结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12表达质粒联合免疫的细胞免疫应答观察

目的 观察结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠所诱导的细胞免疫应答.方法 15只C57BL/6N小鼠随机分为Mtb8.4基因疫苗 hIL-12质粒组(联合免疫组)、Mtb8.4基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组,基因疫苗、空载体和PBS经肌内注射法免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次,BCG组经尾部皮下注射1×106 CFU BCG免疫1次.ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果 联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液IFN-γ和IL-2水平(分别为1 493.340±8.128pg/ml、747.489±48.676pg/ml)显著高于Mtb8.4基因疫苗组,与BCG组相当,IL-4分泌减少,特异性CTL杀伤活性增强.结论 hIL-12表达质粒能够增强Mtb8.4基因疫苗所诱导的细胞免疫应答.     

乙型肝炎病毒转基因小鼠体内肝靶向反义RNA抗病毒疗效研究

目的：探讨半乳糖修饰的反义RNA真核表达质粒在乙型肝炎病毒转基因小鼠体内的抗病毒作用。方法：以半乳糖多聚赖氨酸（Gal-PLL)作肝靶向载体，将乙型肝炎病毒基因C区的反义RNA真核表达重组质粒（pCEP4-aC）制备为Gal-PLL－pCEP4-aC。将24只血清HBV DNA、HBsAg阳性的小鼠，随机等分为Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组、Gal-PLL-pCEP4对照组和生理盐水阴性对照组，于实验第1天尾静脉分别注射Gal-PLL－pCEP4-aC、Gal-PLL－pCEP4（100μg/只）和等体积的生理盐水，观察治疗前后血清HBV DNA以及HBsAg变化。结果：Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组21天时血清HBV－DNA转阴率62．5％（5／8），且7，14，21天时血清HBsAg明显降低；而Gal-PLL－pCEP4组血清HBV DNA转阴1只（1／8），生理盐水组8只均未转阴，两组用药后血清中HBsAg与用药前比较差异性均不明显（P＞0．05）。结论：肝靶向反义RNA能在乙肝基因小鼠体内抑制HBV的复制和抗原表达。     

肝肺综合征诊断和治疗探讨——附21例报告

目的：探讨肝肺综合征（HPS）临床诊断与治疗。方法：通过症状、体征、肺功能检查、血气分析及99m锝巨凝白蛋白（99mTcMAA）肺扫描等检查方法对21例HPS患者进行了临床观察。结果：HPS常有运动性呼吸困难，平卧呼吸、紫绀等临床表现，肺上均可见放射性缺损或减弱现象，未发现肺外器官标记，有直立性脱氧及变化程度较大的低氧血症。常规保肝治疗1～3月后，85．7％随肝功能恢复临床症状、肺放射性病变、低氧血症及直立性脱氧恢复正常。直立位氧分压及氧分压差治疗前后有显著差异性。结论：大部分HPS在早期能防肝功能恢复而自然痊愈．少数患者不能恢复，远期预后不良。     

人IL-12表达质粒联合含信号肽Mtb8.4基因疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果

目的研究结核分枝杆菌含信号肽Mtb8.4(MS)基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠后,诱导的细胞免疫应答及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。方法将40只C57BL/6N小鼠随机分为联合免疫组(MS基因疫苗 hIL-12组)、MS基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组。将基因疫苗、空载体和PBS,经肌内注射免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次;BCG组经尾部皮下注射1×106CFU BCG免疫1次。采用ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子的水平;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠细胞毒性T细胞的杀伤活性。用结核杆菌强毒株H37Rv静脉攻击小鼠后,计数肺和脾组织中结核杆菌的菌落数。对小鼠的部分肺和脾组织作病理切片,经HE染色观察组织病变的程度,经ZN染色检查抗酸杆菌,观察该疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。结果联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-2的水平,与BCG组相当,显著高于MS基因疫苗组,IL-4分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强,对小鼠结核杆菌感染有较好的免疫保护效果。表现为小鼠肺和脾组织中结核杆菌的菌落数显著减少,组织病变明显减轻,其效果与卡介苗(BCG)组相当,但优于MS基因疫苗组。结论以hIL-12表达质粒与MS基因疫苗联合免疫后,能显著增强MS基因疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。     

