3株肺癌细胞中9个肿瘤相关基因的启动子甲基化状态和部分基因表达的相关性

目的对3株肺癌细胞中9个肿瘤相关基因的启动子甲基化状态和部分基因表达的相关性进行评估.方法通过甲基化特异性多聚酶链反应法(MSP)结合DNA测序来确定3株肺腺癌细胞株(A549,SH77和SPE-A-1)中9个基因的启动子CpG岛的甲基化状态:APC,CDH13,DAPK1,MGMT,MYOD1,p16INK4a,p73,RAR-β和WT1基因.同时采用半定量RT-PCR的方法来量度下列5个基因的表达:CDH13,MGMT,MYOD1,RAR-β和WT1基因.结果在9个受检基因之中,下列4个基因在三株细胞中均呈同样的甲基化谱式:仅有去甲基化:APC和DAPK1,以及兼有甲基化和去甲基化:p73和p16INK4a.而其余5个基因则表现为不同的甲基化模式.尽管,这5个基因的表达谱式大体上符合其启动子CpG岛甲基化的表达静息的原则,个别的例外亦是有的.这提示着与DNA甲基化状态无关的机制可能也会参与该基因的表达调控.结论肺癌细胞株中的肿瘤相关基因的启动子CpG岛的过甲基化可与该基因的表达状态有较高的相关性.     

急性颅脑损伤并发神经源性肺水肿(附9例报告)

神经源性肺水肿（Neurogenic pulmonary edema，NPE）是由于各种急性中枢系统损伤导致颅内压急剧升高，引起肺部一系列病理改变，而无原发性心、肺、肾等疾病，尤以颅脑外伤和脑血管意外多见。我科自2000年以来，共诊治因急性颅脑外伤并发NPE病例9例，报告如下。     

急性淋巴细胞白血病患儿MTHFR C677T基因多态性与大剂量甲氨蝶呤治疗后肝功能异常的相关性

目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T基因多态性与大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）治疗后肝功能异常的相关性。方法：收集2017年10月至2020年3月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院66例ALL患儿HD-MTX治疗的临床资料,检测MTHFR C677T的基因多态性,根据基因型将患儿分为野生型（CC）和突变型（CT+TT）,比较2组患儿经HD-MTX治疗后不良反应的发生率、肝功能指标PA、ALT、AST、AST/ALT、TP、ALB、LDH、GGT、TBIL、CHE以及48 h、72 h血药浓度的差异。结果：MTHFR C677T突变型与野生型相比肝功能异常的发生率更高（P＜0.05）,其中血清AST、ALT、CHE含量异常的患儿比例显著升高（P＜0.05）,其他肝功能指标差异无统计学意义（P＞0.05）。进一步分析不同基因型患儿HD-MTX血药浓度的差异,结果显示与野生型相比,突变型48 h、72 h血药浓度均升高（P＜0.05）。结论：MTHFR C677T突变型患儿HD-MTX治疗后,血清AST、ALT、CHE含量异常的患儿比例较高,检测MTHFR C677T基因型对预测HD-MTX治疗后肝功能异常有一定的临床应用价值。     

荧光原位杂交技术和常规细胞学分析在骨髓异常增生综合征患者中的应用

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)和常规细胞学(CC)在骨髓异常增生综合征(MDS)患者中的应用。方法采用R显带技术对186例MDS患者进行CC分析,同时应用6组组合探针进行FISH检测,并采用统计学分析,比较2种方法的检出率。结果 186例MDS患者染色体核型异常检出率为33. 5%,而FISH异常检测率为41. 9%; CC分析联合FISH可以检测出46. 8%的异常检出率;采用修订版国际预后积分系统(IPSS-R)进行等级评分,FISH阳性率也明显高于CC,其中极高危组患者差异有统计学意义(χ2=4. 710,P 0. 05);在世界卫生组织(WHO)分型评分中,难治性贫血伴原始细胞增多-1(RAEB-1)组的FISH检测异常阳性率高于CC法,差异有统计学意义(χ2=4. 952,P 0. 05)。结论 FISH能有效提高MDS患者染色体的异常检出率,特别是针对核型分析失败及小克隆异常的患者,而CC联合FISH可以为MDS患者的诊断和预后分层提供重要依据。     

