抗心律失常药物靶点——IKr/HERG通道的调控机制研究

目的探讨快速延迟整流钾电流（IKr／HERG）在缺血性心律失常发生过程中的调控作用及机制。方法新西兰兔12只，随机分为对照组和缺血组，采用酶解法分离单个心室肌细胞，应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IKr／HERG变化趋势；应用Western blot技术，检测转染小RNA（miRNA）后人乳腺癌（SKBr3）细胞IKr／HERG通道蛋白表达量的改变。结果IKr／HERG在实验电压＋60mV下，缺血组（2．25±0．31）pA／pF明显低于对照组（3．81±0．64）pA／pF；miRNA转染进入SKBr3细胞后，细胞膜IKr／HERG通道蛋白表达量降低，仅是对照组的10％。结论miRNA调控IKr／HERG通道蛋白的表达，进而抑制IKr／HERG，参与缺血性心律失常的发生与发展。     

锦灯笼水提物对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制

目的观察锦灯笼水提物对大鼠离体胸主动脉环的舒血管作用并探讨其作用机制。方法采用大鼠胸主动脉环张力测定法。结果在内皮完整及去内皮血管上,锦灯笼水提物均浓度(0.5～64g/L)依赖性地降低苯肾上腺素(1.0×10-5mol/L)及氯化钾(6.0×10-2mol/L)预收缩血管的张力;一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对锦灯笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);钾通道阻断剂TEA、4-氨基吡啶(4-AP)、格列苯脲对锦竹笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);但在无钙环境下,锦灯笼水提物对苯肾上腺素预收缩血管的舒张作用明显减弱,与有钙液相比,差异显著(P<0.01)。此外,锦灯笼水提物对PDBu预收缩的血管有明显的舒张作用(P<0.01)。结论锦灯笼水提物的舒张血管作用表现为非内皮依赖性,其舒张作用可能有与其抑制外钙内流,以及抑制PKC信号传导通路有关。     

大明胶囊对大鼠心肌梗死预防性保护作用的研究

目的观察大明胶囊对大鼠心肌梗死的预防性保护作用。方法对大鼠预防性给予大明胶囊1wk后,结扎其左冠脉前降支造成心肌梗死。通过测量心肌梗死面积,观察心肌酶学指标、病理形态学和组织超微结构的改变,评价大明胶囊对心肌梗死的预防性保护作用。结果心梗染色面积和心肌酶学指标显示(与模型组相比),大明胶囊灌胃后心肌梗死面积减少(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量降低(P<0.05)。心肌形态学和超微结构显示,大明胶囊减轻了左冠脉前降支结扎所造成的心肌损伤。结论通过心梗面积、心肌酶学指标、形态学和超微结构的观察,大明胶囊能预防性保护心肌梗死所造成的损伤。这提示大明胶囊可能应用于心肌梗死治疗。     

三氧化二砷对海马神经元细胞内钙离子浓度的影响

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对海马神经元细胞内钙离子([Ca2 ]i)浓度的影响与其神经毒性的可能机制.方法 用激光共聚焦显微镜结合Fluo-3-AM观察As2O3对大鼠原代培养的海马神经元[Ca2 ]i的影响.结果 有钙液中10 μmol/L、100 μmol/L As2O3升高海马神经元[Ca2 ]i与对照组相比[Ca2 ]i分别提高了0.24±0.09和0.41±0.08.20 μmol/L的维拉帕米不能阻断10 μmol/L As2O3升高[Ca2 ]i作用.无钙液中10 μmol/L、100 μmol/Ls2O3升高海马神经元[Ca2 ]i与对照组相比[Ca2 ]i分别提高了0.12±0.06和0.30±0.07.100 μmol/L 2-APB阻断了10 μmol/L As2O3升高[Ca2 ]i作用.结论 As2O3可以升高海马神经元[Ca2 ]i,IP3信号转导途径可能参与As2O3升高海马神经元[Ca2 ]i.     

