近交系豫医无毛小鼠微卫星DNA多态性分析

目的:研究微卫星DNA多态性在豫医无毛小鼠等近交系小鼠遗传监测中的应用.方法:选取小鼠不同染色体上的18个微卫星位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1、D2Nds3、D3Mit16、D3Mit85、D3Mit41、D4Mit2、D5Mit66、D7Mit164),应用PCR技术对7个近交系小鼠(豫医无毛小鼠、BALB/C、C57、CBA、DBA/2、C3H/HeJ、FVB/NJ)进行了微卫星多态性分析.结果:18个微卫星DNA具有稳定扩增效果.不同品系个体之间11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)具有多态性,其中5个位点(D6Mit36、 D6Mit81、 D16Mit4、D6Mit149、D7Nds1)具有显著多态性;同一品系不同个体之间表现为单态性.结论:所检测的小鼠符合近交要求,运用筛选出的11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)进行微卫星多态性分析,能够快速、经济地对近交系小鼠进行品系鉴别和遗传背景监测.同时也反映了近交系豫医无毛小鼠与其他品系小鼠之间亲缘关系的远近.     

D19S433基因座突变1例

STR基因座的平均突变率为2.1×10^-3,所以在用STR进行亲权鉴定时尤其在排除时需谨慎。目前报道的多为父系突变,母系突变的还很少见,本实验室在进行亲子鉴定时,检出1例D19S433基因座变异D19S433基因座不符合母系遗传关系,现报道如下。     

热休克诱导小鼠肝细胞表达热休克蛋白70的研究

目的：研究热休克恢复期小鼠肝细胞热休克蛋白（ＨＳＰ７０）的表达。方法：小鼠分别为４０、４２、４４、４６℃热休克处理３０ｍｉｎ,恢复８ｈ;４６℃热休克处理３０ｍｉｎ,然后分别于热休克后２－７２ｈ取肝,以免疫组化方法观察ＨＳＰ７０的表达,并用体视学方法对阳性肝细胞体密度进行定量分析。结果：４２、４４、４６℃均能诱导肝细胞表达ＨＳＰ７０,以４６℃组小鼠阳性肝细胞密度最大;４６℃热休克后８－１２ｈ为ＨＳＰ     

复方肿瘤血管生成抑制因子口服液与化疗药物对小鼠S_(180)肉瘤的抑制作用

目的探讨复方肿瘤血管生成抑制因子口服液（ＣＯＬ－ＴＡＩ）与化疗药物联合对小鼠Ｓ１８０肉瘤的抑制作用。方法小鼠接种Ｓ１８０细胞后，随机分成对照组、ＣＯＬ－ＴＡＩ大剂量组、小剂量组以及各种剂量合用化疗药物实验组，１０ｄ后观察各组小鼠的肿瘤重量并计算抑瘤率。结果ＣＯＬ－ＴＡＩ不仅单独使用可抑制肿瘤生长，抑瘤率为１７．８３％～２６．９１％（Ｐ＜０．０５），而且与化疗药物合用有增强抗癌的作用，ＣＯＬ－ＴＡＩ在体内可明显增强化疗药物的抑瘤效应。单独使用环磷酰胺（ＣＴＸ）、阿霉素（ＡＤＭ）和５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）时，抑瘤率分别为４１．９１％、３２．７３％和２５．９０％，三者分别与ＣＯＬ－ＴＡＩ合用时，抑瘤率分别为５７．１０％、５５．２８％和３０．２４％。结论ＣＯＬ－ＴＡＩ不仅单独使用具有抑制肿瘤生长的作用，而且与化疗药物合用有明显的增效作用。     

