荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比对

目的 分析荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶（XDH/XO）的mRNA的相对表达量的差异,其结果具有一定的参考价值。方法 提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR 与半定量PCR 进行相对定量检测,结果做比对分析。结果 两种检测方法的特异性没有差异,荧光定量PCR较半定量PCR灵敏性高,均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR 与半定量PCR检测结果有一定差异。结论: 荧光实时定量PCR优于半定量PCR 法。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重、肺心病的临床观察

目的探讨低分子肝素钙联合川穹嗪、糖皮质激素治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的可行性及安全性。方法把2008～2011年收治的200例慢性阻塞性肺疾病患者随机分为两组。对照组:采用低流量持续吸氧、抗感染、化痰及体位引流排痰、扩张支气管等对症处理。观察组:在对照组治疗的基础上加用低分子肝素钙、川穹嗪、糖皮质激素治疗。结果一周后,观察组患者的咳痰喘症状,右心功能不全,生活质量好转率好于对照组;血气分析检查:观察组患者的动脉血氧分压、血氧饱和度改善率好于对照组;6min步行试验:观察组好于对照组;未出现黏膜出血等明显不良表现。结论采用低分子肝素钙联合川穹嗪、糖皮质激素治疗COPD是可行的和安全的。     

猕猴遗传背景管理系统的编码设计

1　材料和方法11　材料　硬件采用PC服务器,配置:CPUPIV24,硬盘80G,内存512M。操作系统采用MicrosoftServer2003,后台数据库管理软件采用MicrosoftSQLServer2000,前台开发工具为采用Delphi70,用InstallShield制作应用软件。12　方法　通过计算机自动生成遗传背景编号[父系家族(姓氏)编号 父亲编号 母亲编号 排行编号 母系家族(姓氏)编号]。(1)猴号编码规则:出生年月 四位编号。末位数奇数表示公猴,末位偶数表示母猴。例如:200401232345表示2004年1月23日出生,编号2345末位数为5奇数表示公猴。(2)遗传家族编号:遗传家族编号分为父系…     

糖皮质激素联合氨茶碱等抢救糖尿病合并慢性阻塞性肺疾病、肺心病、肺性脑病临床观察

目的:探讨糖皮质激素在抢救糖尿病合并慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)、肺心病并发II型呼吸衰竭、肺性脑病中的作用及安全性。方法:选择"糖尿病合并慢性阻塞性肺疾病急性加重,肺心病并发II型呼吸衰竭、肺性脑病"病人130例,随机按先后顺序分成两组,对照组(62人):积极采用低流量持续吸氧,静脉使用氨茶碱联合可拉明、洛贝林、甘露醇、速尿进行抢救及常规抗感染等对症治疗,疗程7天。观察组(68人):积极采用持续低流量吸氧、静脉使用氨茶碱联合可拉明、洛贝林、甘露醇、速尿、加用糖皮质激素(琥珀酸氢化可的松)进行抢救,并同时给予胰岛素(诺和林30R)降糖、常规抗感染等综合对症治疗,疗程7天。结果:一周内,观察组(68人)有7人死亡,其他病人都得到不同程度的好转;5例出现尿酮症阳性,血酮体阴性,随机血糖平均在8.6mmol/L。对照组(62人)有12人死亡,8例出现尿酮症阳性,血酮体阴性,随机血糖平均为9.3mmol/L。两组病员血气分析检查除死亡病人以外均有好转。结论:在抢救糖尿病合并慢性阻塞性肺疾病急性加重、肺心病并发II型呼吸衰竭、肺性脑病时糖皮质激素仍是首选,并未出现血糖过高现象,与配合使用胰岛素(诺和林30R)降糖有关,少数病人出现大便隐血弱阳性,与病重应激有关。尿酮体阳性与病员进食差有关。糖皮质激素应用越早越好。由于观察的病员量较少,安全性有待于进一步观察证实。     

氧嗪酸钾致Wistar大鼠高尿酸血症急性模型的剂量探讨北大核心CSCD

目的:建立Wistar大鼠急性高尿酸血症模型,探讨氧嗪酸钾(oxonic aid potassium salt,OA)致Wistar大鼠高尿酸血症的合适剂量。方法:剂量依赖实验:Wistar大鼠腹腔注射不同剂量OA,对照组腹腔注射1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na);均于给药后0h、1h、2h、4h、8h后尾静脉采血,磷钨酸法检测血清尿酸值,筛选致Wistar大鼠血清尿酸值升高至接近高尿酸血症浓度的OA剂量;验证实验:以剂量依赖实验获得的合适用药剂量建模并同时腹腔注射降尿酸药别嘌醇(allopurinol,ALLO),对照组腹腔注射1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),均于给药0h、1h、2h、4h,8h后尾静脉采血,磷钨酸法检测血清尿酸值,评价所造模型的实用性。结果:300mg/kg OA剂量组血清尿酸值较对照组升高明显,且已经达到临床上对高尿酸血症定义的尿酸浓度,并能维持2h;腹腔注射ALLO能使所造模型尿酸值降低。结论:OA致Wistar大鼠高尿酸血症动物模型造模成功; Wistar大鼠腹腔注射300mg/kg剂量的OA为造模较合适剂量,模型可用于降尿酸药物评价。     