缺血性心律失常相关微小RNA在大鼠心脏的表达变化

目的 筛查缺血预适应大鼠心脏微小RNA(microRNA,或miRNA)的表达变化,寻找与缺血性心律失常相关的微小RNA.方法 SD大鼠随即分为假手术组和缺血预适应组(IP),每组3只.应用手术套管法建立在体大鼠心肌缺血预适应模型(5min缺血、5min再灌,三个循环).建模4h后取材提取RNA,应用微小RNA芯片技术检测IP组非缺血再灌注区(a)、IP组缺血再灌注区(b)和假手术组(c)心肌组织小RNA的表达情况.结果 同假手术组相比,缺血再灌区心肌有4个miRNA上调,5个miRNA下调;缺血预适应组非缺血再灌区有23个miRNA上调,包括三个肌肉特异表达的miRNA(mir-1、mir-133和mir-206),另有9个miRNA表达下调.结论 在心肌缺血预适应过程中,心肌微小RNA的表达发生明显变化,这些微小RNA可能对缺血预适应介导的抗心律失常起重要调节作用,为缺血性心律失常机制研究提供了新思路.     

白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用

背景:白藜芦醇是一种广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的多酚类化合物。现已明确白藜芦醇具有多种生物活性,如抗肿瘤,抗炎等。许多证据表明白藜芦醇具有防治心血管疾病的作用,但其机制并不明确。目的:观察白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其作用机制。设计:随机分组平行对照实验。单位:哈尔滨医科大学药学院药理教研室和黑龙江省生物医药重点实验室。材料:实验于2005-03/07在哈尔滨医科大学药学院完成。选用健康成年Wistar大鼠60只,体质量250～300g。随机将大鼠分为5组:假手术组,空白对照组,白藜芦醇低、中、高剂量组(5,15,45mg/kg),每组12只。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。假手术组:只穿线不结扎。白藜芦醇组:按5,15,45mg/kg剂量静脉注射白藜芦醇(购自湖南华光生物制品有限公司,生产批号:20050221,纯度≥99%)10min后结扎。模型组:静脉注射等量生理盐水10min后结扎。分别观察大鼠左冠状动脉前降支结扎前及结扎后1,5,10,15,30min标准Ⅱ导联心电图ST段的变化情况。心肌缺血6h后进行心肌红四氮唑染色确定心肌梗死面积;紫外分光光度法测定血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力,确定心肌损伤程度。采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡指数;采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测凋亡相关基因Fas,Bcl-2及Bax的蛋白表达情况。计量资料差异比较采用t检验。主要观察指标:各组大鼠冠状动脉结扎后的ST段上移情况,血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力,心肌细胞凋亡指数,凋亡相关基因Fas,Bcl-2及Bax的蛋白表达情况比较。结果:大鼠60只均进入结果分析。①结扎后1,5,10min白藜芦醇中、高剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组(P<0.05),结扎后15,30min白藜芦醇各剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。②白藜芦醇各剂量组大鼠心肌梗死面积明显小于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。③白藜芦醇组血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平明显低于模型组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。④模型组心肌细胞凋亡指数明显高于白藜芦醇各剂量组(P<0.05),模型组Bax和Fas蛋白阳性表达指数明显高于白藜芦醇中、高剂量组(P<0.05),Bcl-2蛋白阳性表达指数明显低于白藜芦醇中、高剂量组(P<0.05),且该种作用呈剂量依赖性。结论:白藜芦醇对结扎大鼠冠状动脉诱发的急性心肌缺血损伤具有保护作用,且该种作用呈剂量依赖性;白藜芦醇发挥心肌缺血保护作用的机制与其调节Fas,Bcl-2及Bax蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡有关。     

