抗肝癌单链双功能抗体在Hut-78细胞系中的表达及体外杀伤活性

目的 用携带分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因（sFv-TNF-α）的重组逆转录病毒感染T细胞淋巴瘤Hut-78细胞，使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv-TNF-α融合蛋白，观察转导的T细胞对体外培养肝癌细胞的杀伤作用。方法 用感染性重组病毒产生细胞C22（PA317/PST）产生的病毒上清转导入T细胞淋巴瘤Hut-78细胞，采用PCR，RT-PCR，细胞原位杂交及免疫组织化学染色等方法，对转导的Hut-78细胞进行DNA，mRNA及蛋白水平的分析。转导的Hut-78细胞分别与SMMC-7721，HHCC共培养，MTT法检测Hut/PST细胞表达产物对两种肝癌细胞的杀伤作用。结果 PCR，RT-PCR结果显示转导Hut细胞中扩增出外源目的基因对应的电泳条带，neo基因探针原位杂交显示转导细胞质内有较强的紫蓝色阳性反应信号，其阳性率约为95%，鼠抗人TNF-α多克隆抗体免疫组织化学染色，转导细胞质内有明确的棕黄色阳性反应信号，MTT法检测结果，分泌型抗肝癌单链双功能抗体对体外培养的两种肝癌细胞的杀伤率分别为15.4%和26.5%。结论 分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因可以在T细胞中整合并稳定表达，其分泌的表达产物对两种肝癌细胞均具有一定的亲合活性，并且具有一定的体外杀伤作用。     

脑脊液中β-淀粉样蛋白检测与阿尔茨海默病的早期诊断

目的：检测β—淀粉样蛋白(β—amyloid protein，Aβ)两种主要成分Aβl-40和Aβ1—42在阿尔茨海默病(Alzheier's Disease，AD)脑脊液中的变化，并探讨其对AD的诊断价值。方法：采用敏感的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，检测54例AD患脑脊液中Aβ的浓度，并与30例正常对照(normal controls，NC)脑脊液中的相应成分进行对比。结果：①AD患脑脊液中Aβ1—42浓度低于正常对照组，而Aβl-40／Aβl—42比值高于对照组；②以脑脊液中Aβ比值及Aβl—42浓度检测诊断AD的敏感性分别为54．51％、90．00％，特异性为84．25％、84．38％。结论：临床上同时检测脑脊液中Aβl—42浓度及Aβ比值可作为早期诊断AD的辅助指标，具有一定的临床应用价值。     

糖尿病肾病的临床与病理联系

1987年Mongensen建议将1型糖尿病所致。肾损害分为5期，约每5年进展一期，该分期法现已被临床广泛使用。尔后，人们认识到2型糖尿病肾损害的临床及病理过程也与此相似，只不过2型糖尿病病人。肾损害进展比1型快(约每3～4年进展一期)，这可能与2型糖尿病多发生于中、老年人，肾脏已有退行性变，且病前多有胰岛素抵抗，病人合并高血压、高脂血症及高尿酸血症，这些因素也同时损伤肾脏。现将糖尿病肾损害5个分期的表现简述如下。     

卵巢平滑肌瘤2例临床病理分析

卵巢平滑肌瘤是原发于卵巢的一种极罕见良性肿瘤，迄今为止，国内外仅有60余例文献报道。在病理诊断上易与卵巢其他间叶组织肿瘤相混淆。本文报告2例并讨论该肿瘤的鉴别诊断。     

孕产妇梅毒感染确诊时机影响因素

目的分析孕产妇梅毒感染确诊时机的影响因素及临床治疗效果。方法选择2017年9月-2019年9月于海口市妇幼保健院接受定期产检的孕产妇为研究对象,采用巢式病例对照研究方式将孕期确诊梅毒的80例孕妇纳入孕期确诊组,按1∶2比例匹配160例产期确诊梅毒的患者纳入产期确诊组;分析患者年龄、孕产次等临床资料,归纳孕产妇不同时期确诊梅毒感染的影响因素,并比较两组治疗效果。结果两组民族、户籍、文化程度、职业、孕次、梅毒分期、感染途径比较差异无统计学意义,但产次、子女数及性伴侣感染比例比较差异有统计学意义(P<0.05),多因素分析结果显示产次、子女数、性伴侣感染是孕产妇不同时期确诊梅毒感染的影响因素(P<0.05);孕期确诊组不良妊娠结局发生率为22.50%(18/80)低于产期确诊组(P<0.001),先天性梅毒发生率为5.00%(4/80)低于产期确诊组(P<0.001)。结论产次、子女数、性伴侣感染是孕产妇不同时期确诊梅毒感染的影响因素,孕期确诊梅毒患者经治疗后具更低的不良妊娠结局风险及先天梅毒感染风险。     

