山东半岛东部地区精神分裂症13号染色体的基因扫描研究

目的通过微卫星遗传标记对精神分裂症患者及对照者的13号染色体进行扫描,查找精神分裂症关联区域。方法在13号染色体上间隔约10cM(厘摩)遗传距离选择14个微卫星遗传标记,对119例精神分裂症患者与119例正常对照者组成的DNA混合样本分别进行了基因扫描及分型,经过卡方(χ2)检验统计学分析,比较患者组与对照组每个等位基因峰型比率的差异。结果在D13S265(13q31.3)位点患者组与对照组的等位基因频率差异存在显著性意义(P<0.01)。结论山东半岛东部人群中精神分裂症患者的13号染色体上存在与本病的关联位点。     

检测HSV等5种病原体抗体的微阵列技术

目的 建立抗原微阵列技术检测多种病原体抗体。方法 将病原体的基因工程抗原，以电脑操纵的机械手将其点在赖氨酸修饰的玻片上．制备抗原微阵列，与血清反应后随之与Cy3标记的二抗反应，用激光共聚焦扫描仪扫描玻片，检测血清中相应病原体的IgG，并进行了灵敏度和重复性的检测。结果 5种抗原的最低检测限度为HSV1-gG 1．56μg／ml，HSV2-gG 3．125μg／ml，CMV-p150 1．56μg／ml，RV-E1E2 3．125μg/ml，MT-EAM 31．26μg／ml；抗原微阵列与ELISA检测的结果相比有较高的符合率；检测IgG和IgM的灵敏度分别为50pg、10pg；不同批次2张玻片间总体变异系数为IgG 6．52，IgM 18．89。结论 抗原微阵列可用于平行检测血液中病原体特异性抗体。     

山东省潍坊东部地区精神分裂症1号染色体基因扫描研究

目的对精神分裂症患者及正常对照者的1号染色体进行扫描,查找精神分裂症的关联位点。方法在1号染色体上间隔10cM（厘摩）遗传距离,选择了31个微卫星遗传位点,用DNA混合池的方法对119例精神分裂症患者与119名正常对照者的DNA样本分别混合后进行基因组扫描。经卡方检验分析,对比患者组与对照组的等位基因峰型比率的差异。结果在D1S2878遗传位点患者组与对照组的等位基因频率差异有统计学意义,P〈0.01。结论山东省潍坊东部地区精神分裂症患者群体中存在与1号染色体的关联区域。     

制备蛋白质微阵列的玻璃表面修饰方法比较

目的 探讨用于制备蛋白质微阵列的5种不同修饰方法的玻片对蛋白质的固定能力，通过对荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度的比较确定一种蛋白质固定效果好、信噪比高的玻片。方法 将系列稀释的人IgG分别点在5种不同修饰方法[包括氨基、多聚赖氨酸、3-氨丙基三乙氧基硅烷（APES）、醛基-磷酸盐缓冲液、醛基-H2O]修饰的玻片上制备蛋白质微阵列，比较不同玻片修饰方法荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度。结果 5种玻片中APES修饰的玻片蛋白质固定效果最好，信噪比最高。结论 APES修饰的玻片比较适合制备蛋白质微阵列。     

重组人白细胞介素15工程菌高密度发酵条件探讨

目的研究表达重组人白细胞介素15(rhIL-15)工程菌高密度发酵的条件。方法采用发酵罐发酵,对影响工程菌生长和目的蛋白质表达的因素进行优化。结果以甘油为碳源可明显抑制有害物质乙酸的积累,提高工程菌的表达量和收获率。高密度发酵明显提高了目的蛋白质的表达量和工程菌的产量。结论该发酵工艺大大提高了rhIL-15工程菌的产量和表达水平,为rhIL-15的规模化生产打下了基础。     

三氧化二砷与HMBA对白血病K562细胞增殖抑制作用及其分子机制的研究

目的:探讨诱导分化荆对K562细胞增殖抑制的作用与分子机制.方法:通过MTT试验和细胞形态学观察K562细胞增殖的改变和分化情况.通过流式细胞仪实验检测细胞周期改变,RT-PCR检测EⅥ1、TGF-β1和WT1基因表达的变化.结果:K562细胞经六亚甲基二乙酰胺(HMBA)和(或)三氧化二砷(As2O3)作用后增殖明显受到抑制,并向不同方向分化,细胞被阻滞在G1期.K562细胞的增殖抑制作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调一致.EⅥ1/β-aetin从0.925 3渐降至0.137 9,WT1/β-actin从0.995 3降至0.197 8.TGF-β1/β-actin从0.331 5增至1.245 2.结论:HMBA、As2O3及其联合抑制K562细胞增殖作用与EⅥ1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调有关.     