肺炎支原体23SrRNA基因突变与婴幼儿肺炎支原体肺炎临床相关性研究

目的探讨肺炎支原体23S rRNA基因突变与婴幼儿肺炎支原体肺炎的临床相关性,从而提高临床诊疗能力。方法选取确诊为肺炎支原体肺炎的婴幼儿115例,根据肺炎支原体23S rRNA结构域V区是否发生点突变将患儿分为大环内酯类耐药组和大环内酯类敏感组,分析比较2组患儿临床特征及实验室结果。结果 115例患儿的肺炎支原体Ig M抗体阳性率为51.30%,肺炎支原体DNA阳性率为100%;93例肺炎支原体23S rRNA结构域V区发生A2063G点突变,22例未发生突变,大环内酯类耐药率为80.87%;大环内酯类耐药组患儿的总热程、住院时间、C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)均高于大环内酯类敏感组患儿,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论大环内酯类耐药肺炎支原体所致的婴幼儿肺炎支原体肺炎病程相对较长,需引起临床医生的重视,CRP、LDH升高有助于预测大环内酯类耐药肺炎支原体感染。     

基于全面质量控制的带教方法在分子生物学检验实习带教中的应用

正精准医疗依赖于分子生物学检验技术的发展[1,2],医院检验科开展的分子诊断项目和技术平台越来越多,新的分子诊断技术逐步得到应用[3-6],国家也出台了一些新项目检测技术指南[7]。分子生物学检验从以手工操作为主,逐步进入半自动或全自动化操作的阶段,随着检测项目和检测平台多样化,给医院检验科分子生物学检验实习带教工作带来了困难和挑战。2012年9月教育部对高校医学检验专业进行学制改革[8],即将五年制医学检验专业改为四年     

温州地区新生儿Ｇ６ＰＤ 缺乏症基因突变分析

摘要：目的　分析温州地区出生新生儿葡萄糖 ６ 磷酸脱氢酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ６ ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｄｅｆｉｃｉｅｎ ｃｙ,Ｇ６ＰＤ）缺乏症发生率及基因突变特点。方法　收集温州医科大学附属第二医院新生儿２０４１２ 例,应 用滤纸荧光斑点法对新生儿进行Ｇ６ＰＤ 缺乏症筛查、酶法复诊;复诊阳性病例用ＭＭＣＡ 法检测基因突变, ＭＭＣＡ 法检测基因突变为阴性的再用二代基因测序;另筛查时间段内初筛阴性的女性样本Ｇ６ＰＤ 活性值最 低的５３例用ＭＭＣＡ 法检测基因突变。结果　２０４１２ 例新生儿Ｇ６ＰＤ 缺乏症纸片荧光法筛查阳性率为 ０．３０％ （６２／２０４１２）,其中男性５９例, 占９５．１６％ （５９／６２）;６２ 例筛查阳性的病例酶法复诊均阳性, 而 ＭＭＣＡ 法测基因突变阳性为６０ 例,２ 例酶法复诊阳性而ＭＭＣＡ 法检测阴性的样本通过二代测序均为 ｃ．１３１１Ｃ＞Ｔ 突变;ＭＭＣＡ 法基因突变以ｃ．１３７６Ｇ＞Ｔ、ｃ．１３８８Ｇ＞Ａ、ｃ．１０２４Ｃ＞Ｔ 最为常见;初筛阴性 的女性样本Ｇ６ＰＤ 活性值最低的５３例用ＭＭＣＡ 法检测出基因突变８例。温州地区患儿母亲籍贯最多为泰 顺县,占３２．５０％ （１３／４０）,而非温州地区广西壮族自治区、贵州、江西为高发地带, 占６３．３３％ （１９／ ３０）。结论　温州地区新生儿中Ｇ６ＰＤ 缺乏症男性患者多于女性。随着外来人口的流入和通婚的增多,温州 地区的Ｇ６ＰＤ 基因突变也在发生变化,基因诊断是对该病分子水平的诊断,有利于杂合子的检测。 关键词： 葡萄糖 ６ 磷酸脱氢酶缺乏症; 新生儿Ｇ６ＰＤ 筛查; 发生率; 多色荧光ＰＣＲ 溶解曲线法; 基因突变;分布特点 中图分类号：Ｒ７７２．１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１８）０７ ０５０９ ０５     

