抗多胺单克隆抗体的制备和临床应用 I.抗精脒单克隆抗体的产生和特性(简报)

多胺(polyamine)的细胞内水平常随细胞的生长早启而显著增加,在快速生长的细胞尤为明显.癌症患者的血尿液多胺水平增加,故体液和组织标本多胺水平测定,有益于癌症的诊断和预测。多胺多克隆抗体的制备已有报道,作者也制备了多克隆抗体,并建立了14_(C-)多胺放射免疫测定方法。 但抗多胺单克隆抗体(McAb)的制备至今未见报道,本文报告抗精脒(Spermidine,简称SPD)McAb的制备及其特性。     

脐带间充质干细胞的分离鉴定及肝病治疗的研究进展

近几年来,脐带组织已经成为科研工作者们的研究热点.由于脐带为出生以后的废弃物,其细胞的收集没有侵袭性和伦理道德问题.人脐带间充质干细胞(UCMSCs)含量丰富、较为原始、分化能力强,可在体外进行分离、培养,扩增迅速且生物性能稳定,多次传代扩增仍能保持旺盛功能,免疫原性低.国内外研究表明MSCs具有直接或间接的抗炎、抗纤维化、抑制肝细胞凋亡、刺激肝细胞再生的作用,因此脐带间充质子细胞可作为肝脏疾病细胞治疗的理想的靶细胞.     

支气管黏液腺瘤一例报告

黏液腺腺瘤是较为罕见的一种良性肿瘤 ,笔者诊断1例支气管黏液腺瘤 ,报告如下。1病例报告患者男 ,31岁。因间断发热、干咳3年、加重10d于2002年4月9日入院。3年前因上呼吸道感染引起发热 ,周身酸痛 ,伴干咳 ,体温38℃左右 ,无胸痛 ,无咳血 ,当地医院就诊拍胸片后诊为左下肺肺炎 ,予抗生素治疗2周症状消失。此后于1999年7月、2001年8月、12月反复出现低热、干咳、无盗汗、乏力、胸闷、气短 ,均按“肺炎”治疗后症状好转。入院前10d再次上呼吸道感染 ,全身酸痛 ,无咽痛、流涕 ,口服抗生素 ,2d后发热 ,体温38℃。分泌物脓性 ,咽拭子 :黄色奈瑟…     

外周血中表面活性蛋白D mRNA的表达与非小细胞肺癌关系的探讨

非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的75％，血行播散是其复发转移的主要方式，不仅严重影响患者预后，而且是选择治疗方案的关键因素。Ⅱ型肺泡上皮细胞被认为是肺癌的祖细胞，能够合成分泌SP-D．正常外周血单核细胞中不表达SP-D mRNA。Christoph Betz等学者首次提出SP-D mRNA可     

血清胸腺素β4动态变化在肝衰竭患者预后判断中的价值

胸腺素β4(thymosin β4,Tβ4)是人体内主要的肌动蛋白调节分子之一[1].在前期研究中,我们发现血清胸腺素β 4可以用于反映肝衰竭患者的预后状况[2].本研究则是在前期研究结果的基础上,通过监测随访期间肝衰竭患者血清胸腺素β 4的含量变化,探讨其动态变化与患者预后及疗效判断的关系.     

自身免疫性肝病患者血清IgG4水平分析

探讨不同自身免疫性肝病患者血清免疫球蛋白G4（immunoglobulin G4,IgG4）水平差异,并分析不同血清IgG4水平的自身免疫性肝病患者临床特点的差异。方法收集自身免疫性肝病患者65例,其中自身免疫性肝炎（AIH）11例、原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis,PBC）47例及AIH与PBC重叠综合征7例。采用免疫散射比浊法检测三组患者血清IgG4水平,并分析三组之间血清IgG4水平的差异。根据血清IgG4水平的不同进行分组,分析不同血清IgG4水平的自身免疫性肝病患者临床特点的差异。对组间正态分布的计量资料的比较应用独立样本t检验,对非正态分布者采用Mann-Whitney U检验。计数资料的比较采用Fisher’s确切概率法。结果 AIH患者血清 IgG4水平为642.2 mg/L （97.7 mg/L~1687.0 mg/L）,高于 PBC 患者[153.9 mg/L（78.9 mg/L~400.3 mg/L）,P=0.076]及重叠综合征患者[229.9 mg/L（154.9 mg/L~417.9 mg/L）,P=0.388],无统计学差异。其中3例AIH患者血清IgG4水平异常升高（≥1350 mg/L）,与血清IgG4水平较低的8例AIH患者比,IgG4水平和IgG4/IgG比值较高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;3例血清IgG4水平≥1350 mg/L的AIH患者均合并2型糖尿病,其中1例合并类风湿性关节炎,而其他8例AIH患者未合并其他自身免疫性或代谢性疾病;血清IgG4水平较高（IgG4水平≥200 mg/L）的14例PBC患者与IgG4水平较低的33例PBC患者比,血清总胆红素水平较高[（45.09±74.85）μmol/L 对（26.38±23.03）μmol/L,P=0.05]。结论与PBC及PBC与AIH 重叠综合征患者比,AIH患者血清IgG4水平较高。血清IgG4水平较高的AIH患者可能较易合并其他自身免疫性或代谢性疾病。     

