紫外线照射消除PCR技术外源性DNA污染

聚合酶链反应（PCR）最大优点是高度灵敏性，但也极易网微量污染而产生假阳性，因此，避免和消除污染已引起人们的重视(1)。我们采用紫外线照射法与传统的消毒方法进行比较，证实紫外线照射法可有效避免外源性DNA污染引起的假阳性，并指出传统的消毒方法，不能有效避免污染的发生。1材料和方法1.1污染标本的制作模板DNA阳性对照及1：32滴度HBSAg阳性血清进行不同浓度的稀释，取3PI加入PCR测定管，自然晾干。1．2仪器和试剂480型DNA扩增仪（由美国PE公司生产），乙肝病毒PCR试剂盒（由西安拜奥医用生物工程公司提供），“84”消毒…     

阴道分泌物支原体固体和液体培养基培养结果差异及原因分析

目的分析阴道分泌物支原体固体培养基和液体培养基培养结果差异及其原因,为临床医生科学解读阴道分泌物支原体通过不同方法培养后的结果提供试验依据。方法收集该院妇产科送检的354份阴道分泌物标本,同时做固体培养基和液体培养基培养,比较两种培养方法的阳性率,并将液体培养基培养阳性但固体培养基培养阴性的标本进一步做细菌和真菌鉴定,支原体液体培养基培养阴性但固体培养基培养阳性标本再进行液体培养。结果354份阴道分泌物标本中固体培养基培养阳性[解脲脲原体(Uu)或人型支原体(Mh)阳性]标本为112份,阳性率为31.64%。112份阳性标本中,单纯Uu阳性86份,阳性率为24.29%;单纯Mh阳性9份,阳性率为2.54%;Uu合并Mh阳性17份,阳性率为4.80%。液体培养基培养阳性率(40.96%)明显高于固体培养基培养阳性率(31.64%),差异有统计学意义(χ2=6.65,P<0.001)。结论支原体固体培养基培养阳性率明显低于液体培养基培养,通过观察固体培养基的菌落形态,可准确诊断Uu和Mh感染;分解尿素和精氨酸的细菌或真菌感染是造成支原体液体培养基假阳性的主要原因。     

流式微球技术及量子点在实验室诊断中的应用进展

实验室诊断是医学诊断的重要内容。随着生物化学、分子生物学、基因组学及蛋白组学的飞速发展,大量未知生物大分子不断被发现,实验室诊断面临着巨大的挑战。近年来,随着高分子微球技术和纳米量子点技术逐步用于实验室诊断,极大地提高了诊断的灵敏度,某些极微量生物大分子可以简便快速地被检测出来。现将流式微球技术及纳米量子点在实验室诊断中的应用进展情况综述如下。     

乙肝病毒DNA定量水平和乙型肝炎病毒标志物定量检测指标相关性研究

目的：探讨乙型肝炎病毒( HBV )标志物定量检测指标与HBV DNA定量水平的相关性。方法从2013年1月-2014年6月检验科采用酶联免疫吸附试验( ELISA)确诊的在感染性疾病科门诊就诊和住院的大三阳368例和小三阳507例中,各随机选取50例作为大三阳组和小三阳组。大三阳组和小三阳组的血标本同时做HBV标志物定量和HBV DNA定量检测。结果大三阳组HBsAg含量和HBV DNA定量检测结果均明显高于小三阳组( P<0．01);大三阳组HBV DNA定量阳性率明显高于小三阳组(P<0．01);HBV DNA阳性的大三阳患者HBV DNA含量与HBsAg、HBeAg含量均具有相关性(P<0．01)。结论 HBV DNA水平与HBV标志物中的HBsAg和HbeAg水平呈明显正相关;定量检测HBV DNA、HBsAg和HbeAg对判断HBV感染者传染性具有重要临床意义。     

重视和加强医院检验科医学实验室属性探讨

检验科起源于化学实验室的简称“化验室”。检验科是医学实验室,是以患者各种标本作为工作对象的实验场所。中国医院“检验”概念应解释为“实验室”,检验医学应为实验室医学,包括医学实验室技术学和医学实验室诊断学。重视医院检验科医学实验室属性对提升国内检验医学学科地位和与国际实验室医学学科接轨,具有重要意义。     

