23价肺炎球菌多糖疫苗临床试验

目的评价23价肺炎球菌多糖疫苗的安全性和免疫原性。方法23价肺炎球菌多糖疫苗免疫不同年龄组人群,观察局部及全身反应,并检测血清抗体滴度。结果试验组接种后出现的注射部位总疼痛率为30.8%。2人注射部位出现弱、中反应的红肿,反应率为0.23%。全身反应主要为弱反应,反应率为0.6%。试验组免后抗体平均滴度4.03,阳性对照组为4.15;抗体阳转率试验组为86.4%,阳性对照组为72.5%。试验组与阳性对照组全身发热和局部疼痛反应差异无统计学意义。试验组与阳性对照组的免疫原性相近。结论23价肺炎球菌多糖疫苗是安全有效的。     

肺炎球菌无动物源性成分培养工艺及纯化新工艺探索

目的:比较无动物源性成分培养基和动物源性培养基培养肺炎球菌的差异;摸索不使用有机溶剂的肺炎球菌多糖纯化新工艺。方法:用无动物源性的原料替代肺炎发酵培养基中动物源性的成分,考察菌体密度和多糖收量的变化;采用柱层析纯化工艺收获肺炎球菌多糖,测定各阶段核酸、蛋白、多糖含量。结果:与疫苗生产所采用动物源性发酵培养基相比,无动物源性发酵培养基收获的1,7F,19A型菌体密度分别提高了1倍左右;发酵液中多糖含量分别提高了48%,50%和200%;多糖收量提高了30%～90%。纯化新工艺收获的17F,18C,19F精糖,核酸和蛋白的含量均远远低于企业的注册标准,HPLC检测多糖纯度分别为99.24%,98.92%和99.02%。结论:无动物源性成分发酵培养基适合于肺炎球菌生长,不仅增加了多糖产量,也提高疫苗的安全性;纯化新工艺能够收获合格的肺炎精制多糖。     

钩体017株基因库pDJH_2与L．alstoni重组DNA探针同源性及pDJH_2在大肠杆菌中表达产物的分析

用地高辛标记含完整ＯｍｐＬ１结构基因之Ｌ．ａｌｓｔｏｎｉ２．５ｋｂＥｃｏＲ１重组ＤＮＡ探针与我们构建的赖型钩体０１７株基因库重组质粒ｐＤＪＨ＿２进行ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交。结果显示：该重组ＤＮＡ探针与ｐＤＪＨ＿２１．９ｋｂ插入片段同源；使用ＩＰＴＧ诱导重组质粒ｐＤＪＨ＿２后，其在大肠杆菌中表达了６８ｋｄ产物。经蛋白酶Ｋ消化、免疫印迹及斑点一酶联免疫吸附试验，提示此６８ｋｂ产物是蛋内质抗原；用该６８ｋｂ蛋白质抗原主动免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，可抵抗强毒力赖型钩体０１７株的攻击，表现出对小鼠的免疫保护性，从而为赖型钩体０１７株基因工程疫苗的研制奠定了一定基础。此赖型０１７株钩体重组ＤＮＡ经ＩＰＴＧ诱导后能在大肠杆茵中表达，以及其表达产物的保护性动物试验结果，在所查国内外文献中尚属首次报道。     

赖型钩体内鞭毛基因的扩增、克隆、核苷酸序列测定及其在大肠杆菌中的表达

根据钩体内鞭毛蛋白（Ｅｎｄｏｆｌａｇｅｌｌｉｎ）ｆｌａＢ基因核苷酸序列自行设计一对引物，以赖型钩体ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ扩增到约８４０ｂｐ的片段。扩增片段经酶切（ＢａｍＨＩ、ＰｓｔＩ）定向克隆入ｐＵＣ８。重组质粒ｐＬＦ１插入片段与哈勒焦型钩体ｆｌａβ基因相比，核苷酸序列和推测的氨基酸序列同源性很高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明有一约３３ｋｄ的特异蛋白带，表达量占菌体蛋白１１％。免疫印迹试验表明此区带能被抗赖型钧体内鞭毛（轴丝）抗血清识别。首次以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠钧体病模型为基础，用含重组质粒ｐＬＦ１的大肠杆菌作免疫原进行免疫保护试验，实验组存活率高子对照组，表现了一定程度的保护作用。本研究结果在所查国内外文献中尚属首次报道。     

