埃索美拉唑肠溶胶囊人体生物等效性试验

目的采用高效液相色谱法测定受试者口服埃索美拉唑肠溶胶囊与埃索美拉唑镁肠溶片后血药浓度,评价埃索美拉唑肠溶胶囊的生物等效性。方法 2009年9月-10月,36例健康男性受试者单次交叉口服埃索美拉唑肠溶胶囊(试验制剂)和埃索美拉唑镁肠溶片(参比制剂),测定给药后不同时间点血浆中埃索美拉唑经时血药浓度,采用DAS 2.0软件进行药物代谢动力学参数计算和生物等效性评价。结果受试者单次口服试验制剂与参比制剂后,达峰时间分别为(2.19±0.96)、(2.43±0.92)h,峰浓度分别为(1 748.86±615.81)、(1 442.92±476.41)μg/L,药时曲线下面积(AUC)0-t分别为(3 927.14±1 839.10)、(3 878.79±1 734.84)μg/L.h,AUC0-∞分别为(3 998.36±1 866.22)、(3 918.31±1 773.44)μg/L.h。试验制剂与参比制剂的生物等效性为94.0%,其90%CI为(82.3%,107.2%)。结论埃索美拉唑肠溶胶囊与埃索美拉唑镁肠溶片生物等效。     

LC-MS/MS法测定人血浆中阿奇霉素的含量

[目的]建立一种简便、快速的液相-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中的阿奇霉素浓度。[方法]采用API3000型LC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(100×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70︰30︰0.001,用氨水调pH=3.5),流速0.4ml·min-1。样品在碱性条件下用二氯甲烷提取浓集后进样,MRM模式检测(离子对794.5/591.4),莫沙比利(422.1/198.0)为内标,按内标法定量。[结果]阿奇霉素和内标的保留时间分别为2.8、3.6min,标准曲线在1～1024ng·ml-1范围内线性良好,最低定量限1ng·ml-1,日内、日间RSD分别小于6.6%和9.1%,方法回收率96.4%～108.9%,预处理回收率66.3～78.2%。[结论]本法具有快速简便、灵敏准确等特点,与已有文献报道相比有更好的灵敏度和特异性,适用于血浆中阿奇霉素含量测定及药代动力学、生物利用度研究用。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中华法林对映异构体的浓度。方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral? MS-OD(50×2.1 mm, 3 μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min。采用负离子模式,电喷雾离子源（ESI）,以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为（m/z）307.2→160.9和（m/z）228.9→185.1。结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2%~5.8%,批间RSD为2.5%~5.1%;方法回收率(96.1±5.6)%~(105.4±4.7)%,提取回收率80.7%~84.4%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%;S-华法林批内精密度RSD为3.7%~5.2%,批间RSD为3.2%~4.8%;方法回收率(98.3±5.1)%~(103.7±3.8)%,提取回收率81.3%~84.6%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%。最低定量限均为0.1 μg/mL。结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定。     

