急性髓系白血病(AML)中hsa_circ_0000254的实验研究

目的:通过克隆环状RNA hsa_circ_0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础。方法:人工合成hsa_circ_0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到慢病毒过表达载体pLCDH-ciR中,测序验证。筛选阳性克隆,分别以pLCDH-circ254(C254)、NC(pLCDH-ciR)转染293T细胞,培养40 h后收集细胞进行PCR检测及产物测序验证。结果:pLCDH-circ254表达载体经测序验证,测序峰图正常,且无杂峰或叠带,序列对比吻合,表明hsa_circ_0000254成功插入环状RNA表达载体pLCDHciR,过表达载体构建成功,表达效率高达1万倍。结论:成功构建hsa_circ_0000254表达载体,可高效表达hsa_circ_0000254。     

高效液相色谱法同时测定黄酒中4种人工合成甜味剂的研究

目的:建立黄酒中糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜和甘素等4种人工合成甜味剂的高效液相色谱同时测定方法。方法:样品经去醇和脱色后,采用C18色谱柱,以乙酸-乙酸铵缓冲液(0.02 mol/L,pH=5.5)/甲醇为流动相,采用梯度洗脱分离,在紫外230 nm波长进行检测。结果:4种人工合成甜味剂的加标回收率在84%~99%范围,其相对标准偏差在1.4%~4.7%范围,安赛蜜和甘素在0.05 mg/L~10.0 mg/L范围具有良好的线性,糖精钠和阿斯巴甜在0.25 mg/L~50.0 mg/L范围具有良好的线性,其回归系数均大于0.999,最低定量检出限(LOQ)为0.6 mg/kg~4.0 mg/kg范围。结论:本方法简便、灵敏、重现性好,能满足黄酒中4种人工合成甜味剂的监测要求。     

稀有血型抗原基因分型多重PCR体系的构建及应用

<正>1990年以来,大部分血型系统的分子机制都已阐明^[1]。Diego血型系统Di^a/Di^b的等位基因的多态性来自外显子19上C2561T的突变,Di^a等位基因编码854位上的亮氨酸(Leu),而Di^b基因在854位上编码脯氨酸(Pro)^[2-3]。血型系统的这一特征提供了血型抗原检测的分子生物学基础。序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)已被广泛应用于稀有血型的定型中[4]。本研究建立了同时检测低频等位基因Di^a、Co^b并可进行5份样本混合检测的多重PCR筛选体系。由于5份样本在单一反应管内同时检测,     

自身免疫性多内分泌腺病综合征Ⅱ型二例

例1,患者,男,76岁,因“全身浮肿10月余”入院.2008年1月无明显诱因下出现全身轻度水肿,双下肢明显,未作特殊处理.5月因全身水肿加剧,双下肢中度凹陷性水肿在我院肾科诊断为:桥本病,甲状腺机能减退症.给予左旋甲状腺素片100 μg每日1次,替代治疗及相应保肾利尿等处理,多次复查甲状腺功能好转,甲状腺微粒体抗体(TMAb)＞100 U/ml.患者发病以来体重增加约10斤,记忆力明显下降,乏力明显.有“类风湿关节炎”病史60余年,曾服用强的松,停药已数年.既往多次查血糖升高.     

2009-2011年浙江省宁海县手足口病疫情分析

目的 分析浙江省宁海县手足口病流行特征,探讨适宜的防控措施。 方法 收集国家疾病监测信息报告管理系统手足口病个案资料,采用描述性流行病学方法进行分析比较。 结果 2009-2011年宁海县共报告手足口病7217例,死亡1例;2009-2011年分别报告2648、2509和2060例,报告发病率分别为454.44/10万、425.24/10万和313.89/10万;2009年和2011年无重症及死亡病例报告,2010年报告重症3例,死亡1例。2009年和2010年手足口病病原体以肠道病毒71型(EV71)为主,2011年由EV71转化为柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)。 结论 2009-2011年宁海县手足口病疫情呈逐年下降态势,病原学由EV71转化为Cox A16,疫情具有地区持续性。     

2012年浙江省宁海县手足口病家庭聚集性疫情监测

目的 了解浙江省宁海县的手足口病在家庭内感染与传播情况,为今后手足口病患者居家管理提供参考.方法 收集2012年1-12月国家疾病监测信息报告管理系统手足口病个案资料,采用描述性流行病学方法进行分析.结果 2012年全县累计发现家庭聚集性疫情123起,共发病252人.每月均有病例报告,在5-6月和9-10月分别出现两次高峰,5-6月主高峰与Cox A16感染相关,9-10月次高峰主要由其他肠道病毒感染引起.1岁以下发病最多,占发病总数的28.17％（71/252）.以散居儿童（63.49％）与幼托儿童（27.78％）为主.共同暴露（29.27％）和“幼托儿童-散居儿童”（22.76％）是家庭聚集性疫情主要传播模式.结论 做好手足口病居家治疗病例管理,对于防止手足口病在家庭、社区内蔓延具有重要的公共卫生意义.     

中医药改善Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗机制研究

胰岛素抵抗是Ⅱ型糖尿病的重要病理基础,与糖尿病并发证的危险因素密切相关,并参与糖尿病发生、发展、结局的全过程。中药的优势是多途径、多环节、多靶点、多方面的综合协调作用,改善Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗的机制,主要是通过增加胰岛素受体数目及敏感性,改善胰岛素受体后缺陷(胰岛素信号传导环节,相关脂肪细胞及炎症因子,细胞内在机制等)发挥作用的。     

S-亚硝基谷胱甘肽抑制血小板凋亡的体外研究

目的探讨一氧化氮(NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对储存期内机采血小板细胞凋亡的影响。方法 6份机采血小板,每份分装到2个血小板保存袋,随机分到实验组和对照组,实验组加入GSNO(终浓度为100μmol/L),对照组加入无菌生理盐水。于(22±2)℃震荡保存,分别于第1、3、5、7天取血小板进行扫描电镜观察,采用流式细胞仪检测血小板凋亡情况,采用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达。结果实验组血小板NO含量高于对照组(P0.05)。血小板扫描电镜图显示,实验组血小板显微形态在外形、减少聚集等方面均优于对照组。在血小板保存过程中,乳酸含量不断累积(P0.05),葡萄糖含量不断消耗(P0.05),PS膜外翻的血小板数量不断增加(P0.05);且实验组血小板乳酸、葡萄糖含量和PS膜外翻阳性率均低于对照组(P0.05);凋亡相关蛋白Bax、Bcl-x L和Bak表达水平均未随保存时间延长而发生显著变化(P0.05),两组上述三种蛋白表达水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论在血小板保存过程中加入NO供体GSNO,可在一定程度上抑制血小板细胞凋亡,减少血小板贮存损伤。