原发性胃癌中MRE11基因的突变筛查

目的:研究染色体不稳定性相关基因MRE11(meiotic recombination 11 homolog A)突变与原发性胃癌的相关性。方法:收集27例原发性胃癌病人的胃癌组织和对应的正常胃黏膜组织,并通过显微切割方法从胃癌组织中获取较纯胃癌细胞。设计扩增MRE11基因外显子的引物共20对,采用PCR产物直接测序方法在胃癌细胞和对应正常胃黏膜组织中对MRE11基因编码区进行突变检测,并运用CGH方法对存在突变的胃癌细胞进行染色体分析。结果:在27例原发性胃癌中,4例存在MRE11基因共4个体细胞水平的错义突变,其中3例为肠型胃癌。CGH显示该4例胃癌均存在5个以上基因组片断的获得或丢失事件。结论:MRE11基因突变可能在某些原发性胃癌的发生发展中起着重要作用,尤其是显示染色体不稳定性的肠型胃癌。     

POLO-LIKE KINASE1 GENE EXPRESSION AND ITS CLINICOPATHOLOGICAL SIGNIFICANCE IN GASTRIC CARCINOMA

Objective To clarify the polo-like kinasel （PLK1） expression in human gastric cancer tissue and its clinicopathological significance in gastric carcinoma. Methods PLK1 expression in 60 cancer tissues and their corresponding noncancerous tissues from gastric cancer patients was measured by both real-time quantitative RT-PCR and western blot assay, lmmunohistochemistry was used to detect PLK1 protein expression in eighty-nine paraffin-embedded samples. Results The PLK1 mRNA and protein expression level in the 60 fresh cancer tissues was significantly higher than that in noncancerous tissues （ P 〈 0. 0001, P = 0. 031 respectively）. In paraffin-embedded samples, apart from its increased expression level, PLK1 was found to be in both cytoplasm and nucleus, double-site location only occurred in poor-differentiated cancer, PLKI expression intensity was associated with tumor dif- ferentiation （ P = 0. 03）, invasion （ P = 0. 032 ）, TNM stage （ P = 0. 019） , ki67 expression （ P = 0. 011 ）. The patients with negative PLK1 expression had better survival rate than that with positive PLK1 expression （ P =0. 0292 ）. Conclusion PLK1 may have clinicopathological value in tumor diagnosis, and may become another new biomarker and therapeutic target for gastric cancer.     

老年高血压患者膳食危险因素调查其对策

目的研究新膳食结构形势下老年高血压疾病的膳食危险因素及其相应的措施。方法采用2 d记录+24 h回顾法调查分析老年高血压患者的膳食种类及营养素摄入量。结果不同性别和年龄组平均每人每日热能、脂肪、钠盐摄入量均明显高于各自对照人群的推荐摄入量;而维生素C、Vit B2、钙、钾、镁、铁等摄入量明显低于各自对照人群的推荐摄入量(P<0.05)。部分老年高血压患者锌的摄入量明显不足(P<0.05),同时三大营养素供热比和三餐能量比也不甚合理。结论新膳食结构形势下老年高血压患者的膳食结构不够合理,高血压与热能、脂肪、钠盐摄入量过多以及维生素C、钙、镁、钾、锌摄入量过低密切相关,合理调配膳食结构有助于高血压的预防和治疗。     

TAGLN在胃癌组织中的表达及其与转移的关系

目的观察TAGLN在胃癌中的表达及其与肿瘤细胞侵袭转移能力的关系。方法运用实时PCR、Western blotting及免疫组化方法,检测TAGLN在40例胃癌患者肿瘤组织和相应癌旁组织、7株胃癌细胞株及癌相关成纤维细胞(CAFs)中的表达;分析TAGLN的表达与胃癌临床病理学之间的关系。运用细胞侵袭和移动试剂盒检测高表达TAGLN的CAFs或沉默TAGLN表达后的CAFs对胃癌细胞株MKN45侵袭及移动能力的影响。结果在mRNA和蛋白表达水平方面,各胃癌细胞株间无显著性差异(P>0.05);与相应癌旁组织相比,胃癌组织TAGLN的表达明显上调(P<0.05);免疫组化染色显示,TAGLN蛋白表达于胃癌组织间质中的成纤维细胞、新生血管内皮细胞及肿瘤浸润的黏膜肌层中的肌细胞,且主要表达于细胞膜和细胞浆。淋巴结转移组胃癌组织TAGLN蛋白的表达为3.751±0.681,显著高于无淋巴结转移组的1.084±0.328(P<0.05)。细胞侵袭和移动试验结果显示,高表达TAGLN的CAFs能够促进胃癌细胞株MKN45的侵袭及移动能力;而经siRNA沉默TAGLN表达后的CAFs则明显降低胃癌细胞株MKN45的侵袭及移动能力。结论TAGLN基因在胃癌组织的基质中高表达,其表达上调对胃癌的侵袭和转移可能具有促进作用。     

