棉酚对大鼠睾丸生精上皮抗精子发生作用的细胞学放射自显影及超微结构的观察(摘要)

成年 Wistax 雄性大鼠,分别于连续小剂量(30毫克/公斤体重/日)和1次大剂量(100毫克/公斤体重/鼠)口服棉酚后不同时间,取睾丸和附睾等生殖器官,进行了对药物干扰精子发生的动态过程,同位素放射自显影和电镜超微结构的观察,结果如下:1.大鼠连续口服棉酚(30毫克/公斤体重/日)4～5周后有半数以上动物以及6～7周后全部实验动物均失去生育力。睾丸生精上皮中最先出现形态损伤的是服药2～3周后的精子细胞和粗线期初级精母细胞。服药4周后,7～19期精子细胞和Ⅶ期     

棉酚经加鼠肝S-9组份前、后诱发人体淋巴细胞SCE频率的研究

选择6例健康人(其中3例吸烟、3例无吸烟嗜好)为对象,研究棉酚诱发淋巴细胞SCE频率的影响。实验分为加或不加S-9的0.5,1,3,5,7μg/ml 5个棉酚剂量组,比较吸烟者与不吸烟者的各棉酚剂量组,诱发体外人体外周血淋巴细胞SCE频率的差异。结果表明除例2的1μg/ml,例3的1,7μg/ml等个别棉酚组SCE频率与各自的对照组比较,显示有统计学意义的改变(P<0.05)外,3例大部棉酚组的SCE频率变化,均无统计学意义(P>0.05)。用相同方法,改用二甲基亚砜作溶剂,对上述3例重复实验的结果,亦无显著差异(P>0.05)。有吸烟嗜好的3例正常人中,加S-9的各棉酚组SCE频率,差异非常显著(P<0.001)。不加S-9的各棉酚组,除少数棉酚组SCE频率有明显升高(P<0.001)外,大多数棉酚组SCE频率虽有变化,但无统计学意义的改变(P>0.05)。分析上述结果,棉酚对正常人无诱变作用。吸烟者3例,其SCE频率升高可能与人吸入烟凝结物中的苯并芘等致癌物与S-9相互作用形成环氧化物有关。     

七种癌基因在HL-60-AR细胞中的表达及药物诱导分化后的变化

用Northern杂交和斑点杂交方法分别探测HL-60-AR细胞中七种癌基因的表达及其在诱导分化后的变化。结果表明,在HL-60-AR细胞中c-myc基因高度活跃表达,H-ras基因次之,fos、sis、abl和erb-B基因表达微弱,而K-ras基因表达极微弱或检测不出。当HL-60-AR细胞被药物诱导成熟分化后,c-myc基因表达大为下降,H-ras、fos、sis、abl和erb-B基因表达亦相应降低,而K-ras的表达则无变化。对诱导分化前后c-myc基因拷贝数的比较分析表明,c-myc基因表达下降可能主要发生在基因的转录或/和转录后调节水平。     

兔网织红细胞胞质因子对小鼠骨髓瘤细胞恶性调控的研究

以无细胞核的兔网织红细胞与小鼠骨髓瘤细胞BW(胸腺淋巴肉瘤)及SP2/0(浆细胞瘤)分别进行异种杂交。实验结果表明杂交后形成的二种胞质杂交细胞(BW-RR及SP 2/0-RR)均呈现下列去恶性分化特征;①细胞分裂指数、~3H-TdR标记指数及生长曲线明显下降。其中SP2/0-RR的核分裂活动受到明显的抑制;②在软琼脂培养中不形成集落;③异种移植至裸鼠不长瘤;④染色体数量减少,众数及畸变率下降;⑤出现正常分化的珠蛋白基因产物血红蛋白和HGPRT基因的酶产物,珠蛋白探针分子杂交实验证明有珠蛋白基因的表达。为不同种属红细胞胞质因子调控肿瘤细胞恶性提供了证据。论文对胞质因子调控基因表达、恶性逆转及其在红细胞发生过程中自然去核的物质基础等问题进行了讨论。     