阴道微环境改变和高迁移率蛋白A2水平变化与HPV感染及宫颈癌变的关系研究北大核心CSCD

目的研究阴道微环境改变与高迁移率蛋白A2(HMGA2)水平变化与人乳头瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌病变之间的关系。方法将本院2018年1月-2021年1月269例行宫颈癌筛查的门诊病例纳为研究对象,检测患者阴道微环境改变(阴道pH值、乳酸杆菌含量、白细胞分度、病原体感染与否)、HPV感染情况以及阴道分泌物中HMGA2水平,通过阴道镜宫颈组织病理学检查判断患者宫颈病变程度。分析阴道微环境、高危HPV(HR-HPV)感染、HMGA2水平以及宫颈癌病变程度之间的关系。结果HR-HPV阳性与阴性组患者比较,阴道pH、乳酸杆菌量、白细胞分度及念珠菌感染率差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),HR-HPV阳性组阴道分泌物HMGA2水平显著高于阴性组(P<0.05)。正常宫颈组、低级别变组、高级别病变组以及宫颈癌组患者阴道pH、乳酸杆菌量、白细胞分度、念珠菌感染率差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);正常宫颈组、低级别病变组、高级别病变组以及宫颈癌组患者阴道分泌物HMGA2水平依次呈上升趋势,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。阴道pH>4.6、乳酸杆菌少量或无、白细胞3~4度及念珠菌感染者阴道分泌物HMGA2水平均显著高于其相对应的阴性组(均P<0.01),正常宫颈组、低级别病变组、高级别病变组以及宫颈癌组患者HR-HPV感染率依次呈上升趋势,组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阴道pH>4.6、乳酸杆菌少量或无、白细胞3~4度、念珠菌感染等阴道微生态改变均可增加HR-HPV感染风险,并与宫颈病变关系密切;阴道分泌物HMGA2水平升高与阴道微环境改变、HR-HPV感染及宫颈病变有关,而HR-HPV感染将增加宫颈恶性病变的风险。     

乙型肝炎病毒核糖核酸酶H基因表达及鉴定

目的　乙型肝炎病毒核糖核酸酶 H (HBV- RNase H)为该病毒生活周期中负链 DNA合成所必需 ,获取该基因片段及其表达蛋白 ,为进一步的基础研究及应用研究创造条件 .方法　以 HBV全基因片段为模板 ,PCR方法定位扩增 HBV-RNase H特异性片段 ,连接于 p T7Blue克隆载体 ,酶切鉴定并测序后克隆于 p GSTag载体进行原核表达 .PAGE电泳及Western杂交鉴定表达产物 .结果　DNA测序结果显示 PCR扩增产物及载体中插入片段与已知序列相同 ;Western杂交结果表明 ,所表达产物为 GST与 RNase H的融合蛋白 .结论　 HBV- RNase H基因的成功克隆及表达为进一步研究 HBV感染的早期诊断及乙肝患者的治疗奠定了基础     

中西医结合治疗血小板减少性紫癜疗效观察

血小板减少性紫癜 ,是一组因外周血中血小板减少而导致皮肤、粘膜或内脏出血的疾病。临床约占出血性疾病总数的 30 %。血小板减少 ,骨髓巨核细胞发育成熟障碍 ,血小板生存时间缩短及血小板自身抗体出现为特征 ,笔者采用中西医结合治疗本病 30例 ,疗效满意 ,现报道如下。1　临床资料5 8例全部符合国家规定的诊断标准 ,随机分为两组。治疗组 30例中 ,男 16例 ,女 14例 ;年龄最小 16岁 ,最大 80岁 ,平均 4 8岁 ;病程 1～ 3年。对照组 2 8例中 ,男 15例 ,女 13例 ;年龄最小 15岁 ,最大 81岁 ,平均 4 3岁 ;病程 1～ 4年。两组之间在年龄、性别、…     

腺苷A_1受体参与兔脊髓缺血预适应的保护作用

目的　探讨腺苷A1 受体是否参与兔脊髓缺血预适应 (IPC)的保护作用。方法　采用腹主动脉肾下段夹闭法建立兔脊髓缺血模型。动物分为 7组 ,即缺血损伤组 :使脊髓缺血 2 0min ;IPC组 :脊髓预缺血 6min ,再灌注 30min后再次使脊髓缺血 2 0min;8 环戊基 1 ,3 二丙黄嘌呤 (DPCPX ,腺苷A1 受体阻断剂 ) +IPC组及DMSO溶剂 +IPC组 :在IPC前分别ipDPCPX及DMSO ,其余步骤同IPC组 ;DPCPX +缺血损伤组 :在脊髓 2 0min缺血前ipDPCPX ,其余步骤同缺血损伤组 ;预缺血组 :使脊髓缺血 6min;DPCPX +预缺血组 :在脊髓 6min缺血前ipDPCPX ,其余步骤同预缺血组。所有组再灌注48h后 ,进行后肢神经功能评分 ,然后取脊髓进行组织病理学观察。结果　与缺血损伤组相比 ,IPC明显改善脊髓缺血后兔后肢神经功能和减轻脊髓病理学损伤 ;DPCPX完全取消IPC对脊髓缺血的保护作用 ,而DMSO不能取消IPC的保护作用 ;单给DPCPX并不能进一步加重缺血损伤。缺血 6min及DPCPX +缺血 6min均不能引起脊髓缺血损伤。结论　腺苷A1 受体参与兔脊髓IPC的保护作用