乳猪肝细胞的分离、培养及功能检测

目的 为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法 采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞,并对其活力及单层和聚集培养后的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果 采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为(3.1±1.5)×10~(10),活性超过95％。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时,肝细胞功能良好,可维持2周左右。而在未加入激素和生长因子的培养中肝细胞虽能存活1周,但功能于24h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养,且生物学活性较单层培养显著提高。结论 采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本能满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大,细胞生物学活性高,可用于构建生物人工肝。     

HBcAg显性失活突变体质粒的构建及体外表达

目的：探讨HBcAg显性失活突变体质粒pCDNA4-C-GFP的构建及体外表达。方法：选择编码乙肝核心抗原C基因片段及绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP)基因片段，利用基因重组技术构建成DNA质粒pCDNA4-C-GFP,并将该质粒转染肝癌细胞株HepG2。结果：通过RT－PCR检测到其RNA的表达，Confocal观察到GFP绿色荧光。结论：HBcAg显性失活突变体质粒pCDNA4-C-GFP的构建成功可以进行对HBV作用的研究。     

224例医院下呼吸道感染危险因素

下呼吸道系统的医院感染，是住院患者最常见的并发症之一，严重危害了病人的身体健康。据报道，在我国医院感染中，其构成比为26％～42％，居医院感染各部位之首。现将2003年1～12月我院发生的224例下呼吸道医院感染的危险因素进行分析，了解其易感因素，以便提出有效的防治办法。     

协同刺激信号α—CD28单抗增强肿瘤特异性CTL体内外的杀瘤活性

目的 采用α－ＣＤ２８单抗增强α－ＣＤ３单抗刺激的肿瘤特异性Ｔ细胞的杀瘤活性。方法 采用２种方案培养ＦＢＬ－３免疫的小鼠脾细胞。（１）使用α－ＣＤ３单抗４８ｈ后,加入α－ＣＤ２８单抗同时使用４８ｈ后,加入α－ＣＤ３单抗、α－ＣＤ２８单抗和２０Ｕ／ｍｌ ｒＩＬ－２（α－ＣＤ３＋α－ＣＤ２８＋ＩＬ－２组）。＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准４ｈ－＾５１Ｃｒ释放法检测两组效应细胞的杀伤     

中医护理路径加中药导入熨疗在腰椎间盘突出症中的效果评价

目的评价药熨在腰椎间盘突出症中医护理路径中的作用。方法对2012年1月～2012年12月120例入组中医临床护理路径的腰椎间盘突出症患者随机分为两组,观察组60例按自拟中医护理路径护理,同时加中药导入熨疗,对照组60例护理同观察组,但不实施中药熨疗,分别比较两组患者症状改善情况及JOA(Joint Oper-ating Agreement)评分。结果观察组患者症状改善情况明显优于对照组,JOA评分明显较对照组高,由入院前(9.37±2.65)分增加到出院前(21.90±3.11)分,改善率为(62.72±17.34)%。结论药熨在腰椎间盘突出症中医临床护理路径中疗效显著。     

Caspase-12在D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠急性肝功能衰竭中的表达及作用

目的探讨Caspase-12在D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝功能衰竭发生发展过程中表达水平的变化及Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡途径在急性肝功能衰竭中的作用。方法以D-Gal/LPS联合腹腔注射诱导小鼠急性肝功能衰竭建立实验模型,在不同时间点动态检测血清氨基转移酶水平和观察肝组织病理变化,评估肝细胞凋亡和肝坏死演变过程;应用琼脂糖凝胶电泳检测肝细胞DNA凋亡条带;用半定量逆转录聚合酶链反应检测肝组织中Caspase-12 mRNA表达水平;west- ern blot检测Caspase-12、Bip/GRP78蛋白表达。结果药物诱导5h时肝组织中典型凋亡细胞增多,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)开始升高,Caspase-12 mRNA表达明显增加, Caspase-12蛋白量表达反而减少;7h镜下出现大量肝细胞凋亡和坏死,ALT、AST水平达高峰,分别为(2564±1384)U/L和(1198±497)U/L,正常对照组为(59±17)U/L和(135±12)U/L,Caspase- 12 mRNA表达仍增加,Caspase-12蛋白表达量继续降低;9h 肝细胞坏死明显,伴散在凋亡细胞,ALT、AST水平明显下降,Caspase-12 mRNA表达较7 h下降。Bip/GRP78蛋自表达从5 h开始,至7 h逐渐增加。结论D-Gal/LPS诱导小鼠急性肝功能衰竭早期Caspase-12 mRNA表达水平逐渐升高,后期(7-9 h)降低,与肝细胞凋亡发生的时相一致;Caspase-12蛋白酶因内质网应激而被大量活化,提示Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡参与炎症性急性肝功能衰竭的发生发展,是急性肝功能衰竭中肝细胞损伤的重要机制之一,提示早期干预Caspase-12表达及活化对急性肝功能衰竭可能具有保护作用。     

慢性乙型肝炎患者CD11c+髓样树突状细胞数量和功能的变化

BV形成免疫耐受是其持续感染的主要原因.树突状细胞(DC)作为体内最强的抗原递呈细胞,在诱导HBV特异性细胞毒T淋巴细胞反应中起重要作用[1].其中外周血DCs前体CD11c+髓样树突状细胞(mDC)主要发挥抗原提呈功能,促进Th1细胞极化和细胞免疫的发生[2].     

应用神经肌电促通仪和时值治疗周围神经损伤患者的效果分析

目的观察神经肌电促通仪(TENS-21)和时值对40例周围神经损伤患者的疗效观察。方法用TENS-21置于患者受损神经的运动点和受累萎缩的肌肉及肌腱粘连处。如桡神经损伤,主级放臂丛神经出口处,负极:一块板极放于桡神经外侧处,即前臂外侧,一块板极放于指总深肌处。用时值,方法同上,对于肌腱粘连用强剂量极短时间刺激。结果痊愈10例,显效28例,进步2例。结论应用TENS-21和时值对上肢周围神经损伤,可以促进患者局部血液循环,改善关节活动度,松解粘连,延缓肌萎缩,促进神经功能恢复。     

奥塔戈运动在国内外应用的研究进展

从奥塔戈运动的锻炼内容、近期发展、新技术引进等方面进行阐述,指出可尝试将奥塔戈运动与小组锻炼、DVD、智能平台等结合并大面积推广至社区、养老院,但如何在我国医疗体制下推广和改进奥塔戈运动还有待进一步研究。