肝移植术后早期脂肪乳剂支持治疗对移植肝功能影响的临床研究

目的　研究含脂肪乳剂的肠外营养 (TPN)对肝移植受体肝脏功能的影响。方法　选择2 0 0 1年 9月～ 2 0 0 4年 6月期间在我所肝移植中心住院行肝移植手术治疗的患者 ,取符合标准的 30例作为研究对象 ,随机分组 ,进行前瞻性的临床研究。肝移植术后 6h开始给予单糖或脂肪乳剂和单糖联合功能的TPN(分别为Glu对照组和MCT/LCT组 ) ,TPN期为 7d ,期间严格禁食。于TPN后第 1、4、7、10、30、90及 180天收集标本 ,检测血ALT、AST、GGT、TBil及DBil。结果　TPN支持后MCT/LCT和Glu组ALT、AST、GGT、TBil及DBil水平均呈现下降趋势 ,与单糖组相比 ,脂肪乳组降低迅速。结论　含脂肪乳的TPN较单糖TPN更有利于促进移植肝早期功能恢复     

重组复合纤维对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的 :　研究不同剂量水平的重组复合纤维 ( AFC)对高脂血症大鼠脂代谢的影响 ,从分子水平探讨 AFC降脂机制 ,寻找安全剂量。方法 :　断乳 SD大鼠 60只 ,雌雄各半 ,经高脂饲料诱导成高脂血症模型后 ,按体重和血浆总胆固醇均衡的原则分为 5组 ,以高脂饲料和正常饲料为对照组 ,其余三组分别饲以不同水平 ( 5%、1 0 %、2 0 % )的重组复合纤维 ,观察重组复合纤维对大鼠血清、肝脏胆固醇及粪胆汁酸代谢的影响 ,应用半定量逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)观察肝脏Apo- AI基因表达的情况。结果 :　 ( 1 ) 2 0 %的重组复合纤维可显著降低大鼠的体重 ;( 2 )不同剂量水平的重组复合纤维均可显著降低大鼠的血浆总胆固醇 ( TC)和肝脏胆固醇 ( LCH)水平 ,2 0 % AFC的作用最强 ;( 3)大鼠粪胆汁酸的含量与 AFC的剂量水平成反比例 ;( 4 )高剂量水平的重组复合纤维可显著促进肝脏 Apo- AI基因的表达 ,而低剂量水平的重组复合纤维不能刺激其表达。结论 :　各剂量水平的重组复合纤维均具有长期稳定的降脂效果 ,高剂量水平的重组复合纤维降脂作用最强。肝脏载脂蛋白 - AI基因表达增加可能是重组复合纤维降脂机制之一。     

人衰变加速因子在CHO细胞的表达及其衰变加速活性研究

目的获得稳定表达人衰变加速因子(human decay-accelerating activity,hDAF)的中国仓鼠卵巢(Chinese hamsterovary,CHO)细胞系,观察在补体活化情况下,hDAF对异种细胞的保护作用.方法构建真核表达载体DAF-pcDNA3.1,用脂质体转染法将其导人CHO细胞,有限稀释法筛选稳定表达hDAF的单细胞克隆,流式细胞仪检测hDAF的表达,C3沉积实验和51Cr释放法测定其促补体衰变活性.结果成功构建了真核表达载体DAF-pcDNA3.1,并获得了表达hDAF的单细胞克隆,表达hDAF的CHO能减少补体C3的沉积,减弱补体的杀伤作用.结论获得在细胞膜上稳定表达具功能活性的hDAF的CHO克隆,为进一步研究其结构与功能的关系准备了条件.     

肠腔分流条件下巴马小型猪缺血再灌注肝功及病理变化

目的探讨肝缺血再灌注过程中肝功能及病理变化规律。方法将18头正常小型猪随机分为A组(入肝血流阻断90min)、B组(入肝血流阻断100min),对照观察两组动物在缺血前、复流前、复流1h及术后各时相点ALT、AST及肝组织病理的变化情况。结果(1)A组长期存活率为100%,B组长期存活率为44.4%;(2)两组动物于缺血及复流1hALT水平变化较术前无明显变化(P>0.05),至术后2、3d均显著高于术前水平(P<0.05),术后4d与术前无显著差异(P>0.05),术后2、3d时B组水平均显著高于A组(P<0.05);(3)两组动物于复流1h时AST水平达到峰值(P<0.05),此后AST水平逐渐下降,到术后3d与术前无显著性差异(P>0.05),复流1h,术后1、2d时B组水平显著高于A组(P<0.05);(4)两组动物肝组织病变随着缺血时间的延长而更加严重,在复流1h时肝组织损伤最为严重,随后肝组织损伤逐渐减轻,存活动物于术后4d肝组织结构基本恢复正常,死亡动物尸检见肝组织大片溶解坏死;(5)对比ALT、AST与肝组织病理学变化的关系可以看到,在肝IR过程中,ALT水平变化与肝组织变化趋势不一致,而AST水平变化与肝组织病理改变情况基本一致。结论(1)在长时间缺血过程中如发现肝组织出现灶性坏死、细胞广泛气球样变、脂肪变性将提示组织损伤难以恢复,动物难以耐受肝缺血再灌注损伤;(2)在肝脏缺血过程中检测血清ALT、AST并不能用于判断肝缺血再灌注损伤的预后情况,但再灌注过程中血清AST水平能较好的反映肝组织的受损程度。     