浅谈初中语文作文教学中写作素材的积累

语文在整个初中阶段的教学中,属于重要学科之一,而写作教学又是语文学科的一个重要教学,其教学质量一直备受关注.初中生的写作水平与其逻辑思维能力以及语言表达、语言组织、观察等能力均有重要关系,加强初中生的学做教学需要对这个方面的能力进行综合考虑,同时还需对学习积累写作素材的能力加以培养,让学生有素材可写.在实际语文作文教学过程当中,很多学生往往会出现抵触、畏惧的表现,主要原因是缺乏充足的写作题材,久而久之学生则开始厌倦写作.因此,在实际施教的时候教师应当重视培养学生观察、思考、语言组织表达等能力的同时,还要重视学生日常生活当中对写作题材的积累运用,通过有效的教育方式帮助学生积累更多的素材,激发其主动思考问题,调动其语文写作分的积极性.     

实验恒河猴糖尿病动物模型建立及视网膜并发症的研究

[目的]糖尿病是由于多种因素和遗传因素导致体内胰岛素相对或绝对分泌不足,而引起的代谢性内分泌疾病,它以血糖、尿糖升高为特点,起病隐蔽,通过并发症使人致残致死,是继心血管、癌症之后的第三大致死性疾病,很可能成为21世纪人类的“第一杀手”(1,2)。本文采用人工诱导的方法,建立恒河猴糖尿病动物模型,研究糖尿病疾病的发展和及其并发症的发生、发展规律和防治措施,同时对于治疗糖尿病新药的安全性评价和药物疗效的观察具有广阔的运用前景。[方法]选用成熟的、健康的、雄性恒河猴9只,随机分成三个组,其中高剂量组(60mg/kg)1只,中剂量组(45m…     

B超对恒河猴子宫内膜周期性变化的监测分析

目的应用B超技术对恒河猴子宫内膜周期性变化进行实时监测。方法采用Aloka 3.5 mHz探头的B超仪,分别对6只性成熟的正常雌性恒河猴进行连续3个月经周期(n=18)的子宫内膜的周期性变化的实时测量,同时进行连续2个周期(n=12)的血清雌二醇E2及孕酮P的放射免疫检测分析。结果恒河猴子宫内膜厚度变化呈周期性。在滤泡期(月经周期的第-9~0天),B超图像表现为子宫内膜区域相对子宫肌层区域回声较低(较黑),子宫内膜厚度呈线性增长(r=0.88);黄体期(月经周期的第0~17天),B超图像表现为子宫内膜区域光点增强为强回声,子宫内膜厚度无明显增长。子宫内膜周期性变化与血清E2及P相关,子宫内膜线性增长最大值出现时间与E2分泌最高峰出现时间相一致。结论B型超声监测技术(ultrasound examination,US)作为一种有用的手段,能实时监测恒河猴子宫内膜周期性变化。     

野生及笼养猕猴SV40 T抗原基因检测方法的建立

目的建立猴外周血单核细胞SV40DNA的PCR检测方法，对猕猴SV40T抗原基因进行检测。方法使用PCR方法对分别来自野外（云南宁蒗71只、景东60只）及笼养猕猴（64只）的SV40大T抗原基因进行检测，同时对扩增出的阳性结果进行测序。结果在195份样本中，有4只来自野生猴样本扩增出SV40大T抗原基因（3．1％，4／131），1只来自笼养猴样本扩增出SV40大T抗原基因（1．6％，1／64）。测序结果显示：猴血样本扩增片段序列与GenBank中的SV40大T抗原C-末端的基因序列片段有15个核苷酸不同（3．3％差异），与SV40．776标准株的序列基本一致，但SV40—776在nt3020处有一缺口。结论云南野生及笼养猕猴猴群均能检出SV40T抗原基因。因此建立SV40病毒的DNA检测技术，对用于科研及疫苗生产的实验猕猴的病毒学质量控制具有重要意义。     

卷尾猴的卵泡生长发育及排卵的超声监测

目的探讨外周α1和α2受体是否参与应激性高血压对颈动脉窦反射(CSR)的重调定。方法应激一周的雄性SD大鼠,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区,将不同窦内压(ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic五参数曲线方程拟合,求得ISP-MAP关系曲线及特征参数,观察外周静脉注射(iv.)选择性α1或α2受体拮抗剂酚苄明(PBZ)或育亨宾(YOH)对应激性CSR的影响。结果iv.PBZ(2.5μmol/L,0.15μl/g)导致应激大鼠ISP-MAP关系曲线显著下移(P<0.05),反射参数中阈压、饱和压和最大增益时的窦内压值减小(P<0.05),而最大增益加大(P<0.05);iv.YOH(5μmol/L,0.15μl/g)对应激性高血压所致ISP-MAP关系曲线及其反射参数效应的影响,与iv.PBZ后的相类似,但YOH的作用不如PBZ的明显(P<0.05);iv.相应剂量的PBZ或YOH对非应激大鼠的CSR无明显影响(P>0.05);iv.PBZ或YOH均不能使应激的CSR水平恢复到相应的非应激给药后水平。结论外周α1、α2受体参与应激性高血压对CSR的抑制性重调定;外周α1受体在这种重调定的机制中可能发挥更为重要的作用;此外,应激性高血压对CSR的作用中尚有其他因素的参与。