Western Blot检测AQP-4和TNF-α的表达情况。将星形胶质细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+0.001μmol/ml ASIV组、OGD/R+0.01μmol/ml ASIV组,用RT-PCR和免疫荧光检测AQP-4和TNF-α的表达情况。结果:RT-PCR和Western Blot结果显示:氧糖剥夺复氧后AQP-4和TNF-α的表达均增加,且AQP-4在OGD3 h时表达达到高峰,TNF-α在OGD1 h时表达达到高峰(P0.05);OGD3h+0.001μmol/ml ASIV组和OGD3 h+0.01μmol/ml ASIV组的AQP-4基因表达水平较OGD3 h组相比均明显降低(P0.05);与OGD3 h组相比,OGD3 h+0.001μmol/ml ASIV组的AQP-4蛋白表达水平明显降低(P0.05);OGD1 h+0.001μmol/ml ASIV组和OGD1 h+0.01μmol/ml ASIV组的TNF-α基因表达水平与OGD1 h组相比均明显降低(P0.05);与OGD1 h组相比,OGD1 h+0.001μmol/ml ASIV组的TNF-α蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论:氧糖剥夺复氧模型可以诱导星形胶质细胞上TNF-α和AQP-4的表达,且TNF-α的表达先于AQP-4;黄芪甲苷可能是通过下调TNF-α的表达来影响AQP-4的表达,进而影响细胞水肿。     

大鼠脑纹状体出血后神经功能损伤的研究

目的:研究影响大鼠脑出血(ICH)后神经功能的因素。方法:将88只SD大鼠随机分为NCG、SCG、ICHG,各组根据术后时间又分为12h、1d、2d、3d、7d5个亚组;用胶原酶/肝素/生理盐水液注入大鼠脑纹状体制备ICH模型;分别在术前和术后各时间点对大鼠进行神经功能评分;干湿重法测脑水含量;TUNEL法观察凋亡细胞;电镜观察血肿周围细胞超微结构改变。结果:1ICH后大鼠出现不同程度神经功能损伤,在ICH3d神经功能损害最严重;2ICHG脑水含量明显高于SCG,以ICH3d脑水含量最高;3在ICH12h血肿周围出现TUNEL阳性细胞,3dTUNEL阳性细胞数最多,范围最广,以神经细胞为主;4电镜观察到ICHG血肿周围神经细胞出现凋亡细胞的形态改变。结论:ICH后血肿对周围神经组织的压迫、炎症反应、脑水肿以及细胞凋亡均为大鼠神经功能损伤的因素。     

大鼠精神分裂症后自发性运动量及海马神经发生的改变

目的:探讨成年大鼠精神分裂症后自发性运动量和海马神经发生的改变。方法:通过连续2周腹腔注射环苯已哌啶(phencyclidine,PCP)建立大鼠精神分裂症模型,利用动物运动分析系统监测大鼠自发性运动量,5-溴-2-脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记新生的神经细胞,用免疫荧光标记法监测海马齿状回BrdU、NeuN、S-100β的表达,利用激光共聚焦显微镜观察海马神经细胞的增殖与分化情况。结果:精神分裂症模型大鼠比对照组大鼠自发性运动量高出2～3倍(P0.05);BrdU阳性细胞数约下降了24%(P0.05);两组BrdU阳性细胞的分化无明显差异性(P0.05),大多分化为神经元。结论:精神分裂症可导致成年大鼠自发性运动量增加,并引起海马神经发生的改变,降低神经细胞的增殖。     

黄芪注射液对大鼠脑出血灶周围神经元超微结构的影响

目的:研究黄芪对大鼠脑出血灶周围凋亡神经元的保护作用.方法:将雄性SD大鼠分为黄芪治疗组,出血对照组和正常对照组;其中黄芪治疗组又分成出血后0、 6、 24h治疗组.各组均于出血后72h处死.电镜观察不同时间点大鼠脑出血灶周围凋亡神经元的超微结构.结果:出血对照组可见大部分神经元胞体缩小,核膜凹陷,核固缩,染色质边集,核仁少见;部分线粒体大小不均,呈致密型改变,多数线粒体肿胀、体积增大、嵴断裂、空泡样变性;粗面内质网扩张.黄芪治疗组神经元线粒体,核仁,核膜,粗面内质网等结构损伤程度明显好于出血组.其中出血后0、 6h治疗组的神经元超微结构好于出血后24h治疗组.结果:黄芪注射液能保护脑出血灶周围的神经元,减缓大鼠脑出血后神经元的凋亡,并且早期用药效果明显.     

