老年人口腔白色念珠菌的分布与基因分型研究

目的研究健康老年人口腔白色念珠菌的分布、基因型特点及基因型特点与白色念珠菌分布的相关性。方法来自成都地区212例老年人分为4组：A1（男性，有义齿）；A2（男性，无义齿）；B1（女性，有义齿）和B2（女性，无义齿）。CHROMagar Candida^TM鉴定培养基、碳水化合物同化反应鉴定体系（API 20C AUX）和随机扩增片段多态性分析（randomly amplified polymorphic DNA assays，RAPD）鉴定白色念珠菌。RAPD分析健康老年人口腔白色念珠菌分离株的基因型特征。统计学分析比较不同分组健康老年人口腔白色念珠菌基因型之间的差异。结果212例受检个体中检出89株白色念珠菌（42％），A1、A2、B1、B2白色念珠菌检出率分别为56．2％、21．3％、56．6％、38％。A1组与A2组白色念珠菌检出率差异有统计学意义，P〈0．01。以JWFP和NA为随机引物的RAPD分析将白色念珠菌分为5型。RAPD分析基因型构成在A1组与A2组之间比较差异有统计学意义，P〈0．05，A1组主要以A型为主。结论健康老年人口腔白色念珠菌的检出率与义齿修复相关。义齿修复可能促进具有特定基因型特点的白色念珠菌检出率增高。     

乙型肝炎病毒基因分型方法及和分子流行病学意义

自１９９８年Ｏｋａｍｏｔｏ初步建立了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因Ａ～Ｄ分型标准后，目前ＨＢＶ ＤＮＡ基因型已分为Ａ～Ｆ六型。本文就乙型肝炎病毒基因型的分型方法及其临床和分子流行病学意义的有关情况作一简要综述。     

白假丝酵母菌基因分型技术的研究

白假丝酵母菌是假丝酵母菌性外阴阴道病最常见的致病菌种。对致病菌快速准确地分型在研究其所致的感染性疾病的发病机制及诊治措施中发挥重要作用,并且有利于致病菌的流行病学调查。因此本文就用于白假丝酵母菌研究的基因分型技术作一综述。     

中国莱姆病螺旋体的核糖体基因分型研究

目的 莱姆病螺旋体的基因型和临床表现、疫苗菌株和抗原菌株的选择存在密切的关系,所以对中国菌株进行分子流行病学研究,可为莱姆病的防治提供科学依据。方法 5S－23S rRNA基因间隔区RFLP分析和16＋23S rRNA基因RFLP分析。结果 中国菌株至少被分为3个基因型（B.burgdorferi sensu stricto、B.garinii和B.afzelii),B.garinii和B.afzelii占优势,B.burgdorferi sensu stricto少见。少数菌株用上述方法尚不能明确其分类地位,需进一步研究,中国很可4能存在世界上独特的新基因型。结论 中国菌株的基因型明显不同于北美菌株,而同欧洲菌株比较接近,5S－23S rRNA基因间隔区RFLP分析方法简便、快速、准确,是理想的基因型分类方法,可作为国内菌株基因型鉴定的常规方法。     

口腔感染白色念珠菌的基因分型及药敏分析

目的 研究口腔黏膜念珠菌病患者白色念珠菌的基因分型及药敏试验分析.方法 采用聚合酶链反应（PCR）对78株口腔白色念珠菌基因分型,用纸片扩散（K-B）法进行药敏试验,测定白色念珠菌不同基因型对两种临床常用抗真菌药物的敏感性,采用SPSS16.0软件包对数据进行统计分析.结果 口腔念珠菌病患者唾液中分离的白色念珠菌A型占57.7％,B型占26.9％,C型占15.4％.药敏试验结果为：78株白色念珠菌对氟康唑敏感的占89.7％,对伏立康唑敏感的占98.7％,对伏立康唑敏感率高于氟康唑（P＜0.05）.结论 引起口腔黏膜念珠菌病的白色念珠菌基因呈多态性,且不同基因型对抗真菌药物的敏感性存在较大差异,基因分型对口腔念珠菌病的诊断及合理用药有重要意义.     