重组质粒导入真核细胞的两种方法比较

目的：比较糖化多聚赖氨酸介导和电穿孔两种方法将重组质粒导入真核细胞的优缺点。方法：用最佳电压、电容、温度、DNA浓度进行电穿孔转染,或者先使重组质粒与糖化多聚赖氨酸电性结合后,再与2.2.15细胞共同温育的方法,分别将pcEP4-aC重组质粒导入2.2.15细胞,经潮霉素筛选,比较两种方法的优劣。结果：两种方法都能成功地将重组质粒导入2.2.15细胞,但糖化多聚赖氨酸介导者,细胞生存时间较长。结论：糖化多聚赖氨酸导向配体具有良好的导入重组质粒进入肝细胞的功能,且更适合于应用。     

湖北省西北地区老年人慢性病患病状况及影响因素分析

目的探讨湖北省西北地区老年人慢性病现状及其影响因素,为慢性病的防治提供依据。方法运用"老年人多维度健康状况调查表"进行问卷调查,在农村地区和城市地区分别采用多阶段整群抽样方法、多阶段随机等距法抽取调查人口,共调查1 091人,获有效问卷1 001份,有效应答率为91.75%;分析城乡老年人慢性病患病情况及其影响因素。结果湖北省西北地区老年人慢性病患病率为61.76%,城乡老年人高血压、心脏病、偏头痛和慢性支气管炎的患病率较高。经济收入一般或差是城乡老年人慢性病患病的消极因素。家庭妇女、现在吸烟和参加体育锻炼是城市老年人慢性病患病的保护因素。女性、生活乐观和有宗教信仰是农村老年人慢性病患病的保护因素。结论经济收入是影响城乡居民慢性病患病的主要因素,政府亟需针对城乡老年人采取不同的重点措施来降低慢性病患病率。     

恩替卡韦联合抗病毒方治疗慢性乙型肝炎

目的观察恩替卡韦(ETV)与自拟抗病毒方联合用药治疗慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效。方法将60例CHB患者随机分为对照组和治疗组各30例,对照组单用ETV进行治疗,而治疗组在对照组用药基础上,加用抗病毒方进行治疗。两组均连续用药24周。药物的疗效通过ALT复常率、HBe Ag及HBV-DNA转阴率来评价。结果两组经治疗后,治疗组ALT复常率、血清HBe Ag及HBV-DNA转阴率分别为74.1%、15.7%、61.1%,与对照组66.2%、11.2%、58.5%相比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ETV与抗病毒方联合治疗CHB疗效优于单纯ETV治疗,其临床应用价值较高,值得推广。     

结核分枝杆菌Ag85A/HSP70 DNA疫苗的真核表达与免疫效应研究

目前卡介苗（BCG）作为临床上惟一使用的预防结核病的疫苗,效果并不稳定.同时BCG的接种会使结核菌素试验阳性,对结核病的诊断产生干扰,延误治疗时间,因此研制新疫苗成为当前结核病防治的首要任务.我们将结核分枝杆菌Ag85A和HSP70编码基因，以PCI-neo为载体，连接构建了PCI-Ag85A/HSP70 DAN疫苗，观察其免疫效应，以期用于结核病的防治工作。     

观光医疗发展行业标准初探

观光医疗作为新兴产业，发展迅速，在印度、泰国等国家已形成一定规模，并创造了巨大的效益。文章总结了观光医疗在这些国家的发展特色’对观光医疗行业标准进行了初步探讨。同时，对我国观光医疗的发展做了一些思考，并提出了几占、建议。     

脑缺血再灌注损伤中医药防治研究进展

脑缺血再灌注损伤发生于多种脑血管疾病中,其病理生理是一个多环节、多因素、多途径损伤的酶促级联反应,作用机制十分复杂,目前仍没有确切的治疗方法以减轻脑缺血再灌注后