低酶学水平的慢性HBV感染者肝组织学改变与CD28表达的相关性研究

目的研究低酶学水平(ALT≤3ulm)的慢性HBV感染者肝组织学改变及CD28的表达水平,探讨CD28与肝组织学变化及血清酶学(ALT)变化的相关性,为临床处理该类人群提供参考。方法①病例筛选:选取低酶学水平(ALT≤3ulm)、HBV-DNA定量≥103copies/ml的慢性乙肝病毒(HBV)感染病例71例行肝穿肝组织学检测;②肝组织病理检测:采用HE染色检测肝组织的炎症活动度和肝纤维化程度;③免疫组化:SP法检测肝组织中CD28的表达,在高倍镜下观察阳性细胞的表达,采用Image-ProPlus6.0彩色图像分析系统对图象进行分析。用积分光密度值(IOD值)表示其在肝组织中表达的强度。结果①病理学检查情况:71例患者中,肝组织学完全正常(G0S0)者3例(4.23%),肝组织学存在不同程度损害者68例(95.77%),其中早期肝硬化3例(4.23%)。②CD28表达:在所有检测的肝组织中均有表达,主要集中在胞浆中。在不同炎症活动度和纤维化程度的肝组织中,所测得阳性细胞的积分光密度值比较差异有统计学意义(P<0.05)。③ALT水平与CD28表达的关系:CD28表达在不同ALT分组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝组织中CD28的表达与肝组织炎症活动及纤维化进程有密切联系。     

Omi/HtrA2在窒息后血清诱导人近曲肾小管皮细胞凋亡中的作用

Objective To investigate the mechanism of inducing apoptosis of Omi/HtrA2 in renal tubular cells with postasphyxial serum of neonate. Methods Human renal proximal tubular cell line HK-2 cell was used as target cell. They were divided into three groups: control group, asphyxia group and Ucf-101 (Omi/HtrA2 special inhibitor) treated group. The challenge concentration of serum obtained from neonates 24 hours after asphyxia was 20%,and the treatment concentration of Ucf-101 was 10 μmol/L.The Omi/HtrA2 translocation in renal tubular cells was observed with confocal microscopy, and the rate of apoptosis was detected with flow cytometer. Results It was found that Omi/HtrA2 was translocated into cytoplasm in asphyxia group, and the rate of Omi/HtrA2 translocation in HK-2 cells of asphyxia group was significantly increased [(28. 1 % vs. (9.4±2.1)%, P<0. 01]. Compared with the control group, after being treated with postasphyxial serum, the rate of apoptosis of HK-2 cells in asphyxia group wa ssignificantly increased [(36. 3±4. 4)% vs. (12. 4±2. 9) %, P<0. 01]. Compared with asphyxia group, the rate of apoptosis in HK-2 cells in Ucf-101 treated group was significantly decreased [(27. 0± 3. 9)% vs. (36.3±4.4) %, P<0. 01]. Conclusion These experimental data demonstrates that postasphyxial serum of neonate can induce apoptosis of HK-2 cells, and translocation of Omi/HtrA2 from mitochondria into cyto-plasm may play an important role in its intracellular signal transduetion mechanism in induction of apoptosis.     

博尔泰力对儿童乙肝病毒感染疗效观察

目的　了解博尔泰力 (氧化苦参碱 )对儿童乙肝病毒感染的疗效。方法　比较博尔泰力与干扰素 -α对8～ 1 4岁儿童乙肝病毒感染的疗效。结果　博尔泰力治疗结束时综合疗效近期完全应答率 ( ALT复常、HBV-DNA、HBs Ag及 HBe Ag阴转 )为 1 8.8% ,部分应答率为 3 7.5 % ,血液中 HBV-DNA定量由 ( 48.7± 3 7.4)× 1 0 5cop/ml降为 ( 9.7± 8.0 )× 1 0 5cop/ml( P<0 .0 1 ) ,与干扰素治疗相比 ,完全应答率 1 5 .6% ;部分应答率 3 7.5 % ;HBV-DNA定量由 ( 5 1 .4± 3 8.8)× 1 0 5cop/ml降为 ( 1 2 .0± 9.9)× 1 0 5cop/ml( P<0 .0 1 ) ,两者差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ,疗效相当。 6月随访时完全应答率为 1 8.8% ,部分应答率 40 .6% ,HBV-DNA定量降为 ( 7.3± 6.4)× 1 0 5cop/ml,与治疗前比 P<0 .0 1 ,与干扰素 -α比应答率 2 5 .0 % ;部分应答率 3 7.5 % ;HBV-DNA定量降为 ( 8.7± 6.7)× 1 0 5cop/ml,与治疗前比 ( P<0 .0 1 ) ,疗效相近 ( P>0 .0 5 )。毒副作用小。结论　博尔泰力对儿童乙肝病毒感染与干扰素 -α有相似效果 ,治疗安全 ,可用于儿童乙肝病毒感染的治疗。     