双光径免疫浊度分析仪测定8型肺炎球菌荚膜多糖

[目的]对用双光径免疫浊度分析仪(IMMAGE)定量测定8型肺炎球菌荚膜多糖进行方法学评估,并讨论其检测实用性。[方法]系统研究IMMAGE测定8型肺炎球菌多糖的精密度、灵敏度、回收率、标准曲线的稳定性及干扰因素。[结果]IMMAGE检测8型肺炎多糖的总CV值为2.40%~4.96%,分析灵敏度为0.2μg/mL,稀释样本的平均回收率为99.25%,标准曲线至少可稳定5 d,加入不同浓度的19F、5、17F、33F、10A五个血清型的肺炎球菌多糖对检测无显著影响(P>0.05)。[结论]IMMAGE自动化程度高,操作简便,并且检测快速,结果准确,有较高的精密度。对定量测定肺炎8型多糖有较强的特异性。     

b型流感嗜血杆菌结合疫苗临床研究

目的 评价b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗在3月龄～5岁婴幼儿中的安全性和免疫原性.方法 采用随机、盲态、同类制品平行对照设计,对1～5岁、7～12月龄和3～6月龄组婴幼儿分别接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗,观察局部及全身反应,并检测血清抗体滴度.结果 3个年龄组接种Hib结合疫苗后不良反应总发生率为24.9％,1～5岁、7 ～12月龄和3～6月龄组不良反应总发生率分别为19.8％、24.9％和30.0％,其中3～6月龄试验组和对照组间不良反应总发生率差异有统计学意义(P=0.029 1),试验组高于对照组,其余2个年龄组试验组和对照组间不良反应总发生率差异无统计学意义(P =0.737 8和P=0.757 8).Hib结合疫苗免后阳转率达98.5％.达保护性水平的比例为95.6％,免后抗-Hib平均水平(GMT)为8.77 μg/ml.结论 b型流感嗜血杆菌结合疫苗接种3月龄～5周岁受试者达到良好的免疫效果,接种后具有良好的安全性及耐受性.     

艾旦温针法

艾旦温针法是一种简便行、节省时间、见效迅速的针灸方法。它通过针与灸并用,可以相互协调,增强治疗疾疒的效果。近年来,我们将此法用于治疗消化不良、长期腹泻、痛经、少经、风湿性关节炎、坐骨神经痛、脚寒凉等疒症,均获较为满(乙心)效果。操作方法: 将艾绒揉成旦,果于针柄上,艾旦如枣大,上下两头尖。按疒选择穴位,进行针刺。针刺得气后,观针柄与皮肤的     

3型肺炎球菌多糖抗原口服给药途径的效力研究

[目的]分析3型肺炎球菌多糖抗原口服给药途径的有效性。[方法]用注射器对小鼠灌喂3型肺炎球菌多糖抗原,33 d后检测小鼠NK杀伤细胞活性和抗体形成细胞数,并进行统计学分析。[结果]3型肺炎球菌多糖抗原口服前后小鼠NK杀伤细胞活性和抗体形成细胞数差异有统计学意义(P<0.05),与同类产品比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]3型肺炎球菌抗原能显著提高小鼠NK杀伤细胞活性和抗体形成细胞数。     

火针治疗颈淋巴结核

近两年多来,我们用火针治疗颈部淋巴结核二十一例,效果较好。这个方法的优点是:简便、花钱少、见效快,易于在广大农村推广使用。【治疗方法】用酒精灯或油灯将毫针烧红,直剌肿块中央,待针凉后起针。进针深度视肿块大小而定,一般以不穿透肿块为宜。治     

问号赖型钩体重组质粒pDJH_2 DNA 序列测定及其与其它细菌omp基因序列比较分析

对ｐＤＪＨ２片段ＤＮＡ进行了序列测定，结果：插入片段为１８１１个核苷酸；可读框２个：ＯＲＦ１，１－５６５ｂｐ；ＯＲＦ２（从最后一个密码倒算）１－６６２ｂｐ，计算机序列同源性或类似性匹配（ａｌｉｇｎｍｅｎｔ）表明，ＯＲＦ１与ＯＲＦ２的核苷酸类似性为４９．３６％；ＯＲＦ１与Ｌ．ｋｉｒｓｃｈｎｅｒｉ（Ｌ．ａｌｓｔｏｎｉ）流感伤寒型ｏｍｐ核苷酸序列类似性为４９．２６％；ＯＲＦ２与Ｌ．ａｌｓｔｏｎｉ类似性为５１．５６％；ＯＲＦ１与其它细菌（包括螺旋体）ｏｍｐ核苷酸序列对准比较，序列类似性均在４３％以上。经查阅ＥＭＢＬＤＮＡ序列数据库未见类似序列。作者认为ｐＤＪＨ２的１．９ｋｂ插入ＤＮＡ片段（ＯＲＦ１与ＯＲＦ２）可能是具有保护作用的ｏｍｐ基因片段。