DNA倍体和Survivin蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达

目的探讨卵巢肿瘤组织DNA含量、Survivin蛋白的表达及二者的相关性。方法采用流式细胞术检测卵巢肿瘤组织细胞DNA含量,免疫组化法检测卵巢恶性肿瘤组织中Survivin蛋白的表达,以正常卵巢组织作为对照组。结果恶性卵巢肿瘤组、交界性卵巢肿瘤组中DNA异倍体率及DNA含量均明显高于正常对照组(均P<0.05);恶性卵巢肿瘤组织中不同病理分化程度的组织DNA含量间比较差异有统计学意义(t值分别为4.09、5.02、3.33,P<0.05)。恶性卵巢肿瘤组织、交界性卵巢肿瘤组织Survivin蛋白表达与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);DNA异倍体肿瘤Survivin蛋白表达阳性率明显高于DNA二倍体肿瘤,差异有统计学意义(χ2=3.45,P<0.05)。结论 (1)恶性卵巢肿瘤及交界性卵巢肿瘤DNA异倍体率明显高于正常卵巢组织,且DNA含量与病理分级有关;(2)凋亡抑制因子Survivin蛋白在卵巢癌组织中高表达;(3)Survivin蛋白的表达与DNA倍体类型有相关性。     

福尔马林挥发作用抑制剂的研究

目的寻找一种能减轻福尔马林挥发作用的物质。方法将饱和的亚硫酸氢钠(SHS)溶液喷淋于解剖教学标本表面,同时测定空气中甲醛的浓度。结果SHS液组可明显降低空气中甲醛的浓度[(3.10±1.22)mg/m3],与对照组[(8.36±4.11)mg/m3]比较,差异有显著性(P<0.01)。结论SHS液可作为福尔马林挥发的抑制剂,降低空气中甲醛的浓度。     

大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究

目的通过对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型神经功能缺失评分的计算和脑梗死体积的测量,评价改良的大鼠MCAO再灌注模型,为实验研究提供可重复性好、稳定可靠的动物模型。方法20只SD大鼠随机分为A、B两组,A组用头端烧制成圆球的传统"圆头线栓",B组采用头端用万能胶包裹成梭形膨大的改良"梭头线栓"制作大鼠MCAO模型,阻断大脑中动脉血供3h后将"线栓"拔出,造成再灌注损伤。采用"盲法"分别于再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分;再灌注24h后处死大鼠,脑切片TTC染色,数码相机照相,采用图像分析系统测量脑梗死体积比;根据统计结果评价改良的MCAO再灌注模型,分析MCAO再灌注后神经功能缺失评分与脑梗死体积比之间的关系。结果B组大鼠脑梗死体积比大于A组(P<0.01);B组大鼠脑梗死体积比明显较A组稳定,变异系数(coefficient of variation,CV)分别为CVB=0.12,CVA=1.08);再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分,B组评分均高于A组(P<0.05);MCAO再灌注模型大鼠神经功能缺失评分与脑梗死体积比的大小成线性相关关系(r=0.873,P<0.01)。结论采用改良的"梭头线栓"制作MCAO再灌注模型,神经功能缺失评分和脑梗死体积比变异度小、稳定性高,是可靠的制模方法;神经功能缺失评分能反映脑梗死的严重程度,可用作评价药物疗效的指标。     

成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞增殖分化的比较

目的 比较成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞(NSCs)的增殖与分化,探讨脑出血后NSCs的变化规律.方法 制作大鼠脑出血模型,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)腹腔注射标记增殖细胞,用免疫组化法检测大鼠海马齿状回BrdU、神经元核抗原(NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数的变化.结果 正常组和假手术组大鼠海马齿状回均可见BrdU阳性细胞,成年大鼠明显多于老年大鼠.脑出血后成年和老年大鼠各时间点的BrdU阳性细胞均较正常组和假手术组明显增加,7d组达到峰值,成年大鼠各时间点均明显高于老年大鼠.正常大鼠海马齿状回可见少量BrdU/NeuN和BrdU/GFAP双标阳性细胞,脑出血后成年和老年大鼠海马齿状回双标阳性细胞数均较正常组明显增加,且老年大鼠BrdU/NeuN双标细胞明显少于成年大鼠.结论 脑出血后大鼠海马齿状回NSCs增殖明显,成年大鼠明显强于老年大鼠,且新生细胞分化为神经元的比例也明显高于老年大鼠.