肠三叶因子研究进展

肠三叶因子是有独特结构的三叶肽家族成员之一，与多种肿瘤及肠道损伤有关。本文就其基因结构、组织分布、表达调控、信号及病理生理作用作一简要综述。     

日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型的建立

目的建立日本大耳兔胆道缺血再灌注损伤模型,用于肝移植术后胆道并发症及胆道损伤等研究。方法采用无损伤动脉夹联合胆总管及肝总动脉阻断制作胆道缺血模型,以假手术组(SO)及单纯肝动脉阻断组(HAO)作为对照,阻断时间分为2h和3h,各组分别于复流前、复流12h、1、2、3、7d取血测AST、ALT、TBA水平;取胆汁行胆汁TBIL、TBA、GGT测定。术后一周观察动物死亡情况;动物处死后取肝胆组织行石蜡切片HE染色光镜下观察。以单纯肝总动脉阻断组做对照。结果血清、胆汁指标和动物术后7d存活率联合阻断组与单纯肝总动脉阻断组相比差异显著,前者差于后者。随着缺血时间的延长,胆道损伤逐渐加重,病理改变由可逆性损伤转化为不可逆性损伤。结论联合胆总管及肝总动脉阻断胆道缺血再灌注模型胆道缺血完全,重复性好,复制简单,是较好的胆道缺血再灌注损伤模型。     

含不同脂肪乳剂的肠外营养对肝移植大鼠肝脏功能的影响

目的　研究含不同脂肪乳剂的肠外营养 (TPN)对肝移植大鼠肝脏功能的影响。方法　建立肝移植大鼠模型 ,按照提供的能源不同分为单糖 (GLU )、脂肪乳剂MCT/LCT、LCT、STG 4个组 ,实验期为 7d ,记录实验期内动物死亡情况 ,于TPN后第 1、4、7d收集标本 ,检测AKBR(动脉血酮体比值 )、血ALT、AST、血TBIL。以正常和肝移植大鼠作为对照。结果　单糖组 7d动物死亡率显著高于脂肪乳剂组 (5 0 %vs0 % )。与脂肪乳组相比 ,单糖组动物 7d内血清ALT和AST水平降低缓慢、TBIL水平持续显著升高 ,AKBR水平在TPN后 1d恢复并稳定于较高水平 ,但于 7d时显著降低。在 1、4d时STG组动物血清ALT降低较MCT/LCTTPN组及LCTTPN组更为显著 ,MCT/LCTTPN组血清ALT水平低于LCTTPN组。结论　单糖TPN加重移植肝脏功能损害 ,动物死亡率增高 ,含脂肪乳的TPN能促进移植肝功能恢复。在减轻移植肝功能损害方面的优越性 ,依次为STG、MCT/LCT和LCT。     

不同氧浓度下大鼠肝细胞有氧代谢酶CCO、PDH、KGDH活性的实验研究

目的：观察缺氧对肝脏实质细胞糖有氧氧化的影响。方法：利用体外培养的肝细胞缺氧模型，模拟创伤后的缺血，缺氧状态，以正常培养的大量肝细胞为对照，采用生物化学的方法。分析不同氧浓度及氧缺时间下肝细胞氧氧化关键酶活性的变化，并测定了细胞内ATP含量的变化。结果：与正常对照组相比，缺氧肝细胞内丙酮酸脱氢酶（PDH）、α－酮戊二酮脱氢酶（KGDH）、细胞色素C氧化酶（CCO）活性在缺氧培养1h即显著降低，并持续到16h，缺氧时肝细胞ATP含量随时间延长而下降，4h达到最低。结论：缺氧后肝细胞有氧氧化及细胞内ATP的产生严重受抑。     

不同缺氧条件下大鼠肝细胞能量代谢变化

目的 观察缺氧对大鼠肝细胞能量代谢的影响。方法 利用体外培养的肝细胞缺氧模型,模拟创伤后的缺血、缺氧环境,以正常生长的大鼠肝细胞为对照,采用生物化学的方法,分析氧的个同浓度及缺氧时间下肝细胞内ATP、ADP、AMP以及能荷的变化。结果 与正常对照组相比,缺氧肝细胞内ATP含量下降,4h达到最低水平,以后逐渐回升,其中O2浓度为15％组16h与正常对照无显著性差异。ADP和AMP的变化与ATP相反,与正常对照相比,缺氧后水平增高,4h达到高峰,以后逐渐下降,16h仍未能完全恢复正常水平。能荷及ATP/ADP比值的变化与AMP相似。结论 缺氧后肝细胞能量代谢明显受到影响,呈现出双相变化的赳势,ATP和能荷水平先降低,后增高。