白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用

背景：白藜芦醇是一种广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的多酚类化合物。现已明确白藜芦醇具有多种牛物活性，如抗肿瘤，抗炎等。许多证据表明白藜芦醇具有防治心血管疾病的作用，但其机制并不明确。 目的：观察白藜芦醇对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其作用机制。 设计：随机分组平行对照实验。 单位：哈尔滨医科大学药学院药理教研室和黑龙江省生物医药莺点实验室。 材料：实验于2005—03／07在哈尔滨医科夫学药学院完成。选用健康成年Wistar大鼠60只，体质蕈250-300g。随机将大鼠分为5组：假手术组，空白对照组，白藜芦醇低、中、高剂量组（5，15，45mg／kg），每组12只。 方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。假手术组：只穿线不结扎。白藜芦醇组：按5，15，45mg／kg剂量静脉注射白藜芦醇（购自湖南华光生物制品有限公司，生产批号：20050221，纯度／〉99％）10min后结扎。模型组：静脉注射等量生理盐水10min后结扎。分别观察大鼠左冠状动脉前降支结扎前投结扎后1，5，10，15，30min标准Ⅱ导联心电图ST段的变化情况。心肌缺血6h后进行心肌红四氯唑染色确定心肌梗死面积；紫外分光光度法测定血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力，确定心肌损伤程度。采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡指数；采用链霉索抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测凋亡相关基因Fas．Bcl-2及Bax的蛋白表达情况。计量资料差异比较采用t检验。 主要观察指标：各组大鼠冠状动脉结扎后的ST段上移情况，血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶活力，心肌细胞凋亡指数，凋亡相关基因Fas．Bcl-2及Bax的蛋白表达情况比较。 结果：大鼠60只均进入结果分析。①结扎后1，5，10min白藜芦醇中、高剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组（P〈0．05），结扎后15，30min白藜芦醇各剂量组ST段抬高幅度明显低于模型组（P〈0．05），且该种作用呈剂量依赖性。②白藜芦醇各剂量组犬鼠心肌梗死面积明显小于模型组（P〈0．05），且该种作用呈剂量依耥性。③白藜芦醇组血清肌酸激酶和乳酸脱氧酶水平明显低于模型组（P〈0．05）．且该种作用呈剂量依赖性。④模型组心肌细胞凋亡指数明显高于白藜芦醇各剂量组（P〈0．05），模型组Bax和Fas蛋白阳性表达指数明姥高于白藜芦醇中、高剂量组（P〈0．05），Bcl-2蛋白阳性表达指数明显低于白藜芦醇中、高剂量组（P〈0．05），且该种作用呈剂量依赖性。 结论：白藜芦醇对结扎大鼠冠状动脉诱发的急性心肌缺血损伤具有保护作用，且该种作用呈剂量依赖性；白藜芦醇发挥心肌缺血保护作用的机制与其调节Fas，Bcl-2及Bax蛋白表达，抑制心肌细胞凋亡有关。     

长期睾酮缺失对雄性大鼠胸主动脉平滑肌细胞电压依从性钾通道的影响

目的:研究去势后长期睾酮缺失对雄性大鼠主动脉平滑肌细胞电压依从性钾通道（Kv）的影响。方法:雄性Wistar大鼠去势后6个月,用张力换能器测量主动脉环等长张力,全细胞膜片钳和Western blotting技术检测电压依从性钾通道的功能和Kv1.5通道蛋白的变化。结果:雄性大鼠去势后6个月,电压依从性钾通道阻断剂（4-氨基吡啶,4-AP）对主动脉环的收缩明显降低。去势组主动脉平滑肌细胞电压依从性钾通道的幅度与对照组相比明显降低,同时Kv1.5通道蛋白表达也相应降低,应用生理剂量睾酮替代治疗后电压依从性钾通道的功能和转录后改变都有所恢复。结论:长期内源性睾酮缺失引起电压依从性钾通道功能衰减,Kv1.5通道蛋白表达可解释该改变,生理剂量的睾酮替代治疗对受损的电压依从性钾通道有修复作用。     

胆碱对急性心肌缺血心律失常的作用

目的 观察胆碱对大鼠急性心肌缺血的作用,并探讨其作用机制.方法 以结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,给予M受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干预.观察大鼠急性心肌缺血模型心律失常发生情况和心肌细胞L型钙通道蛋白mRNA的表达.结果 ①胆碱可降低大鼠急性心肌缺血模型的心律失常发生率(P＜0.05);②胆碱能够使L型钙通道mRNA表达增加;③M3受体阻断剂4DAMP可逆转胆碱的上述作用(P＜0.05).结论 胆碱通过激活M3受体降低了急性心肌缺血大鼠心律失常的发生率.