河南汉族人群9个STR基因座的遗传多态性

目的　研究河南地区汉族CSF1PO、TPOX、TH0 1、F13A0 1、FESFPS、vWA、D16S5 39、D7S82 0、D13S317等 9个短串联重复序列 (STR)基因座的基因频率分布 ,得到群体遗传学数据。方法　用Chelex10 0快速法提取抗凝血的DNA ,经PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后 ,银染显带。统计各基因频率 ,计算杂合度、多态信息含量、个人识别概率及亲权否定概率。结果　得到 9个基因座各等位基因的频率 ,分布符合遗传平衡定律 ,具有高的杂合度和多态信息含量。个人识别概率 3组分别为 0 .9972、0 .9980和 0 .9996 ,3组累积个人识别概率为 0 .999999997。亲权否定概率 3组分别为 0 .85 6 5、0 .882 6和 0 .934 3,3组累积亲权否定概率为 0 .9989。结论　 9个基因座具有较高的杂合度 ,是较理想的遗传标记 ,可用于法医学个人识别和亲权鉴定     

应用荧光复合扩增技术对河南汉族群体9个STR基因座的多态性研究

目的：调查何南汉族群体的Ｄ３Ｓ１３５８、ｖＷＡ、ＦＧＡ、Ｄ８Ｓ１１７９、Ｄ２１Ｓ１１、Ｄ１８Ｓ５１、Ｄ５Ｓ８１８、Ｄ１３Ｓ３１７、Ｄ７Ｓ８２０等９个ＳＴＲ基因座的基因频率分布,获得群体遗传学数据,研究其法医学应用。方法：用ＰＣＲ复合扩增和四色荧光自动化检测技术分析９个ＳＴＲ位点的基因型,计算各等位基因的分布频率。结果：获得９个ＳＴＲ位点在河南汉族群体中的等位基因分布频率资料,共检出９８个等位基因;家系调查,证明上述位点遗传稳定,符合孟德尔遗传规律。９个ＳＴＲ基因座总鉴别机率（ＴＤＰ）达９９．９９９９９９６％。结论：上述９个位点是较理想的遗传标记,可用于法庭科学实践中生物物证的个人识别及亲子鉴定。     

大鼠肝大部切除后热休克处理对热休克蛋白和磷酸酶的影响

目的　研究热休克蛋白 (Hsc70 /Hsp6 8)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)在肝再生过程中的生物学作用 ,检测这些大分子在大鼠肝大部切除后热休克处理下的动态变化。　方法　用组织化学、免疫组织化学、Western印迹、酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法。　结果　肝切除和热休克联合处理 (PH - HS)后的0～ 144 h恢复期间 ,ACP有 3个高活性期 (12、36和 96 h) ,AKP有 2个高活性期 (12和 36 h) ,Hsc70 /Hsp6 8有 2个高表达期 (16和 48h) ;PH- HS后 ACP和 AKP活性增强与 140～ 180 k D的酶活性增加有关。与只进行热休克 (HS) (44℃ ,30 min)处理或与只进行 2 /3肝切除 (PH)后恢复期间 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性动态变化的比较表明 ,PH- HS对 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性的影响可持续 12 0 h;PH- HS中的 PH能略微降低 ACP和 AKP活性 ,减少 HS诱导肝细胞合成 Hsc70 /Hsp6 8的量 ;PH- HS中的 HS处理能抑制 PH诱导的 Hsc70 /Hsp6 8表达和推迟 ACP活性高峰出现的时间。　结论　 ACP、AKP和 Hsc70 /Hsp6 8均在肝细胞的 HS反应和肝再生中起作用 ,其中 ,ACP可能在启动肝再生中起重要作用 ,AKP和 Hsc70 /Hsp6 8可能在 DNA合成和细胞分裂中起重要作用     

DYS19,DYS391和DYS439基因座多态性研究

目的 :研究Y 染色体STR基因座在法医学实践中的应用价值 ,对 118名河南汉族男性无关个体的DYS19,DYS3 91,DYS43 9Y STR基因座多态性进行调查。方法 :应用荧光标记引物多重PCR技术和毛细管电泳技术。结果 :DYS19,DYS3 91,DYS43 9三个Y STR基因座分别检出 6,4,3个等位基因 ,三个基因座的基因多样性 (genediversity ,GD)分别为 0 72 17,0 475 4,0 5 780。 118名无关个体中发现 2 8种单倍型 ,其单倍型GD为 0 93 42。结论 :应用荧光标记Y STR复合扩增检验技术在实际检案中具有良好效果。