靶向反义硫代寡脱氧核苷酸抗病毒疗效的实验研究

目的 探讨靶向反义硫代寡脱氧核苷酸（asODN)在乙型肝炎（HBV）病毒转基因小鼠体内抗病毒疗效。方法 设计合成针对HBV pre-C/C基因的反义硫代寡脱氧核苷酸：5'-CATGCCCCAAAGCCAC-3'，并以半乳糖－多聚赖氨酸（Gal15-PLL)作肝靶向载体。将12只血清HBsAg,HBV DNA阳性的转基因小鼠等分为Gal15-PLL-asODN治疗组及生理盐水对照组。靶向反义硫代寡脱氧核苷酸以每天每克体重15μg剂量，尾静脉注射给药，共12d，对照组用同样体积生理盐水同样方法给药。结果 注射Gal15-PLL-asODN 6d后，血清HBsAg已有下降（P＜0．05）；12d时显著下降（P＜0．01），且血清HBV DNA转阴率为66．7％（4／6），肝组织免疫组织化学HBsAg,HBcAg阳性肝细胞数较对照组明显下降（P＜0．05）；而生理盐水对照组无明显变化。结论 靶向反义硫代寡脱氧核苷酸在转基因小鼠体内能抑制HBV复制与抗原表达。     

新生儿窒息后血清诱导人肾小管细胞粘附中性粒细胞的作用及机制

目的研究新生儿窒息后血清诱导的人肾小管细胞粘附中性粒细胞的作用及机制。方法以HK 2细胞株为研究对象, 用含20%的窒息后血清作为诱导因素。实验分空白对照组、窒息组(窒息后1,3,7 d组)和吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)干预组。分别检测各组细胞悬液中髓过氧化物酶（MPO）活性;检测HK 2细胞膜ICAM 1和细胞核内NF κB的表达。结果窒息后1 d血清组细胞悬液MPO值显著高于各PDTC干预组、对照组及窒息后3,7 d血清组（P<0.01）。窒息后1 d血清组HK 2细胞表面ICAM 1表达和HK 2细胞核NF κB表达亦显著高于各PDTC干预组、对照组及窒息后3,7 d血清组（P<0.01）。结论 窒息后血清可以诱导肾小管上皮细胞活化进而粘附中性粒细胞,其作用机制可能涉及到窒息后血清活化了NF-κB,从而使肾小管上皮细胞膜表面ICAM-1表达增加,进而粘附中性粒细胞。     

AM 12质粒对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的观察AM12质粒(含HBV3.2kb全基因组)对体外培养的人近端肾小管上皮细胞表型转化的作用。方法以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)为对象,以AM12质粒转染HK-2细胞为转染组,以正常HK-2细胞作为阴性对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)的浓度。用免疫组织化学检测角蛋白(CK)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果转染组TGF-β1为(283.85±61.12)pg/ml,高于对照组(210.28±47.21pg/ml)(P0.05),肾小管上皮细胞免疫组化染色显示CK减弱,α-SMA增强。结论HBV-DNA质粒转染人肾小管上皮细胞可引起TGF-β1分泌增加,并导致肾小管上皮细胞转分化。     

西部地方医学院校临床医学专业毕业实习模式的探索

临床医学是泸州医学院的主要专业,笔者结合西部医疗资源和办学经验,从更新实习管理观念、实习规划、实习安排、实习监控、实习考核、毕业反馈等几个方面进行了阐述,提出了一套适合西部医学院校临床医学业五年制本科生培养目标的实习模式。     

HBV 与 HEV 重叠感染致慢加急性肝衰竭临床特征分析

目的：研究乙型肝炎病毒（HBV）与戊型肝炎病毒（HEV）重叠感染致慢加急性肝衰竭（ACLF）的临床特征。方法回顾性分析 HBV与 HEV重叠感染致ACLF患者35例（重叠感染组）;并筛选同期单纯HBV感染致ACLF患者37例作为对照（单纯HBV感染组）。比较两组患者肝肾功能、HBV DNA水平、血小板计数（PBC）、凝血功能、终末期肝病模型（MELD）评分及预后情况。比较重叠感染组存活和死亡患者临床特点,二分类非条件Logistic回归分析与HBV及HEV重叠感染预后相关的因素。结果与单纯 HBV感染组比较,重叠感染组患者总胆红素（TBIL ）、M ELD评分、肝性脑病发生率和24周病死率明显升高,凝血酶原活动度（PTA）明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。与重叠感染组存活患者比较,重叠感染组死亡患者肌酐（Cr）、MELD评分和肝性脑病发生率明显升高,PTA明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。TBIL（P＝0．024,OR＝1．006）、血小板计数（P＝0．019,OR＝0．983）、PTA（P＝0．001,OR＝0．795）、MELD评分（P＝0．005,OR＝1．497）及并发症肝性脑病（P＝0．001, OR＝4．147）与预后相关。结论 HBV与HEV重叠感染致ACLF患者病情更加严重,预后更差。TBIL、MELD评分及肝性脑病发生率越高,血小板计数和PTA越低,患者预后越差。