人胎肝干细胞的体外培养及诱导分化

为体外分离培养和诱导分化人胎肝干细胞 ,从原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外特定细胞因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 ,从人胎肝组织中成功分离表达AFP、Albumin、Cytokeratin等标志物的胎肝干细胞集落 ,在体外特定细胞因子作用下肝干细胞可定向分化为成熟肝脏细胞。因此人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞 ,体外可定向分化为成熟肝细胞。人胎肝干细胞的分离培养对于生物型人工肝的制备及其深入研究奠定了良好的基础     

微囊小肝细胞样前体细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭

目的探索大鼠海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊小肝细胞样前体细胞(SHPC)移植治疗急性肝衰竭(AHF)大鼠模型的可行性和有效性。方法选择体质量150~180 g健康雄性Wistar大鼠10只。采用Retrosine(30 mg/kg)腹腔内注射联合2/3肝切除诱导雄性Wistar大鼠SHPC增殖模型,改进Seglen胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心分离SHPC,倒置显微镜、电子显微镜下观察,并进行免疫组织化学染色;静电液滴法APA微囊包埋。选择体质量180~220 g健康雌性Wistar大鼠20只,随机分为A组(微囊化SHPC腹腔内移植)、B组(空囊对照组);采用D-氨基半乳糖腹腔注射制备大鼠AHF模型;观察模型一般状况及生存时间,术后不同时间点检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)及血氨水平,检测肝脏病理改变。结果Retrosine腹腔内注射联合2/3肝切除成功建立SHPC增殖模型,分离获得细胞符合大鼠SHPC;APA微囊呈光滑规则球形,直径为(300±40)μm,强度、韧性良好,囊内细胞形态完整,存活率为(90.0±1.3)%。微囊SHPC移植后,A组较B组中位生存时间延长(119.00 h vs 70.33 h),差异有统计学意义(P<0.05);随时间延长,A组大鼠血清ALT、AST、TBiL及血氨水平明显下降,均低于移植前水平,各时间点A组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);肝组织病理显示A组肝细胞损伤较B组明显改善;存活48 h大鼠腹腔内微囊保持完整光滑球形,囊内SHPC形态完整,1周微囊有散在破损皱缩,囊内细胞有增多聚集趋势,细胞存活率85%以上。结论APA微囊化大鼠SHPC腹腔内移植能改善大鼠AHF模型生存时间、生物化学指标(ALT、TBiL等)及病理损伤。     

脐带间充质干细胞的分离鉴定及肝病治疗的研究进展

近几年来,脐带组织已经成为科研工作者们的研究热点.由于脐带为出生以后的废弃物,其细胞的收集没有侵袭性和伦理道德问题.人脐带间充质干细胞(UCMSCs)含量丰富、较为原始、分化能力强,可在体外进行分离、培养,扩增迅速且生物性能稳定,多次传代扩增仍能保持旺盛功能,免疫原性低.国内外研究表明MSCs具有直接或间接的抗炎、抗纤维化、抑制肝细胞凋亡、刺激肝细胞再生的作用,因此脐带间充质子细胞可作为肝脏疾病细胞治疗的理想的靶细胞.     

人脐带间充质干细胞体外长期培养及向肝样细胞的分化

目的：观察人脐带间充质干细胞体外长期培养的生物学特性,探讨其向肝样细胞分化的可能性。 方法：脐带来源于天津市第三中心医院住院的健康足月产妇,采用酶消化法分离培养人脐带间充质干细胞,待细胞生长至80%~90%融合时传代。取传至第9代细胞接种于12孔板内,调整细胞浓度为5×1010 L-1,加入含肝细胞生长因子、成纤维生长因子4、抑瘤素的DMEM培养基,诱导28 d。MTT法测定细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学及流式细胞仪鉴定细胞表型;免疫细胞化学染色鉴定诱导后肝细胞特异表面标志物的表达,以及糖原染色结果。 结果：从人脐带中分离得到的间充质干细胞贴壁生长,形态类似于成纤维细胞,80%以上处于G0/G1期,具有良好的生长活性,可在体外稳定传代20次以上;CD29,CD90,CD105,Vimentin呈阳性表达,基本不表达造血细胞标志CD34和内皮细胞标志CD31。随诱导时间的延长,圆形细胞逐渐增多,形态似肝细胞;诱导1周时细胞开始表达肝细胞表面标志物甲胎蛋白、细胞胶蛋白18、细胞胶蛋白19;诱导3周时开始表达成熟肝细胞标志白蛋白;诱导4周时白蛋白表达增强,且诱导细胞糖原染色呈阳性。 结论：从人脐带中可成功分离出间充质干细胞,实现体外长期培养,并可诱导分化为肝样细胞。