中性粒细胞弹性蛋白酶的过表达促进K562细胞增殖并抑制其凋亡

目的利用Ad Easy系统构建携带人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)基因的重组腺病毒表达质粒,并感染K562细胞,观察其对K562细胞增殖和凋亡的影响。方法以急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60的RNA为模板,经反转录PCR得到NE基因的编码区并克隆入穿梭载体p Ad Track-CMV,得到p Ad-NE,经HindⅢ、EcoRⅤ酶切鉴定和测序正确后,将其转化入p Ad Easy-1-BJ5183进行同源重组,得到重组子Ad-NE,经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞进行包装。14 d之后收获原代病毒,经5轮扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定。感染K562细胞后,荧光显微镜初步观察感染效率,同时用流式细胞术检测感染效率;Western blot法进一步鉴定NE是否表达上调;CCK-8法测定细胞增殖情况;流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期变化。结果酶切鉴定及测序结果表明重组穿梭质粒p Ad-NE构建成功;酶切鉴定显示同源重组成功,得到重组子Ad-NE;荧光显微镜表明病毒包装成功;经过5轮扩增后,病毒滴度达到1.64×1012pfu/m L;感染K562细胞后,荧光显微镜观察感染效率达80%左右;Western blot法检测到NE表达上调;CCK-8实验显示NE表达上调后K562细胞增殖能力增强;流式细胞术显示S期细胞明显增多并且细胞凋亡减少。结论过表达NE可促进K562细胞增殖并抑制其凋亡。     

ATRA诱导SP100蛋白表达及其对白血病NB4细胞增殖的影响

目的探讨SP100蛋白在全反式维甲酸(ATRA)作用NB4细胞过程中的表达及其对NB4细胞增殖和周期的影响。方法实时定量PCR检测SP100 mRNA的表达;Western blot检测SP100蛋白的表达;免疫荧光检测SP100的定位;CCK-8检测NB4细胞的增殖;流式细胞术检测NB4细胞的周期。结果 ATRA能明显促进NB4细胞中SP100mRNA水平和蛋白水平,并将SP100由弥散的小点状转变为较大的斑块状;感染SP100-shRNA的NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和病毒空载组(P0.05),并使G2/M期的细胞增多。结论 ATRA促进NB4细胞中SP100蛋白的表达,SP100蛋白可能参与NB4细胞增殖活力的调节。     

高湿与蛋白尿关系中医证治探讨

蛋白尿是肾脏疾病的重要临床表现之一。我国西南地区年平均湿度可达70%左右,驻守的广大官兵长期在高湿环境进行军事训练及作业,易受到高湿环境影响,蛋白尿的发病率较高,且缠绵难愈,严重影响官兵的身体健康,也给部队造成沉重的经济负担。     

环境高湿与眩晕关系刍议

眩晕是临床上的一种常见病,一旦发作,严重影响官兵的参训及作战能力。西南战区常年高湿,致使眩晕病发病率增高,直接影响部队的战斗力,导致非战斗性减员。笔者就高湿环境下湿邪引发眩晕的病因及中医药辨证施治等进行简单探讨,报告如下。     

非单座机飞行人员高血压病带药飞行的研究

目的探讨军队非单座机飞行人员高血压病带药飞行的效果及对安全的影响。方法对2004年以来收治13例高血压病非单座机飞行人员,药物治疗达标后带药飞行进行观察。结果严密监测下长期服用长效钙拮抗剂可使血压达标,不影响飞行安全。结论我军非单座机飞行人员高血压病患者可带药飞行。     

从湿立论辨治腹泻

腹泻是临床上的常见病症,祖国医学认为腹泻多与湿邪有关,直接影响部队官兵的正常机动训练与军事作业能力.笔者就西南地区高湿环境中湿邪引发的腹泻进行理论探讨和辨证论治,为保证军队官兵的健康、增强部队战斗力提供医疗保障. 1 腹泻的现代医学认识 健康人解便1～2次/d,粪便量约200 g.腹泻是指排便次数增多,＞3次/d,且粪便量增加,粪质稀薄、水分增加或含有未消化的食物、脓血,常伴有排便急迫、肛周不适、大便失禁等症状.     

浅议高湿环境对人体生理心理的影响

疾病的发生与外界环境气象条件的变化密切相关,高湿环境与高寒、高热环境一样,可对人体造成损伤,是导致或诱使疾病发作的重要因素之一。笔者针对高湿环境下湿邪致病特点以及对人体生理、心理产生的影响进行相关的阐述。     

军事训练伤中医药防治策略探讨

为更好地做好军事斗争的准备，近年来部队加强了军事训练，随着训练强度的加大，军事训练伤（military training injuries，MTI）的发生率呈现上升趋势，对官兵的身体健康及部队战斗力造成很大的影响。目前，我军军训伤防范研究已经取得可喜成绩，但与一些发达国家相比，无论在研究的深度和广度以及经费投入、人才培养上都存在不小的差距，因此，根据国家对军队的要求，要加强MTI的防范措施研究。     

苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。