线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用

目的探讨线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用。方法应用人胃癌细胞株AGS,根据不同实验处理分为常温对照(NT)、单纯温热(HT)、常温化疗(NTCT)和温热化疗(HTCT)四组。Western blotting法检测AGS细胞中Bax、Bcl-2蛋白及其线粒体胞质蛋白中细胞色素C的表达,实时PCR检测其Bax、Bcl-2的mRNA表达;分别测定各组AGS细胞Caspase3和Caspase9的酶活性变化。结果与NT、HT、NTCT组比较,HTCT组AGS细胞Bcl-2蛋白表达下调而Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2显著上升;线粒体胞质蛋白中细胞色素C表达增加;Caspase9和Caspase3的酶活性显著增高。结论HTCT可引起AGS细胞Bcl-2、Bax基因和蛋白表达水平发生改变,促使其细胞色素C由线粒体释放进入细胞质,从而诱导细胞凋亡。     

上海世博园区环卫车船监控系统信息化研究

介绍了一种在上海世博园区实施的新型环卫车船监控系统,该系统采用新型的车(船)载终端并基于无线测控网技术构建而成。分析了系统的监控对象和需要达到的目标,以及监控系统设计;总结了与传统环卫车(船)载GPS系统相比较其特点。     

Ezrin在胃癌细胞的表达及与胃癌细胞侵袭能力的关系

目的检测胃癌细胞株中Ezrin的表达情况与胃癌细胞株的侵袭能力，探讨Ezrin的表达与胃癌细胞侵袭能力的关系。方法分别采用Western blot和Real-Time PCR的方法，检测Ezrin在胃癌细胞株的表达情况，运用以胶原为基础的细胞侵袭试验检测胃癌细胞株的侵袭能力。结果Ezrin在胃癌细胞株中的表表达存在差异，其中MKN-45表达水平最高，N-87表达水平最低；侵袭试验显示MKN-45的侵袭能力最强，N-87侵袭能力最弱。结论Ezrin在胃癌细胞中的表达存在差异，Ezrin的表达水平与胃癌细胞的侵袭能力成正相关。     

结肠癌多药耐药性相关基因筛选与鉴定

目的筛选结肠癌多药耐药相关基因,探讨结肠癌多药耐药的机制。方法通过逐步递增氟尿嘧啶（5-FU）浓度孵育结肠癌Lovo细胞,建立耐药细胞株Lovo／5-FU。M1Tr法检测Lovo／5-FU细胞对5-FU和顺铂（CDDP）的敏感性。采用二维电泳-质谱联用技（2DE—MS）术比较Lovo和Lovo／5-FU两株细胞间差异表达蛋白,并采用Western blot法鉴定筛选蛋白。结果与Lovo相比,Lovo／5-FU细胞对5-Fu和CDDP的IC。值分别升高31倍和3倍（均P〈0.01）。通过2DE—MS筛选得到。在耐药株中CAP—G和RhoGD12表达上调,6-PGL、DCI、Prdx-6和Maspin表达下调。Western blot检测显示．Lovo／5-FU细胞中RhoGD12和CAP-G较Lovo增高6．14倍和2．98倍（均P〈0．01）．而Maspin则明显下降至Lovo中的5．2％（P〈0．01）。结论结肠癌耐药性的产生是多基因、多通路改变的结果。CAP—G、RhoGD12、Masoin是潜在的结肠癌多药耐药相关基因。     

丝氨酸/苏氨酸激酶15基因的过表达与胃癌细胞增殖有关

目的探讨胃癌细胞及组织中丝氨酸／苏氨酸激酶15(STK15)mRNA和蛋白质表达与临床病理指标、胃癌细胞增殖的关系。方法采用实时定量PCR及Western blot分别检测正常胃黏膜上皮细胞株GES-1、胃癌细胞株SUN-16、KATOIII、MKN45、AGS、N87及60份新鲜切除的胃癌组织中 STK15基因mRNA及蛋白质表达。RNA干扰技术(RNAi)抑制MKN45、AGS、N87细胞株STK15表达,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞增殖速率变化,数据行秩和检验及t检验。结果 SUN-16、KATOⅢ、MKN45、AGS、N87中STK15基因mRNA及蛋白质表达均明显高于GES-1;60份胃癌组织中STK15 mRNA及蛋白质表达水平中位值分别为3．175×10-3与1．261,明显高于正常组织的0．532×10-3与0．224(P<0．05);胃癌组织中STK15 mRNA水平与胃癌分化及浸润深度有关(P< 0．05);而蛋白质表达水平与胃癌分化有关(P<0．05)。抑制STK15表达后,MKN45、AGS、N87细胞株 G2期DNA含量细胞分别为(26．1±6．1)％、(25．6±7．9)％及(20．6±6．1)％,明显高于对照组的(12．5 ±4．9)％、(10．9±4．4)％及(8．7±3．5)％(P<0．05);细胞增殖速率减慢(P<0．05)。结论 STK15 的过表达可能在胃癌发生发展中起促进作用,可作为胃癌某些生物学行为新的判定指标;STK15的过表达与胃癌细胞增殖有关。