广西乙型肝炎病毒基因分型及其临床意义的研究

目的 了解广西乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义。方法 用套式PCR扩增检测广西南部和北部[桂南和桂北]的各型乙型肝炎患者和慢性无症状HBV携带者共161份血清HBV DNA，阳性者用限制性片段长度多态性(RFLP)方法、直接测序法或克隆测序法进行基因分型。结果 广西HBV各种基因型分布比例：基因型A占3．7％，基因型B 21．7％，基因型C 72．7％、基因型D 1．2％；未发现基因型E、F、G和H。基因型C在慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌患者组中流行呈增加趋势，基因型B的流行与基因型C比较呈相反趋势(主要在慢性无症状HBV携带者和急性肝炎流行率相对较高)；基因型C组的HBeAg阳性率显著高于基因型B组，而基因型C组抗—HBe阳性率显著低于基因型B组。在基因型C组的肝脏损伤(ALT)比基因型A和B组更为严重；而在慢性无症状HBV携带者组中，基因型C在桂南的流行率显著高于桂北，基因型B的情况则相反。结论 ①广西主要流行的HBV主要为基因型B和C，桂南主要为HBV基因型C，桂北则主要为HBV基因型B，提示广西HBV基因型由于其流行分布的不同与广西肝癌发病率桂南高于桂北有关。②基因型C与较严重的肝脏疾病如肝癌的发生有关。③首次发现广西的急性肝炎、慢性肝炎存在少量的HBV基因型A型、D型和B C的混合型的流行。     

我国stx-大肠埃希菌eae基因分型的研究

目的：了解我国大肠埃希菌LEE毒力岛eae基因的分布流行病学特征。方法：对从浙江省分离的20株携LEE毒力岛大肠埃希菌株的eae基因3ˊ端部分以PCR法和限制性酶切法进行分型，未能分型的进行核酸序列测定，确定型别；对LEE毒力岛在染色体上的插入位点进行鉴定，对菌株进行ERIC-PCR分型。结果：20株大肠埃希菌的LEE毒力岛的eae基因以β型为主（占45.00%），用限制酶切β型可进一步分为二个亚型，γ型eae与EHEC O157：H7 933株的γ型eae酶切图谱差异较大。对未能用PCR法分型的3株eae阳性大肠埃希菌菌株，其推定的intimin C端氨基酸序列分析结果表明，96-1株为γ2型，C130-1株为ε型的新亚型（C端序列与ε型最相近，一致性为83.39%），97-3株C端序列与α型最相近（一致性为58.06%），将其定为新的λ型。另外发现97-3株中，1个IS200变种插入到eae和escD基因间隔区。9株菌的LEE插入位点为selC，其中2株同时还存在完整的selC位点；另11株可能存在着除selC和pheU以外的插入位点。几乎所有20株菌间的ERIC-PCR指纹呈现不同程度的差异，同一型的eae可出现在指纹相差很大的菌株中，但同时也存在着少量的携同型eae的同一克隆群菌株。结论：我国分离的stx^-大肠埃希菌eae基因在3ˊ端有较高的多态性，eae基因型别并不能反映菌株间亲缘关系，可能存在有新的LEE毒力岛插入位点。     

NQO1基因C609T多态性与乳腺癌分子分型的关系及意义

目的探讨乳腺癌中醌氧化还原酶1(quinone oxido reductase 1,NQO1)基因第6外显子(C609T)多态性的分布,并分析其与乳腺癌分子分型的关系。方法采用高通量Taq Man MGB实时荧光定量PCR技术对248例女性乳腺癌患者外周血中的NQO1基因C609T rs1800566位点进行基因分型检测;应用免疫组化SP法染色及FISH基因扩增技术检测ER、PR、HER-2及Ki-67的表达。结果 248例乳腺癌中,CC基因型占27.42%(68/248)、CT基因型占49.60%(123/248)、TT基因型占22.98%(57/248),符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05);5例HER-2()患者未行FISH检测,予以剔除,其余行FISH检测:Luminal A型占15.2%(37/243)、Luminal B型占51.4%(125/243)、HER-2过表达型占19.8%(48/243)、基底细胞型占13.6%(33/243);携带CT和TT基因型者较携带CC基因型患者的乳腺癌组织中ER、PR阳性率明显升高(P<0.05),HER-2及Ki-67蛋白表达在两组中的差异无统计学意义(P>0.05);NQO1基因C609T多态性在不同分子分型的乳腺癌中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NQO1基因C609T多态性与乳腺癌的分子分型无关,NQO1基因(CT+TT)在基底细胞型乳腺癌中缺失率较低,其基因多态性可为分子分型中乳腺癌的异质性提供合理解释。     

增城与广州地区乙型肝炎病毒基因分型比较研究

目的 增城地区与广州地区的乙型肝炎病毒基因型的差异性比较．方法 利用荧光PCR法对HBV携带者进行基因分型。结果 增城地区B型占87．0％，C型占11．6％，BC混合型占1．4％，没有发现D型；广州地区B型占48．9％，C型占43．7％，BC混合型占6．5％，D型占0．9％。结论 增城与广州HBV DNA基因分型存在一定差异。     

TAC1在白念珠菌对抗真菌药物产生耐药性中的作用

由于器官移植患者大量使用免疫抑制剂、癌症患者长期接受放化疗以及广谱抗生素的滥用和艾滋病的广泛传播，免疫功能低下者人数不断增多，真菌感染发生率逐年增加，尤其是白念珠菌（Candida albicans）感染最为常见。三唑类药物氟康唑是治疗念珠菌感染的常用药物，长期用药和重复给药往往会引起耐药现象，最终导致治疗失败。目前已经明确的白念珠菌的耐药机制主要包括：     