吴茱萸碱固体脂质纳米粒的制备和抗肿瘤活性

目的制备吴茱萸碱固体脂质纳米粒,并评价其抗肿瘤活性。方法吴茱萸碱溶于混合溶剂(丙酮-无水乙醇)中,加入Precirol ATO 5并水浴加热,作为有机相,将其缓慢倒入泊洛沙姆188溶液(水相)中,冷冻干燥后制得纳米粒。分子模拟考察其处方组成。以Precirol ATO 5用量、药脂比、泊洛沙姆188用量为影响因素,在单因素试验基础上通过Box-Behnken设计优化制备工艺,再进行表征与体外抗肿瘤(人宫颈癌He La细胞)活性实验。结果最佳条件为30 mg Precirol ATO 5,药脂比1∶3,93 mg泊洛沙姆188,所得纳米粒圆整,分布均匀,平均粒径268.9 nm,平均载药量1.65%,对He La细胞有较好的抑制作用,并呈剂量依赖关系。结论固体脂质纳米粒可有效改善吴茱萸碱的分散性与透膜吸收。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆和尿液中二甲啡烷的浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法 (HPLC-MS/MS) 测定人血浆及尿液中二甲啡烷的浓度。 方法 以重蒸乙醚为萃取剂,采用Ultimate C₁₈ (50 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸=75∶25∶0.05,流速为0.2 mL/min。采用正离子模式,ESI 离子源,MRM 模式检测,以利多卡因为内标定量,二甲啡烷和内标的检测离子对质荷比分别为 (m/z) 256.4→155.3和 (m/z) 235.4→86.1。 结果 二甲啡烷血药浓度在0.025~5.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.995 7),最低定量限为0.025 ng/mL;尿药浓度在0.1~20.0 ng/mL范围内线性关系良好（ r=0.998 3）,最低定量限为0.1 ng/mL。血浆方法回收率为103.38%～106.88%;尿液方法回收率为90.05%～101.40%。血药浓度日内、日间精密度相对标准偏差 (RSD)分别小于5.92%及5.70%,尿药浓度日内、日间精密度RSD分别小于10.35%及8.80%。 结论 本研究建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于二甲啡烷的血药浓度和尿药浓度的测定及其药代动力学研究。     

RP-HPLC法同时测定Beagle犬血浆中曲马多、文拉法辛和罗通定浓度

目的:建立同时测定 Beagle 犬血浆中曲马多、文拉法辛和罗通定浓度的反相高效液相色谱法。方法:Beagle 犬血浆标本以维拉帕米为内标,经碱化和石油醚-乙醚(7:3)提取后,以0.025 mol·L~(-1)磷酸二氢钠-甲醇(70:30)为流动相,流速1min·mL~(-1),经碳十八烷基键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,采用荧光法于λ_(ex)=295 nm,λ_(em)=302 nm 检测。结果:曲马多标准曲线范围3.125～3200μg·L~(-1),Y=0.0051X 0.0473(r=0.9996),最低定量限为3.125μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<10%,日间精密度均<10%,方法回收率79.3%～111.2%;文拉法辛标准曲线范围6.25～1600μg·L~(-1),Y=0.0036X-0.0070(r=0.9998),最低定量限为6.25μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<7%,日间精密度均<6%,方法回收率92.5%～108.8%;罗通定标准曲线范围4.6875～2400μg·L~(-1),Y=0.0064X-0.0004(r=0.9999),最低定量限为4.6875μg·L~(-1),高、中、低3种浓度的日内精密度均<9%,日间精密度均<5%,方法回收率89.3%～112.1%。结论:本法简便、快速、准确,用于 Beagle 犬同时服用曲马多、文拉法辛和罗通定的药动学研究,取得满意结果。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中伏立康唑质量浓度及其生物等效性研究

目的 建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中伏立康唑的方法,并进行伏立康唑片生物等效性研究。方法 采用双周期随机交叉自身对照试验设计,48例健康男性受试者分别单次空腹口服两种伏立康唑片200 mg,采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中伏立康唑质量浓度,以WinNonlin?6.1软件计算主要药动学参数,并评价两种伏立康唑片的生物等效性。结果 伏立康唑标准曲线范围均为1~5 000 ng/mL,日内及日间精密度〔相对标准偏差（RSD）〕均小于11%,准确度在100.00%~109.73%之间,以内标基质效应校准后的伏立康唑基质效应RSD小于15%,萃取回收率大于50%,各项稳定性考察结果合格。伏立康唑峰浓度(Cmax)和药-时曲线下面积(AUC0-t、AUC0-∞)的90%置信区间在80.00%~125.00%等效区间之内,受试制剂与参比制剂间达峰时间(Tmax)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 所建立的HPLC-MS/MS方法可用于人血浆中伏立康唑质量浓度的测定,伏立康唑片受试制剂与参比制剂生物等效。     

