表皮生长因子受体在小鼠睾丸内的定位

本研究采用生物素—抗生物素蛋白DCS体系(biotin-avidin DCS system)间接免疫荧光新技术检测表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)受体的定位,以确定EGF的靶细胞.EGF可与睾丸酮协同调节精母细胞减数分裂及精子变态过程,在雄性生殖功能调节中起一定作用.     

人早幼粒白血病细胞的细胞化学分析

我们近年来在进行肿瘤细胞恶性表型逆转的研究中,引进和建立了一套体内、外生长的人白血病细胞的实验模型系统(即HL-60细胞,HGPRT缺失的突变株HL-60-AR细胞,在裸鼠体内传代生长的实体瘤HL-60-AR/Nu细胞,药物诱导分化的HL-60-AR细胞以及HL-60-AR细胞与小鼠网织红细胞融合而成的胞质杂交HL-R细胞)。本文对上述前四种细胞分别进行了七种物质的细胞化学染色反应,并用MPV     

NIH 3T3细胞转化前后细胞骨架及细胞表面纤维粘连蛋白的免疫荧光观察

本实验用抗纤维粘连蛋白(FN)亲和层析纯抗体和抗管蛋白抗体及鬼笔环肽,以免疫荧光组织化学方法,对NIH3T3细胞转染人肺腺癌细胞系AGZY基因组DNA前后细胞表面FN及细胞内骨架系统进行染色观察。结果表明,细胞在发生转化后,微丝及微管均表现出明显受损,细胞骨架结构不清,呈现为弥散样荧光;细胞表面FN大量减少,仅及正常NIH3T3细胞的1/9,其分布也由细丝形成的网状,变成斑点或斑块状。这一结果进一步证实,细胞恶变是涉及到细胞骨架系统及膜表面糖蛋白变化的复杂过程,并预示这些变化可能就是导致细胞形态发生变化、细胞失去正常生长调控的原因之一。     

Wg3h细胞系转染PSV_2-neo质粒前后生长特性及表面超微结构改变的研究

本文对转染PSV_2-neo质粒后的Wg3h细胞系(Wg3h-neo)在长期传代中的生长特性和表面超微结构与母系Wg3h细胞进行了比较研究。结果发现:转染后Wg3h细胞的DNA合成及生长速度明显高于母系Wg3h细胞,生长饱和密度增大。在软琼脂培养中不形成集落,接种在裸鼠不长肿瘤。在扫描电镜下,细胞表面的微绒毛较母系Wg3h细胞丰富。Southern印迹杂交实验证明PSV_2-neo质粒已整合到宿主细胞的基因组中。转染后Wg3h细胞的生长特性和表面超微结构均发生了某些转化特征。     

红细胞分化调节因子对体外培养的L929和KB细胞的生长抑制作用

从兔网织红细胞提纯的红细胞分化调节因子(erythroid differentiation factor,EDF),能对体外培养的自发转化成纤维细胞系L929及人鼻咽癌细胞系KB产生作用。当EDF剂量为0.10μg/ml时,可引起L929细胞形态发生改变,并有细胞核固缩现象。第2d的细胞生长抑制率为64.86％,软琼脂集落形成率为0;第5d时细胞增殖为负值。~3H-TdR掺入率明显降低。EDF剂量为0.15μg/ml时,对KB细胞生长已有抑制作用。EDF剂量达0.30μg/ml时,生长抑制明显。以上结果证明了EDF对恶性细胞具有增殖抑制作用。这种作用对不同种类细胞敏感性不同,并且与剂量呈正相关。     

亚全能干细胞群生物学特性及移植应用研究

近年来 ,人体干细胞因为其广阔的应用前景而备受重视。我们从胎儿、儿童和成人组织中分离出较多多能干细胞具有更广泛分化潜能的干细胞称之为“亚全能干细胞群”。为干细胞的临床移植实现组织再生修复提供理论基础。1分离与培养多种组织亚全能干细胞群及其生物学特性研究 :①心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉、真皮等组织来源干细胞具干细胞形态学特征 ;②超过80 %的细胞都处于G0/G1期 ;③原始干细胞亚群细胞表型具CD34,HLA -DR为阴性 ,CD44、CD29、CD13为阳性等特点 ;④从胎儿多种组织中培养出原始干细胞亚群并可诱导分化为成骨、软骨、…     

