p185高表达人卵巢癌裸鼠模型的建立

目的 建立高表达p185的人卵巢癌裸鼠模型。方法 BALB／c裸鼠皮下接种高表达p185的人卵巢癌细胞株SKOV3,观察成瘤情况及移植瘤病理组织学特点,并用SP免疫组织化学法测定移植瘤的p185表达情况。结果 12只裸鼠均荷瘤成功,病理组织学与免疫组化均证实移植瘤保持了原细胞系特征。结论 高表达p185人卵巢癌裸鼠模型的成功建立为抗p185抗体药物的体内药效研究提供了理想的平台。     

脑卒中吞咽障碍患者的焦虑状态评估

目的:探讨脑卒中吞咽障碍患者焦虑状态发生率.方法:选取神经内科脑卒中吞咽障碍患者132例为观察组,无吞咽障碍的脑卒中患者132例为对照组.2组患者均使用Zung焦虑自评量表(SAS)进行问卷调查,评估二组焦虑状态.结果:二组患者焦虑状态均高于中国常模标准,观察组焦虑状态发生率为86.36％,对照组为59.09％(P＜0.05),二者比较差异有统计学意义.结论:脑卒中吞咽障碍患者焦虑状态的发生率较高.应提前给予干预.     

地高辛标记的寡核苷酸探针两步原位杂交检测胸液细胞hTERT mRNA

目的 建立原位杂交法检测胸液细胞中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的实验方法,初步评价该法识别胸液中肿瘤细胞的效果。方法 取23例胸腔积液病例标本,以地高辛标记的寡核苷酸探针对胸液细胞hTERT mRNA行两步原位杂交,再通过抗原-抗体-酶-显色途径,测出hTERT mRNA信号。实验研究设严格的阴性、阳性对照,且与临床诊疗各自独立进行。结果 本法对9例恶性胸腔积液病例检测的结果均为阳性,即无论细胞形态是否异常,镜下均可见到有细胞质深染及部分细胞核少许点状着色的细胞。此9例中,7例经胸液细胞形态学检查亦示阳性者,可同时观察到形态明显异常的肿瘤细胞,其余2例经反复胸液细胞形态学检查阴性,但胸膜活检确诊为恶性胸腔积液者,虽未见到形态明显异常细胞,但镜下可发现胞质深染、部分细胞核少许着色的细胞。14例良性胸腔积液病例的检测结果均为阴性。结论 原位杂交法检测胸液细胞hTERT mRNA可望作为一种临床细胞病理学的新方法,用以鉴别胸腔积液的良、恶性,同时判定肿瘤细胞的类型。     

高表达HER2的自发转移性乳腺癌小鼠模型的建立与应用

目的建立高表达HER2的自发转移性乳腺癌小鼠移植瘤模型,用于抗HER2抗体等靶向药物的药效学活性和作用机制研究。方法将重组HER2全长基因转染含有荧光素酶基因的小鼠乳腺癌细胞系4T1-Luc,用G418加压筛选,采用流式细胞术和免疫印迹方法鉴定4T1-Luc稳转细胞株中HER2表达。将细胞注射BALB/c小鼠或裸鼠皮下乳房垫,待肿瘤生长稳定后随机分为4组给药,即PBS对照、chA21、Trastuzumab和抗体联合组。每周2次测量肿瘤体积,并计算抑瘤率。实验结束时用活体动物成像仪监测体内肿瘤转移情况。结果经过G418筛选获得了多个4T1-Luc/HER2稳转细胞株克隆,流式细胞术和免疫印迹均证实HER2高表达。这些克隆均具有良好的成瘤性,细胞注射1周后可见肿瘤稳定生长,2³周后可观察到肿瘤转移到肺、面部、腹股沟等部位。在BALB/c小鼠中,抗体联合组抑瘤率达43.3%,与PBS对照组之间的差异有显著性(P<0.05),并且明显优于抗体单用组抑瘤率(chA21组为11.1%,Trastuzumab组为23%)。而且,抗体联合组在小鼠肺部的肿瘤转移灶的数目和荧光强度与对照组相比明显降低。结论成功构建高表达HER2的4T1-Luc乳腺癌细胞系并建立自发转移性乳腺癌小鼠模型。初步研究结果表明抗HER2抗体chA21与Trastuzumab联合使用具有良好的抗肿瘤生长和转移的作用。     

抗HER-2嵌合抗体chA21对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的 探讨抗HER-2嵌合抗体chA21在体外对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用及其分子机制。方法 chA21处理体外培养的SKOV3细胞，采用透射电镜和原位末端标记技术观察和检测细胞凋亡情况，采用免疫细胞化学技术检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-3）表达情况。结果 chA21作用72h，可见SKOV3细胞凋亡，其作用呈剂量依赖性；SKOV3细胞Bax、Fas和caspase-3表达升高、Bcl-2表达下调、Bcl-2／Bax降低，并呈剂量依赖性。结论 chA21在体外可诱导SKOV3细胞凋亡，其分子机制与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及caspase-3的表达有关。     