Wg3h细胞系转染PSV_2-neo质粒前后生长特性及表面超微结构改变的研究

本文对转染PSV_2-neo质粒后的Wg3h细胞系(Wg3h-neo)在长期传代中的生长特性和表面超微结构与母系Wg3h细胞进行了比较研究。结果发现:转染后Wg3h细胞的DNA合成及生长速度明显高于母系Wg3h细胞,生长饱和密度增大。在软琼脂培养中不形成集落,接种在裸鼠不长肿瘤。在扫描电镜下,细胞表面的微绒毛较母系Wg3h细胞丰富。Southern印迹杂交实验证明PSV_2-neo质粒已整合到宿主细胞的基因组中。转染后Wg3h细胞的生长特性和表面超微结构均发生了某些转化特征。     

NIH 3T3细胞转化前后细胞骨架及细胞表面纤维粘连蛋白的免疫荧光观察

本实验用抗纤维粘连蛋白(FN)亲和层析纯抗体和抗管蛋白抗体及鬼笔环肽,以免疫荧光组织化学方法,对NIH3T3细胞转染人肺腺癌细胞系AGZY基因组DNA前后细胞表面FN及细胞内骨架系统进行染色观察。结果表明,细胞在发生转化后,微丝及微管均表现出明显受损,细胞骨架结构不清,呈现为弥散样荧光;细胞表面FN大量减少,仅及正常NIH3T3细胞的1/9,其分布也由细丝形成的网状,变成斑点或斑块状。这一结果进一步证实,细胞恶变是涉及到细胞骨架系统及膜表面糖蛋白变化的复杂过程,并预示这些变化可能就是导致细胞形态发生变化、细胞失去正常生长调控的原因之一。     

红细胞分化调节因子对体外培养的L929和KB细胞的生长抑制作用

从兔网织红细胞提纯的红细胞分化调节因子(erythroid differentiation factor,EDF),能对体外培养的自发转化成纤维细胞系L929及人鼻咽癌细胞系KB产生作用。当EDF剂量为0.10μg/ml时,可引起L929细胞形态发生改变,并有细胞核固缩现象。第2d的细胞生长抑制率为64.86％,软琼脂集落形成率为0;第5d时细胞增殖为负值。~3H-TdR掺入率明显降低。EDF剂量为0.15μg/ml时,对KB细胞生长已有抑制作用。EDF剂量达0.30μg/ml时,生长抑制明显。以上结果证明了EDF对恶性细胞具有增殖抑制作用。这种作用对不同种类细胞敏感性不同,并且与剂量呈正相关。     

亚全能干细胞群生物学特性及移植应用研究

近年来 ,人体干细胞因为其广阔的应用前景而备受重视。我们从胎儿、儿童和成人组织中分离出较多多能干细胞具有更广泛分化潜能的干细胞称之为“亚全能干细胞群”。为干细胞的临床移植实现组织再生修复提供理论基础。1分离与培养多种组织亚全能干细胞群及其生物学特性研究 :①心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉、真皮等组织来源干细胞具干细胞形态学特征 ;②超过80 %的细胞都处于G0/G1期 ;③原始干细胞亚群细胞表型具CD34,HLA -DR为阴性 ,CD44、CD29、CD13为阳性等特点 ;④从胎儿多种组织中培养出原始干细胞亚群并可诱导分化为成骨、软骨、…     

胞质因子对肿瘤细胞恶性的调控研究——小鼠骨髓瘤细胞与网织红细胞胞质体的胞质杂交实验

本研究选用无细胞核而富含珠蛋白mRNA的正常小鼠网织红细胞与骨髓瘤细胞系中的BW—胸腺淋巴肉瘤细胞系,NS—1浆细胞瘤细胞系和P388淋巴瘤细胞等分别进行胞质杂交的实验,以研究胞质因子调控肿瘤细胞恶性的可能性。实验结果表明三种淋巴瘤细胞在并入网织红细胞胞质体后所形成的杂交细胞呈现下列去恶性化的特征:1.杂交细胞出现组织化学反应及超微结构的形态改变;2.细胞分裂指数及生长速度明显下降;3.作异种移植至裸鼠后丧失发生肿瘤的能力;4.染色体数量明显减少,畸变率下降;5.出现基因产物血红蛋白的联苯胺阳性反应,并在BW—R杂交细胞传20多代过程中持续出现。对胞质体杂交细胞中基因产物血红蛋白的连续表现,染色体的丢失和在异种接种中丧失长瘤能力的可能机理予以讨论。