耐甲氧西林金黄葡萄球菌高变区基因分型及其与耐药性的关系

目的 调查本地区耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)的高变区(HVR)基因分型,分析HVR基因型与MRSA耐药谱的关系,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用.方法 收集80株MRSA,采用PCR方法扩增MRSA的HVR,并根据扩增片段大小进行基因分型.同时统计各MRSA菌株对多种抗菌药物的药敏结果,并分析基因型与耐药性的关系.结果 根据PCR产物片段大小,80株MRSA被分为A、B、C、D、E 5种基因型,其中以D和E型多见,分别占61.25%和21.25%,A(3.75%)、B(5.00%)、C(8.75%)型少见.各基因型MRSA除对万古霉素敏感外,对头孢唑啉、庆大霉素、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、环丙沙星、复方新诺明、阿米卡星的耐药率为61.5%～100%.结论 MRSA的HVR基因分型是一种快速、简单、可靠的分型方法,适用于MRSA感染的流行病学调查,有利于抗菌药物的选用.     

特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合对氟康唑诱导耐药稳定白念珠菌的影响

目的探讨特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合抗氟康唑诱导产生的耐药稳定白念珠菌的作用.方法采用多步诱导法,在YEPD培养基中,利用氟康唑诱导白念珠菌敏感株产生耐药稳定菌株.根据美国国家临床实验标准委员会（NCCLS）制定的标准,采用棋盘微量稀释法测定特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑对耐药稳定菌株的联合药敏试验,并对诱导耐药稳定菌株ERG11基因的编码区序列进行DNA测序.结果临床敏感菌株和标准敏感菌株能被诱导形成耐药菌株,但大部分不稳定,诱导耐药稳定株ERG11基因的编码区DNA测序有突变点存在,特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联用对诱导耐药稳定株可产生协同作用.结论特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合应用对基因突变产生的耐药株有协同作用,可阻止或延迟氟康唑诱导的耐药性白念珠菌菌株的产生.     

增城与广州地区乙型肝炎病毒基因分型比较研究

目的增城地区与广州地区的乙型肝炎病毒基因型的差异性比较.方法利用荧光PCR法对HBV携带者进行基因分型.结果增城地区B型占87.0%,C型占11.6%,BC混合型占1.4%,没有发现D型;广州地区B型占48.9%,C型占43.7%,BC混合型占6.5%,D型占0.9%.结论增城与广州HBV DNA基因分型存在一定差异.     

梅毒螺旋体的基因分型与临床意义北大核心CSCD

随着测序技术的成熟,梅毒螺旋体在世界各地被发现不同亚种,以双基因法或三基因法进行分型得到广泛认可。在推动梅毒分子流行病学发展的同时,螺旋体的毒力、血清固定现象、耐药性及发病部位等临床特点被发现与基因分型存在一定相关性,如14f/f的毒力可能更强,血清固定现象更容易发生在Tpr i基因菌株感染的患者,耐大环内脂类药的菌株可能与A2058、A2059基因相关等,本文将就此进行综述。     

HBV基因分型的研究与应用进展

HBV有A～H 8种不同的基因类型,呈地域性分布,其中A、B、C、D、F、H 6种基因型存在不同的亚型.在中国主要以B、C型为主,可见A、D型及部分混合型,F型罕见,尚未发现其他基因型.目前认为HBV基因型与慢性HBV感染的传播方式、流行特征、自然病程、病情预后、抗病毒药物疗效及HBV的变异有关.A型与C型关联到肝损害的严重程度;C型比B型更容易发生基本核心启动子(BCP)T1762-A1764双突变;HBV基因型还可能与血清转换有关;A型对干扰素的应答率较D型高;B型对干扰素及拉米夫定的持续应答优于C型.虽然近年来对HBV基因型的研究迅速增多,但各家报道差异较大,尚有诸多问题悬而未决,对HBV基因型的全面认识,还有待于进一步的国际化合作.     