中国城市成人社区获得性肺炎665例病原学多中心调查

目的 研究引起社区获得性肺炎（CAP）的病原体分布及患者入选前是否应用抗生素、肺炎患者预后研究组（PORT）分级等的情况，同时检测常见病原菌的耐药性。方法 入选2003年12月至2004年11月中国7个城市12个中心的665例CAP患者并进行病原体检测。病原体确定诊断的阳性判断标准为：（1）合格痰标本培养出1株或多株细菌；（2）血培养检出病原体；（3）间隔2～4周采集的2次标本的血清肺炎支原体、肺炎衣原体或嗜肺军团菌抗体滴度呈现4倍或4倍以上增高或降低。应用琼脂稀释法对常见病原菌进行最低抑菌浓度（MIC）检测。结果 在610例同时进行了细菌培养和血清学检测的患者中，肺炎支原体是最常见的病原体，阳性率为20．7％（126例），其后依次为肺炎链球菌10．3％（63例）、流感嗜血杆菌9．2％（56例）、肺炎衣原体6，6％（40例）、肺炎克雷伯杆菌6.1％（37例）、嗜肺军团菌5.1％（31例）、金黄色葡萄球菌3．8％（23例）、大肠杆菌1．6％（10例）、卡他莫拉菌1.3％（8例）、铜绿假单胞菌1．0％（6例）。在195例细菌培养阳性患者中，共有10．2％（62例）合并非典型病原体感染。69株肺炎链球菌，对青霉素、阿奇霉素和莫西沙星的不敏感率分别为20．3％、75．4％和4．3％。结论 非典型病原体尤其是肺炎支原体感染在CAP中占据重要地位；细菌合并非典型病原体的混合感染占10．2％。肺炎链球菌、流感嗜血杆菌仍为常见的致病细菌，我国致CAP肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药率高达75．0％以上，对青霉素的不敏感率为20，3％．     

HPLC法间接测定人和猪红细胞硫嘌呤甲基转移酶活性及其差异分析

目的建立测定红细胞内6-甲基-巯基嘌呤(6-MMP)浓度的HPLC法,换算出红细胞和肝组织中硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性,探讨猪与人肝脏TPMT酶活性的差异。方法使用岛津2010C系列高效液相色谱仪,SymmetryC18(150mm×3.9mm,5μm)色谱柱。样品用乙酸乙酯萃取后进样,0.1%的乙酸∶甲醇为流动相梯度洗脱,总流速1.0mL/min,280nm波长检测,内标法定量。结果标准曲线在6.25~100nmol/mL范围内有良好线性,方法回收率为98.08%~100.05%,萃取回收率为88.1%~92.4%,批内RSD为1.0%~1.5%,批间RSD为1.0%~4.4%。测定显示人TPMT活性为(17.45±3.62)U,家猪TPMT活性为(7.65±1.35)U,版纳猪TPMT活性为(8.73±1.55)U。结论本方法适用于临床和科研中测定人和猪红细胞和肝组织TPMT活性。实验结果提示猪对嘌呤类药物的代谢能力低于人类。     

普罗布考片单次口服给药的人体药物代谢动力学研究

目的采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)研究普罗布考片的人体药物代谢动力学变化规律。方法 2010年10月-11月,24例健康男性受试者单次口服普罗布考片0.5 g,采用HPLC-MS/MS法测定给药后不同时间点血浆中普罗布考的经时血药浓度,采用DAS 2.0软件进行药动学参数计算。结果受试者单次口服普罗布考片,达峰时间为(11.50±6.66)h,峰浓度为(2 894.72±1 320.53)ng/mL,药-时曲线下面积(AUC)0-t为(238 876.96±131 873.67)ng/mL.h,AUC0-∞为(259 989.08±146 112.88)ng/mL.h,半衰期为(278.52±164.72)h。结论普罗布考片体内过程符合二室模型,单次口服具有较好的安全性。