广州市石牌地区空气中花粉的调查

为了解广州市石牌地区致敏花粉在空气中传播情况,我们从1985年11月起作了两年调查。1985年11月～1986年10月调查已作摘要报告,现将1986年11月～1987年10月的调查报告如下。一、调查地点和方法在广州市东面天河体育中心以东石牌地区,中山医科大学附属第三医院内科病房三楼天台悬吊取样品,每天暴片1张,共收集暴片     

华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌两种基因分型方法的对比研究

目的 比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）两种基因分型方法的特点，为MRSA流行病学调查选用合适的基因分型方法提供参考。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增MRSA基因高变区（Hypervariable region，HVR），并根据扩增片段大小进行基因分型，同时与ERIC-2随机引物多态性DNA分型法进行比较，并观察不同退火温度条件下两种基因分型方法的差异。结果 50株MRSA以基因高变区（HVR）分型，可分为A、B、C、DE5种基因型，其中以B（47．3％）和D（32．1％）型多见，A（3．5％）、C（10．7％）、E（6．4％）型少见，当退火温度改变时，则不能分型；用ERIC-2随机引物对MRSA进行多态性DNA分型，在低退火温度下分为10种基因型，当退火温度明显改变时，仍能分型，但每型的扩增片断明显减少。结论随机引物多态性DNA分型和HVR基因分型两种方法均能用于MRSA感染的流行病学研究，HVR基因分型PCR反应温度控制严格，分型明确；而随机引物多态性ERIC-2的DNA分型随PCR退火温度的变化而变化，应用时需严格控制PCR退火温度等反应参数，否则重复性较差。     

Study on the Genotype of Extended-spectrum Beta-lactamases Mediated by Plasmid in Southern China

Alongwiththewidespreaduseoftheextended spectrum beta lactamase(ESBL)antibioticswithinlast20years, theemergenceofESBLs producingstrainsamongmembers ofthefamilyEnterobacteriaceaehasbecomeaworldwide problem.TheESBLsdescribedtodatebelongtotheBush group2orAmbl…     

万古霉素耐药肠球菌对院内肠球菌肺部感染预后的影响

目的 探讨万古霉素耐药肠球菌对医院内肺部感染预后的影响。方法 应用回顾性调查的方法对1993年1月～2001年12月96例医院内肺部肠球菌感染病人进行分析。结果 96例院内肺部肠球菌感染以粪肠球菌为多(73％)，屎肠球菌次之(22％)。肠球菌对临床常用抗生素的耐药率高，对万古霉素的耐药率为12．5％，屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌。96例肺部肠球菌感染患者，病死率40％(38/96)。感染的肠球菌对万古霉素耐药的病人病死率最高，达92％，明显高于万古霉素敏感肠球菌肺感染的病死率(26％)(P＜0．05)。结论 万古霉素耐药肠球菌肺感染发病率呈上升趋势，病死率高，需引起临床的高度重视。     

白念珠菌AP-PCR基因分型与耐药性关系研究

目前白念珠菌的耐药表型与基因型的关系仍不清楚，寻找一种恰当的基因分型方法，探讨其与耐药表型的关系，对监测耐药株的分子流行病学以及深化耐药分子机制的研究有重要的临床意义。以我院近3年出现的8株耐药白念珠菌（MIC〉64μg/ml），及用体外氟康唑诱导的方法，诱导了2株耐氟康唑白念珠菌，同期选择了48株临床敏感白念珠菌，共58株采用AP-PCR（Arbitrary primod-PCR, AP-PCR）技术对其进行了基因分型。将其电泳图谱扫描入计算机后采用Lab-work 4．0软件转化为数值图表后进行聚类分析，以探讨耐氟康唑白念珠菌基因多态性是否与其耐药性相关。     

溶葡萄球菌酶对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性

目的 :探讨溶葡萄球菌酶对万古霉素低敏耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的抗菌活性。方法 :琼脂稀释法测定万古霉素和溶葡萄球菌酶对MRSA的最低抑菌浓度 (MIC) ,棋盘法检测 2药联合抑菌作用。结果 :万古霉素对其敏感或低敏MR SA的MIC90 分别为 2mg·L- 1,8mg·L- 1;溶葡萄球菌酶对万古霉素敏感或低敏MRSA的MIC90 分别为 0 .2 5mg·L- 1,0 .5mg·L- 1;2药联合对其敏感株和低敏株的FIC90 (FIC为联合抑菌分数 )较万古霉素单独应用时MIC90 分别减少 4倍和 8倍 ,较溶葡萄球菌酶单独应用时均减少 4倍。FIC指数均小于0 .5。结论 :溶葡萄球菌酶对万古霉素敏感或低敏的MRSA均有良好的体外抗菌活性     

铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制——耐药株外膜蛋白OprD_2缺失

目的;研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法:以亚胺培南为代表,应用十二烷酸磺酸钠－聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)外膜蛋白图谱、凝胶分光光度扫描分析方法,分别研究临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株和亚胺培南敏感株。结果:耐药组OprD2相对含量显著低于敏感组。结论:OprD2的缺失是铜绿假单胞菌对以亚胺培南为代表碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因。     

医院内MRSA肺炎多重病原体感染及其药敏分析

探讨医院内 MRSA肺炎严重混合感染的病原体分布及其对常用抗生素药物敏感性。选择本实验室近 4年来确诊医院内 MRSA肺炎病人痰标本分离的致病菌 ,采用 K- B纸片及 E- test方法分别检测混合感染细菌和真菌对常用抗生素的体外敏感性。结果 6 4例次院内混合感染病原体中细菌 46例次占 71.88% ,真菌 18例占 2 8.13%。细菌对 13种常见抗生素呈现不同程度的严重耐药。其中除曲霉耐氟康唑外 ,部分白念珠菌也出现耐药 ,伊曲康唑和两性霉素 B效果较好。提示医院内 MRSA肺炎常合并多重高度耐药菌感染 ,治疗困难 ,必须进行严格的细菌学分析和耐药监测 ,及时选用有效抗生素。     

产超广谱β内酰胺酶临床分离株可转移多重耐药分子机制的研究

目的 研究产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)临床分离株可转移多重耐药性的分子机制。方法 采用E-试验条进行药敏检测，电转化试验筛选、分离耐药质粒，聚合酶链反应(PCR)扩增Ⅰ型整合子基因盒插入序列及其分子克隆和序列分析。结果 9个产ESBLs耐药质粒中有8个检测出了插入序列，其中7个携带了1～2种抗药性基因盒。包括氨基糖苷类钝化酶aacA4、aadA2和aadA5；甲氧苄啶钝化酶dhfrA12和dfrA17；利福平钝化酶arr-3；氯霉素外排蛋白cmlA6。基因盒功能与转化子耐药表型一致。结论 质粒定位和整合子介导的抗药性基因盒可能是导致ESBLs产酶株多重耐药性产生和(或)播散的重要原因。