RhCE血型基因分型与血清学分型的比较研究

目的 对中国汉族、新疆维吾尔族和哈萨克族人的RHCE基因进行定型,并与血清学分型结果进行了比较.方法 使用PCR-序列特异性引物技术对98例随机非血缘关系汉族RhD阳性样本和RhD和RHD均为阴性汉族人样本230例,新疆维吾尔族人样本72例、哈萨克族人样本18例进行RHCE基因定型.结果 RhD阳性和RhD阴性样本中RHE/RHe等位基因定型结果都与其血清学结果相符;在中国汉族人中,利用RHCE基因第1外显子的nt48的C→G多态性来检测RHC等位基因将产生4.44%的错误,利用109 bp插入序列这一多态性来检测RHC等位基因,将导致4.05%的漏检;表型为RhD阴性的72例随机非血缘关系维吾尔族人和18份哈萨克族人样本的RHE/RHe和RHC/RHc等位基因定型结果与血清学的一致,没有发现假阳性和假阴性.结论 使用PCR-序列特异性引物技术对RHE/RHe和RHc进行基因定型结果准确,与血清学结果相符;利用RHCE基因第1外显子第48位多态性来检测RHC等位基因会因RHc在此位点的突变干扰而导致假阳性结果;利用109 bp插入序列来检测RHC等位基因会因109 bp的缺失而导致假阴性结果,对RHC等位基因定型必须用两种以上的多态性来检测.     

VNTR技术用于安徽省耐药结核分支杆菌基因分型的初步研究

目的 探讨VNTR（variable number of tandem repeat）技术在安徽省耐药结核分支杆菌基因分型中的应用。方法初步选取13个分型效果较好的VNTR基因位点。应用聚合酶链反应（PCR）和琼脂糖凝胶电泳，建立检测耐药结核分支杆菌DNA指纹多态性的方法，分析耐药结核分支杆菌DNA多态性。结果共对78株耐药结核分支杆菌的13个VNTR位点进行了检测，根据这些菌株的指纹多态性特征，共分为4个基因型（Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型），分别为Ⅰ型3．8％（3／78）、Ⅱ型6．4％（5／78）、Ⅲ型10．3％（8／78）、Ⅳ型所占比例最大，为79．5％（62／78）。在Ⅳ型菌中，耐药菌株主要为耐多药（结核分支杆菌至少耐异烟肼和利福平两种药）和单耐利福平菌株，其所占比例分别为45．8％和22．6％。结论本资料分析表明，安徽省耐药结核分支杆菌的传播似以Ⅳ型菌株为主，应加强此型菌株流行的监控。     

胎儿弯曲菌龟亚种中国分离株的种群结构、毒力基因及耐药性分析

目的了解胎儿弯曲菌龟亚种(Campylobacter fetus subsp.testudinum, Cft)的分子流行病学特征。方法对本实验室2010—2022年收集的15株胎儿弯曲菌龟亚种进行全基因组测序, 结合GenBank公布的全球Cft基因组数据进行流行病学分析;MLST-GrapeTree分析Cft的群体遗传结构;核心基因组单核苷酸多态性位点(cgSNP)构建Cft的系统发育树, rhierBAPS确定其种群结构;CARD、ResFinder及VFDB注释Cft的耐药及毒力基因;E-test法进行药敏试验, 并参考CLSI-M45空肠/大肠弯曲菌药敏标准进行结果解释。结果基于基因组平均核苷酸一致性(ANI)分析, 共纳入全球41株Cft基因组信息, 其中人类来源24株, 动物来源13株, 未知来源4株。流行病学资料显示, 24株人类来源菌株中, 20株感染对象为黄种人, 1例为白种人(配偶是亚裔), 其余未知, 差异分布具有统计学意义。13株动物来源菌株均分离自爬行动物, 包括龟类6株、蛇类4株、蜥蜴类3株。MLST分型显示, 中国分离株以ST46为主要序列型, 美国则以S...     

5-ALA诱导白念珠菌生成PpIX与ALA浓度相关性研究

目的 对不同浓度光敏剂5-氨基酮戊酸(5-ALA)在白念珠菌体内生成原卟啉IX (PpIX)进行荧光强度测定,探求PpIX荧光强度与ALA浓度的关系.为光动力治疗白念珠菌选择最佳的光敏剂浓度提供理论依据.方法 实验分为实验组和对照组,将各组白念珠菌悬液与不同浓度5-ALA混合后避光60min孵育.利用共聚焦激光扫描显微镜测量PpIX荧光强度.结果 实验组白念珠菌与不同浓度ALA避光孵育后均有荧光物质PpIX产生,200mg/mL以上ALA浓度组产生的PpIX强度无统计学意义.300mg/mL以下ALA浓度与PpIX生成强度有相关性.对照组没有检测到PpIX.结论 ALA浓度与生成的PpIX荧光强度密切相关.这为临床ALA-PDT治疗白念珠菌疾病提供了实验依据.     

乳腺癌多药耐药性机制及逆转方法研究近况

乳腺癌严重威胁着女性健康,化学药物治疗在乳腺癌的治疗中起着举足轻重的作用,但临床治疗中常因乳腺癌细胞产生多药耐药性而导致化学药物治疗的失败。笔者就乳腺癌细胞多药耐药性的相关蛋白及基因、酶类等多药耐药性相关机制进行了详细论述．并介绍了化学药物、基因技术、中药、药物载体在逆转乳腺癌多药耐药性中的应用及目前研究进展。