微囊小肝细胞样前体细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭

目的探索大鼠海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊小肝细胞样前体细胞(SHPC)移植治疗急性肝衰竭(AHF)大鼠模型的可行性和有效性。方法选择体质量150~180 g健康雄性Wistar大鼠10只。采用Retrosine(30 mg/kg)腹腔内注射联合2/3肝切除诱导雄性Wistar大鼠SHPC增殖模型,改进Seglen胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心分离SHPC,倒置显微镜、电子显微镜下观察,并进行免疫组织化学染色;静电液滴法APA微囊包埋。选择体质量180~220 g健康雌性Wistar大鼠20只,随机分为A组(微囊化SHPC腹腔内移植)、B组(空囊对照组);采用D-氨基半乳糖腹腔注射制备大鼠AHF模型;观察模型一般状况及生存时间,术后不同时间点检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)及血氨水平,检测肝脏病理改变。结果Retrosine腹腔内注射联合2/3肝切除成功建立SHPC增殖模型,分离获得细胞符合大鼠SHPC;APA微囊呈光滑规则球形,直径为(300±40)μm,强度、韧性良好,囊内细胞形态完整,存活率为(90.0±1.3)%。微囊SHPC移植后,A组较B组中位生存时间延长(119.00 h vs 70.33 h),差异有统计学意义(P<0.05);随时间延长,A组大鼠血清ALT、AST、TBiL及血氨水平明显下降,均低于移植前水平,各时间点A组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);肝组织病理显示A组肝细胞损伤较B组明显改善;存活48 h大鼠腹腔内微囊保持完整光滑球形,囊内SHPC形态完整,1周微囊有散在破损皱缩,囊内细胞有增多聚集趋势,细胞存活率85%以上。结论APA微囊化大鼠SHPC腹腔内移植能改善大鼠AHF模型生存时间、生物化学指标(ALT、TBiL等)及病理损伤。     

肝炎肝硬化病人脾切除术后门静脉血栓形成的相关因素分析

目的 分析肝炎肝硬化门静脉高压症病人脾切除术后门静脉系统血栓形成的相关因素.方法 我院2000年8月至2007年6月共为226例肝炎肝硬化门静脉高压症病人施行了脾切除或脾切除加断流术.本文对其中154例进行回顾性分析.根据是否形成血栓将病例分为门静脉系统血栓形成和无血栓形成两组.用Logistic回归分析术前术后门静脉压力下降水平、术前凝血酶原比值(PTR)、术前纤维蛋白原水平(FIB)、术前及术后1、7、14 d血小板水平、术前门静脉直径、术前胆红素水平、术中出血量各指标与门静脉系统血栓形成的关系.结果 在154例病人中,门静脉系统血栓形成31例,123例无血栓形成.Logistic单因素分析和多因素回归分析均显示门静脉系统血栓形成与门静脉压力下降水平有关;术前凝血酶原比值(PTR)、术前纤维蛋白原水平(FIB)、术前及术后1、7、14 d血小板水平、术前门静脉直径、术前胆红素、术中出血量水平与门静脉血栓形成无关.结论 术前、术后门静脉压力下降水平可能是影响门脉高压脾切除术后门脉系统血栓形成的重要因素,术后门静脉压力下降越多,门静脉系统血栓形成几率越高.     

门脉高压脾切除或加断流术后门脉血栓形成与门脉压力的关系

门静脉系统血栓形成是肝硬化门静脉高压症脾切除术后的常见并发症,严重时可致命.笔者分析了我院1998年2月-2007年6月收治的肝炎肝硬化门静脉高压症行脾切除或脾切除加断流术的患者226例,并探讨门静脉系统血栓形成与术前及术后门静脉压力下降水平的关系.     

肝切除患者血清对体外培养肝细胞增殖能力的影响

摘要： 目的 通过体外细胞实验观察肝切除患者术前及术后不同时间血清对肝细胞增殖的影响。方法 根据所采用的血清不同, 将培养的 HL-7702 细胞分为胎牛血清 （FBS） 组、 术前血清组、 术后 0.5 h、 3 h、 24 h 和 72 h 血清组, 各组细胞在 Cell-IQ 无标记活细胞影像分析系统中维持培养 72 h, 通过该系统对细胞进行连续计数, 绘制出各组细胞扩增曲线, 比较各组细胞 72 h 内细胞扩增倍数, 对各组培养 72 h 后的细胞进行 BrdU 免疫荧光染色, 比较各组 BrdU 阳性率。结果 细胞扩增曲线显示各组细胞均有增殖, 除术后 72 h 血清组外, 其余人血清组培养的 HL-7702 细胞增殖速度均高于 FBS 组, 术后 0.5 h 和术后 3 h 血清组更明显。除术后 72 h 血清组外, 各组人血清组 HL-7702 细胞扩增倍数均高于 FBS 组, 术后 0.5 h 和术后 3 h 血清组扩增倍数高于术前血清组 （均 P＜0.05）。人血清组 HL- 7702 细胞 BrdU 阳性率均高于 FBS 组, 术后 0.5 h 和术后 3 h 血清组细胞 BrdU 阳性率高于术前血清组 （均 P＜ 0.05）。结论 肝切除术后外周血清较 FBS 具有更强的促进肝细胞增殖的能力, 肝切除术后早期血清促进肝细胞增殖作用更明显。