胃癌外科综合治疗的基础与临床研究

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,目前胃癌的早期诊断率低,缺少有效的外科综合治疗措施,疗效仍下够令人满意,术后5年生存率在20％～30％。为进一步提高治愈率、改善预后,我科进行     

蛋白质组研究技术及其在筛选肿瘤标志物中的应用

肿瘤标志物是细胞在特定疾病状态下的分子信号．是检测、诊断、治疗、监测肿瘤和判断肿瘤预后的重要工具。如何发现新的、具有高度特异度和灵敏度的肿瘤标志物多年来一直是肿瘤研究的热点之，蛋白质和蛋白质组学研究的快速发展给肿瘤标志物研究注入了新的活力。蛋白质组一词由Wilkins于1994年首次提出，意指一种基因组或一种细胞所表达的全套蛋白质，近年迅速发展为一门新兴学科——蛋白质组学(pmteomics)，其含义主要包括3个方     

核转录因子E2Fs家族研究进展

核转录因子E2Fs家族(E2F转录因子)是视网膜母细胞瘤相关基因(RB／E2F)通路中调控细胞有丝分裂事件的重要因子，E2F是否进入核内发挥核转录因子作用取决于RB蛋白的磷酸化状态，E2F调控的下游基因分为激活与抑制两种方式，涉及细胞周期调控、生长与凋亡、增殖与分化等重要生命活动。E2F在细胞周期中的功能失调将导致细胞上述机能的改变并有可能与肿瘤发生有关，深入研究无疑将对完整阐述细胞周期调控及肿瘤发生机制乃至寻求新的肿瘤治疗靶点提供帮助。     

胃癌细胞中SerpinB5与MAFbx的相互作用及其作用位点研究

目的 探讨胃癌细胞中SerpinB5能与MAFbx的相互作用及其作用位点.方法 采用酵母双杂交及免疫共沉淀方法检测SerpinB5与MAFbx之间的相互作用.分别用RNA干扰及瞬间转染pGBKT7-SerpinB5调节SerpinB5表达水平.在胃癌细胞株SUN-16中研究SerpinB5对MAFbx表达的影响.用同源建模的方法构建出MAFbx的结构信息;并以分子对接的手段来预测SerpinB5与MAFbx相互作用的位点.结果 酵母双杂交及免疫共沉淀均证实SerpinB5能与MAFbx相互作用;MAFbx的表达水平随着SerpinB5的表达水平变化而变化.同源建模和分子对接的方法预测SerpinB5与MAFbx蛋白相互作用的关键残基是PR0261、ASN361和LYS362.结论 胃癌细胞中SerpinB5能与MAFbx相互作用,且SerpinB5上的PR0261、ASN361、LYS362残基是其与MAFbx蛋白相互作用的可能位点.     

结肠癌多药耐药性相关基因筛选与鉴定

目的筛选结肠癌多药耐药相关基因,探讨结肠癌多药耐药的机制。方法通过逐步递增氟尿嘧啶（5-FU）浓度孵育结肠癌Lovo细胞,建立耐药细胞株Lovo／5-FU。M1Tr法检测Lovo／5-FU细胞对5-FU和顺铂（CDDP）的敏感性。采用二维电泳-质谱联用技（2DE—MS）术比较Lovo和Lovo／5-FU两株细胞间差异表达蛋白,并采用Western blot法鉴定筛选蛋白。结果与Lovo相比,Lovo／5-FU细胞对5-Fu和CDDP的IC。值分别升高31倍和3倍（均P〈0.01）。通过2DE—MS筛选得到。在耐药株中CAP—G和RhoGD12表达上调,6-PGL、DCI、Prdx-6和Maspin表达下调。Western blot检测显示．Lovo／5-FU细胞中RhoGD12和CAP-G较Lovo增高6．14倍和2．98倍（均P〈0．01）．而Maspin则明显下降至Lovo中的5．2％（P〈0．01）。结论结肠癌耐药性的产生是多基因、多通路改变的结果。CAP—G、RhoGD12、Masoin是潜在的结肠癌多药耐药相关基因。     

去左旋甲硫氨酸环境对小鼠免疫细胞功能的影响

目的:研究去左旋甲硫氨酸(L-Met)的培养液对小鼠免疫细胞功能影响.方法:从小鼠脾分离单个核细胞,在三组培养液中加入植物凝集素(PHA)体外诱导淋巴细胞,观察淋巴细胞增生功能,淋巴细胞亚群分布、T淋巴细胞活化分子表达及分泌IL-2数量.同时检测脂多糖(LPS)刺激单核/巨噬细胞分泌TNF-αt数量.结果:去L-Met培养液与含L-Met相比,PHA诱导的淋巴细胞增生,CD4 Th、CTL、NK细胞、B细胞亚群分布,CD4 Th细胞和CTL表面活化分子CD25、I-AK表达,淋巴细胞分泌IL-2数量差异均无显著性意义;LPS刺激单核/巨噬细胞分泌TNF-α数量无差异.结论:去L-Met的培养液不影响小鼠淋巴细胞免疫功能.     

以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗研究进展

树突状细胞作为一种目前已知的功能最强的抗原提呈细胞，可以体内外向Ｔ细胞提呈抗原并诱发ＣＴＬ反应。９０年代开始，ＤＣ在肿瘤免疫治疗中的作用逐渐受到重视。近年来，在ＤＣ的基础和临床应用研究方面取得了一些突破性的进展。     

胃癌相关激肽释放酶的筛选及其临床意义

目的:筛选并探讨胃癌相关激肽释放酶(kallikrein,KLK)在胃癌中的表达,及其与胃癌临床病理和预后的关系。方法:用cDNA微阵列检测胃癌组织及正常胃黏膜标本,筛选出在胃癌组织中差异表达的KLK;用real-timePCR方法进一步验证;再用免疫组化检测胃癌组织石蜡切片中之目标KLK表达水平,并分析其与胃癌病人临床特征及预后的关系。结果:胃癌组织中,KLK10表达上调9.55倍,KLK11表达下调12.02倍。KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况明显相关,而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无关;肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及KLK10和KLK11表达状况与病人的总体生存率明显相关。结论:胃癌组织中差异表达的KLK主要包括KLK10及KLK11;KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及病人的总体生存率明显相关;而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无相关,而与病人的总体生存率明显相关。     

甲硫氨酸限制对胃癌细胞蛋白表达谱的影响

目的分析甲硫氨酸限制对胃癌SGC7901细胞蛋白表达谱的影响。方法Hoechst荧光染色法及流式细胞术验证胃癌SGC7901细胞的凋亡,用双向凝胶电泳分析蛋白表达差异。结果胃癌SGC7901细胞在限制甲硫氨酸培养液中培养5天后,部分细胞的细胞核内出现凋亡小体。限制甲硫氨酸培养液中SGC7901细胞的凋亡率显著高于正常培养液组（P<0.01）。双向电泳技术分析筛选出16 个表达差异的蛋白点。结论甲硫氨酸限制可以导致胃癌SGC7901细胞部分蛋白表达增加或降低,进而诱导胃癌细胞凋亡。