胞质因子对肿瘤细胞恶性的调控研究——小鼠骨髓瘤细胞与网织红细胞胞质体的胞质杂交实验

本研究选用无细胞核而富含珠蛋白mRNA的正常小鼠网织红细胞与骨髓瘤细胞系中的BW—胸腺淋巴肉瘤细胞系,NS—1浆细胞瘤细胞系和P388淋巴瘤细胞等分别进行胞质杂交的实验,以研究胞质因子调控肿瘤细胞恶性的可能性。实验结果表明三种淋巴瘤细胞在并入网织红细胞胞质体后所形成的杂交细胞呈现下列去恶性化的特征:1.杂交细胞出现组织化学反应及超微结构的形态改变;2.细胞分裂指数及生长速度明显下降;3.作异种移植至裸鼠后丧失发生肿瘤的能力;4.染色体数量明显减少,畸变率下降;5.出现基因产物血红蛋白的联苯胺阳性反应,并在BW—R杂交细胞传20多代过程中持续出现。对胞质体杂交细胞中基因产物血红蛋白的连续表现,染色体的丢失和在异种接种中丧失长瘤能力的可能机理予以讨论。     

动物Na-K-ATP酶活性变化与棉酚相关的研究

本文报道用光镜组织化学、电镜细胞化学定位和生化测定的方法分析棉酚对动物肾小管及腓肠肌Na-K-ATP酶活性的影响。实验结果表明: 1.细胞化学反应显示了Na-K-ATP酶定位于腓肠肌肌膜,肾远曲小管的基底膜和细胞反褶膜以及髓袢升支的细胞膜上。肾集合管与近曲小管的基底膜及细胞反褶膜上亦有轻微的阳性反应。 2.抗生育剂量棉酚(10毫克/公斤,20毫克/公斤,30毫克/公斤)对大鼠和豚鼠的Na-K-ATP酶组化反应未见有明显的影响,雄猴实验亦得到类似结果。但当棉酚剂量加大到60毫克/公斤时,大鼠和豚鼠的肾小管及腓肠肌的Na-K-ATP酶反应均明显减弱。豚鼠肾细胞膜酶活性的生化定量测定结果亦表明棉酚对肾的Na-K-ATP酶活性有明显的抑制作用。这一结果表明棉酚可引起Na-K-ATP酶活性的降减,而且与剂量成正相关,为棉酚引起肾性失钾的可能性提供了实验依据。本文对细胞膜Na-K-ATP酶细胞化学定位、酶活性以及棉酚对该酶抑制作用的可能机理进行了讨论。     

兔网织红细胞胞质因子对小鼠骨髓瘤细胞恶性调控的研究

以无细胞核的兔网织红细胞与小鼠骨髓瘤细胞BW(胸腺淋巴肉瘤)及SP2/0(浆细胞瘤)分别进行异种杂交。实验结果表明杂交后形成的二种胞质杂交细胞(BW-RR及SP 2/0-RR)均呈现下列去恶性分化特征;①细胞分裂指数、~3H-TdR标记指数及生长曲线明显下降。其中SP2/0-RR的核分裂活动受到明显的抑制;②在软琼脂培养中不形成集落;③异种移植至裸鼠不长瘤;④染色体数量减少,众数及畸变率下降;⑤出现正常分化的珠蛋白基因产物血红蛋白和HGPRT基因的酶产物,珠蛋白探针分子杂交实验证明有珠蛋白基因的表达。为不同种属红细胞胞质因子调控肿瘤细胞恶性提供了证据。论文对胞质因子调控基因表达、恶性逆转及其在红细胞发生过程中自然去核的物质基础等问题进行了讨论。