胰腺癌胰液肽表达谱变化的分析

目的:分析正常胰液与胰腺癌胰液多肽表达谱的差异.方法:用 ZipTip C18提取胰液样品多肤,采用基质辅助激光解析离子化飞行时阃/飞行时间质谱技术(MALDI TOF/TOF MS)对胰液的多肽表迭谱进行肽质量指纹图谱(PMF)分析,对获得的数据进行标准化处理,对高丰度的差异肤段进行TOF/TOF分析,建立胰腺癌胰液的诊断模型.结果:通过质谱分析,得到了反映胰腺癌胰液多肤组成的特征图谱,通过TOF/TOF分析,一个胰腺癌胰液相关的肽段鉴定为fibrinogen α链前体,氨基酸序列为DS-GEGDFLAE GGGVR.结论:ZipTip C18富集胰液样品后直接进行MALDI-TOF/TOF MS分析的技术,可应用于快速扫描与胰腺癌有关的多肽表达谱,建立胰腺癌胰液的多肽诊断模型,具有较好的临床应用价值.     

小剂量As2O3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷（As2O3）诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态，WSTl实验测定细胞增殖变化，测定和分析细胞周期，NBT还原实验测定细胞分化状态，RT-PCR方法检测C／EBPct和C／EBPε的mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用24h后，随着细胞分化的发生，C／EBPε mRNA的表达明显增加，C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As2O3作用24h后，C／EBPα mRNA的表达降低，C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As2O3和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞，C／EBPα mRNA的表达降低，二者差异无显著意义；C／EBPε的表达差异较大（P〈0．05），二者差异有显著意义。小剂量As2O3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

XRCC3基因多态性与汉族人群膀胱癌的相关性

目的探讨DNA修复基因XRCC3多态性与膀胱癌危险性的关系。方法选择中国汉族人群中膀胱癌患者307例为病例组，316例非肿瘤泌尿系疾病患者为对照组，两组年龄性别构成均衡。以PCR RFLP技术，检测病例组和对照组的XRCC3(Thr241Met)基因型，比较不同基因型与膀胱癌危险性以及膀胱癌临床特征的关系。结果XRCC3基因型Thr/Thr、Thr/Met和Met/Met在病例组的分布频率分别为87.3%、12.1%和0.6%，在对照组的分布频率为92.4%、7.3%和0.3%。与携带Thr/Thr的个体相比，携带XRCC3变异基因型（Thr/Met和Met/Met）的个体具有更高的患癌风险（OR, 1.77；95%CI, 1.04～3.02)。XRCC3基因型与吸烟没有交互作用，与膀胱癌的临床类型亦无相关性，但与浅表性膀胱癌的复发关系密切。携带XRCC3变异基因型的浅表性膀胱癌患者具有更高的复发风险（OR，3.08；95%CI，1.13～8.41)。结论XRCC3基因多态性与膀胱癌危险性有关，携带变异基因型的个体易患膀胱癌，而且XRCC3基因有可能成为一个预测膀胱癌复发的指标。     

卵巢癌组织肽基精氨酸脱亚胺酶4表达临床意义的研究

目的:研究肽基精氨酸脱亚胺酸4(PADI4)在不同类型卵巢癌组织中的表达及与临床病理之间的关系.方法:用免疫组织化学法检测和定量分析PADI4在不同类型卵巢癌组织中的表达;用RT-PCR和蛋白质印迹法比较卵巢腺癌(8例)和卵巢囊腺瘤(5例)中的表达水平.结果:PADI4在浆液性囊腺癌 (53例,阳性率100%)、黏液性囊腺癌(19例,100%)、子宫内膜型囊腺癌(23例,100%)、透明细胞癌(6例,100%)、内胚窦癌(6例,100%)、鳞状细胞癌(6例,100%)、转移性腺癌(6例,100%)、印戎细胞癌(6例,100%)、无性细胞癌(6例,100%)、生殖细胞癌(6例,100%)和未成熟畸胎瘤(6例,100%)中高表达,但在恶性颗粒细胞瘤(6例)、恶性卵泡膜细胞瘤(6例)以及正常卵巢组织(10例)无表达.在浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌和子宫内膜性囊腺癌中,PADI4表达水平与年龄和临床分期T显著正相关,P＜0.01;RT-PCR和蛋白质印迹法证实,PADI4在卵巢腺癌的表达量显著高于在卵巢囊腺瘤中的表达,P=0.001.结论:PADI4可能在多种类恶性卵巢瘤病变过程中起着重要作用.