长期住院的老年期精神病人康复期生活满意度调查结果

作者对长期住院的老年期精神病人康复期的生活满意度进行了调查 ,现将结果报道于后。1　对象与方法1.1　对象　为卢湾区与徐汇区两区精神卫生中心住院 1年以上的老年期精神病康复患者。其中年龄为 6 0～ 76岁 ;男36例 ,女 32例 ,共 6 8例 ;平均年龄为 6 3.5岁 ;住院时间最短为 1年 ,最长为 15年。1.2　方法　生活满意度评定采用Ｎｅｕｇａｒｔｅｎ[1] 生活满意度指数Ａ(ｌｉｆｅｓａｔｉｓｆａｃｔｉｏｎｉｎｄｅｘＡ ,ＬＳＩＡ) ,其内容包括过去、目前和将来生活状况的评价与展望的正性、负性情感。同时 ,将一般资料年龄、性别、住院年数作…     

蛇毒C型凝集素类似蛋白Agkisacutacin单克隆抗体的制备和鉴定

目的:制备并鉴定抗蛇毒C型凝聚素类蛋白Agkisacutacin的单克隆抗体(mAb)。方法:以Agkisacutacin蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规的细胞融合方法制备抗Agkisacutacin蛋白的mAb。用间接ELISA法检测杂交瘤细胞分泌mAb的稳定性。用荧光染色法做杂交瘤细胞的核型分析。用Western blot检测mAb的特异性。结果:获得3株可稳定分泌抗AgkisacutacinmAb的杂交瘤细胞株。结论:成功制备了抗Agkisacutacin的mAb,为检测Agkisacutacin蛋白作为新型抗血栓药物的体内代谢规律的方法和研究抗血栓的机制提供了重要的工具。     

抗HER-2抗体chA21对人乳腺癌SKBR3细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的探讨抗HER-2工程抗体chA21在体外对高表达HER-2的人乳腺癌SKBR3细胞凋亡的诱导作用及其分子机制。方法采用透射电镜和原位末端标记技术(TUNEL)观察和检测chA21对SKBR3细胞凋亡的诱导,采用免疫细胞化学技术检测凋亡相关基因bc l-2、bax、Fas及caspase-3表达的改变。结果chA21作用72 h,可见SKBR3细胞凋亡,chA21高浓度组(5.4mg/L)凋亡指数显著高于低浓度组(0.2 mg/L)(P<0.01);chA21处理组SKBR3细胞的bax、Fas及caspase-3表达增加,而bc l-2表达及bc l-2/bax比值降低,上述改变在chA21高、低两个浓度组间有显著差异(P<0.01)。结论chA21在体外可诱导SK-BR3细胞凋亡,其分子机制与调节凋亡相关基因bax、bc l-2、Fas及caspase-3的表达有关。     

阳离子抗菌肽研究进展

阳离子抗菌肽广泛分布于多种生物 ,越来越多的证据表明它们在机体天然免疫中有着重要的作用。广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤细胞及其它特性也使得其具有潜在的医药价值。对抗菌肽的研究正不断深入。该文从一般性质、作用机制、构效关系、重组表达、应用价值、存在的问题与发展方向等方面 ,对阳离子抗菌肽的最新研究进展进行综述     

染料木素抑制HER2阳性人乳腺癌与卵巢癌细胞增殖作用的研究

目的研究染料木素对人HER2高表达乳腺癌与卵巢癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用流式细胞分析技术、western blotting及细胞增殖与凋亡检测试剂盒等检测方法,对染料木素作用于HER2表达阴性的MCF-7细胞与通过稳定转染HER2而获得的MCF-7-1以及BT-474、SKOV-3等HER2阳性表达细胞的效果进行了剂量或时间反应关系的研究。结果浓度为0.1～10μg/ml的染料木素对HER2表达水平低的MCF-7细胞增殖的影响不大,而对HER2高表达的MCF-7-1、BT-474和SKOV-3细胞的增殖有显著的抑制作用(与DMSO对照组相比,P<0.01),且表现出剂量依赖性反应关系。用10μg/ml的染料木素作用12～48 h可以诱导BT-474细胞凋亡或坏死(与DMSO对照组相比,P<0.01),且表现出时间依赖性反应关系。结论染料木素能够明显抑制HER2阳性肿瘤细胞的增殖,这一作用可能是通过下调肿瘤细胞HER2信号转导而介导的。