慢性硬膜下血肿临床路径对抗菌药物合理使用的作用

目的探讨慢性硬膜下血肿临床路径对抗菌药物合理使用的影响。方法选取2009年5月至2010年5月,实行临床路径管理之前按照传统医疗模式治疗慢性硬膜下血肿患者64例(对照组);2010年5月至2011年7月实行临床路径管理治疗的慢性硬膜下血肿患者60例(观察组),对照组依照经验预防使用抗菌药物治疗。观察组根据慢性硬膜下血肿的发生及发展的临床特点制定预防应用抗菌药物治疗方案并按照临床路径表开展医疗活动。观察两组患者的住院时间及抗生素的使用情况。结果观察组的住院时间为(8.46±2.67)d,明显低于对照组的(10.88±4.12)d;观察组和对照组的抗菌药物的使用率分别为68.33%、100%,观察组明显低于对照组;观察组抗菌药物的使用时间为(1.58±1.24)d,对照组为(7.64±1.52)d,观察组使用时间明显少于对照组;观察组的抗菌药物的费用是(247.82±89.62)元,相比于历史对照组的(2396.53±158.8)元明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论临床路径对于慢性硬膜下血肿的患者而言,在抗菌药物的使用方面具有较好的指导作用。有助于降低抗菌药物的使用率,规范使用时机、疗程,降低抗菌药物的总费用。     

TGF-β1基因rs2241715位点T/T基因型人群患HBV感染相关性疾患的风险更高

目的：确立3个在亚洲人群中高频杂合的TGF-β1单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）新位点与HBV感染相关性疾病易感性的关系。方法：采用基因型特异性PCR方法，对129例HBV感染相关性疾病患者（慢性乙型肝炎74例、肝硬化41例、肝癌14例）和41例健康人对照的外周血细胞基因组DNA的TGF-β1基因中，3个在亚洲人群中呈高频率杂合的SNP位点（rs2241715、rs2241716、rs4803455）进行基因分型。结果：正常人的rs2241715基因型及等位基因频率与慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌相比差异有统计学意义（P〈0．05）。rs2241715 T／T基因型的个体患慢性乙肝和肝硬化的相对风险度分别为其他型者的2．974倍（95％CI=1．209—7．314，P=0．018）和3．228倍（95％CI=1．201—8．675，P=0．020）。rs2241716和rs4803455位点的谱式则无上述的相关性。结论：TGF-β1基因的rs2241715 SNP位点T／T基因型可能是慢性乙肝病毒感染相关疾患的易感因素。     

高糖高脂饮食对广西巴马小型猪肾脏病理结构的影响

目的:建立饮食诱导的广西巴马小型猪糖尿病模型,研究其肾脏的病理学改变。方法:将雄性广西巴马小型猪10只按体重随机分为两组,5只饲以基础饲料作为正常对照组,5只饲以高糖高脂高胆固醇饲料作为高糖高脂组,建模5个月后处死动物,取出左肾,计算左肾重/体重比值,常规制片,HE、PAS染色,观察肾脏组织病理学变化。结果:高糖高脂组部分肾小球肿胀,基底膜增厚,系膜区增宽,基质增加,少数肾小球纤维化,囊腔闭塞;小叶间动脉管壁增厚,平滑肌细胞增生,管腔狭窄。而对照组肾脏病理改变不明显。结论:用高糖高脂饮食喂养广西巴马小型猪5个月,可引起肾脏发生典型的早期病理改变,说明饮食诱导法可建立较理想的早期糖尿病肾病模型。