浅-中-浅低温高钾氧合血对心肌保护的临床分析

目的通过临床随机对照试验，比较浅-中-浅低温高钾氧合血与高钾氧合冷血对心肌保护的作用。方法将20例心脏瓣膜病患者，随机分成两组：采用自配含5％KCI的停跳液与氧合血按1：50左右比例配成浅-中-浅低温高钾氧合血经冠状动脉顺行灌注（实验组），氧合血与St Thomas停搏液按4：1混合成高钾氧合冷血经冠状动脉顺行灌注（对照组）。观察体外循环时间，升主动脉阻闭时间，自动复跳率、强心药使用时间、机械通气时问、ICU停留时间。结果两组在观察体外循环时间，升主动脉阻闭时间无差别（P〉O．05），自动复跳率实验组明显高于对照组（P〈O．05）。强心药使用时间、机械通气时间、ICU停留时间方面，实验组明显低于对照组（P〈0．05）。结论在心肌保护方面浅-中-浅低温高钾氧合血优于高钾氧合冷血。     

组织细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活力测定方法

目的 介绍一种组织细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶（TPK）活力测定方法。方法 密度梯度离心分离小鼠肝和骨骼肌细胞膜成分，不进行膜胰岛素受体纯化，用单位膜蛋白胰岛素刺激前后的膜TPK活力改变值，作为评估组织细胞膜胰岛素受体TPK活力的定量指标，并与传统方法的单位膜蛋白麦胚凝集素（WGA）亲和层析纯化后的胰岛索受体胰岛紊刺激前后的TPK活力改变值进行比较。结果 每mg膜蛋白基础（无胰岛索刺激）TPK活力明显高于每mg膜蛋白纯化后的胰岛素受体TPK活力（P〈0．01）；每mg膜蛋白经胰岛素刺激的TPK活力改变值与每mg膜蛋白纯化后的胰岛素受体TPK活力改变值无显著差别（P〉0．05）。结论 组织细胞膜上存在TPK，用胰岛素刺激的组织细胞膜TPK活力改变值，可作为组织细胞膜胰岛素受体特异TPK活力。本方法不需要纯化组织细胞膜胰岛素受体，可作为评价组织细胞膜胰岛紊受体功能的实用科研技术。     

胰岛素葡萄糖钾盐与胰岛素体外抗炎效果比较研究

目的: 观察葡萄糖钾盐是否具有协同增强胰岛素对外周血单个核细胞群(PBMCs)分泌促炎细胞因子和抗炎细胞因子的作用. 方法: 用Ficoll-Hypaque液分离10例健康人PBMC,随机分为胰岛素葡萄糖钾盐(GIK)组、胰岛素(INS)组、葡萄糖钾盐(GK)组和基础对照(C)组. 四组PBMC培养24 h后,加脂多糖继续培养48 h后,离心收集培养上清液.用ELISA法检测TNF-α,IL-6和IL-4,IL-10含量. 结果: GIK组和INS组TNF-α,IL-6含量均明显低于C组(P<0.01),IL-4和IL-10含量却均明显高于C组(P<0.01);GIK组IL-4和IL-10含量明显高于INS组(P<0.01),但GIK组TNF-α和IL-6含量降低,与INS组比较无统计学意义(P>0.05). 结论: 胰岛素葡萄糖钾盐和胰岛素均能直接抑制内毒素刺激的PBMCs分泌促炎细胞因子,同时提高内毒素刺激的PBMC分泌抗炎细胞因子水平.葡萄糖钾盐对胰岛素促进PBMCs分泌抗炎细胞因子有协同增强作用.     

胰岛素抵抗对2型糖尿病患者血管内皮舒张功能的影响

目的 评价2型糖尿病患者的血管内皮舒张功能,探讨胰岛素抵抗(IR)对血管内皮功能的影响.方法 2型糖尿病患者分为IR组(24例)和非IR组(21例),另设正常对照组(30例).采用高分辨率超声检测肱动脉内皮依赖性和非依赖性舒张反应(EDD,EID).测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及一氧化氮(NO),并采用稳态模式法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 IR组和非IR组糖尿病患者的EDD、EID、NO均明显低于对照组(P＜0.01),IR组的EDD、EID、NO明显低于非IR组(P＜0.01).结论 2型糖尿病患者的内皮依赖性和非依赖性舒张功能均有受损,胰岛素抵抗是导致损害加重的高度危险因素.