不同用途的心室肌细胞的分离

目的 :建立适合于不同用途的心室肌细胞的酶解分离方法。方法 :恒流 Langendorff灌流 ,I型胶原酶酶解分离 ,应用膜片箝技术记录离子电流、双波长显微荧光光度术检测细胞内游离钙离子浓度及视频跟踪系统测定心肌单细胞收缩。结果 :采用不同分离技术参数获得的心肌细胞能满足上述三种实验条件下的要求。酶解分离的单个心室肌细胞静息电位为 (- 74 .0 6± 4 .5 4 ) m V,记录到心室肌细胞典型的钾、钠、钙离子电流和稳定的心室肌细胞内游离钙比值 ,心室肌单细胞收缩特性稳定。结论 :通过调整分离技术参数获得的心室肌细胞性能稳定 ,具有正常的电 -机械生理特性和耐钙性。     

香菇多糖预处理对急性弓形虫感染小鼠中枢神经系统损伤的保护性作用研究北大核心CSCD

目的探究香菇多糖预处理对急性弓形虫感染小鼠脑中枢神经系统的保护性作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组(NC)、模型组(TDI)和香菇多糖预处理组(pre-10dLNT TDI)。弓形虫感染前10d,pre-10dLNT组小鼠连续10d腹腔注射LNT(1mg/kg体重,1次/d),弓形虫感染后无任何处理;TDI组小鼠腹腔注射弓形虫悬液0.5 mL/只鼠;NC组小鼠感染前10d开始腹腔注射同等体积的生理盐水(1次/d)。通过观察小鼠的死亡时间及数量计算各组小鼠的存活率,使用流式细胞仪检测感染后第8d小鼠脑组织中CD8+IFN-γ+T细胞百分比,ELISA法检测感染后第4d和第8d小鼠外周血中IFN-γ、GABA和DA水平,应用SoftMax Pro 4.3.1LS软件绘制标准曲线计算各项指标的含量(pg/ml)。采用Grapad 8.0软件进行处理和分析。结果TDI组小鼠第8d存活率为0%,pre-10dLNT TDI组小鼠第8d存活率为60%;与NC组相比,TDI组和pre-10dLNT TDI组CD8+IFN-γ+T细胞亚群水平均明显增高;与TDI组小鼠相比,pre-10dLNT预处理明显降低了弓形虫感染的C57BL/6J小鼠脑组织中CD8+IFN-γ+细胞数量(P<0.01)、明显降低了小鼠第4d和8d的外周血中IFN-γ产生水平(P<0.05;P<0.01)、第8d小鼠外周血中DA和GABA的产生水平显著增加(P<0.01)。结论LNT预处理可以显著提高急性弓形虫感染小鼠的存活率,通过减少CD8+T细胞通过血脑屏障进入CNS,降低神经系统的广泛炎症反应,通过降低脑组织中CD8+IFN-γ+T细胞数量,调节神经递质的分泌水平,从而改善小鼠脑部的炎症反应,对急性弓形虫小鼠中枢神经系统的损伤具有明显的保护作用。     

反向点杂交法测定浙江省4620例男性HPV感染者的流行病学特征

目的调查浙江省男性人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染的亚型分布及流行病学特点，为男性HPV感染早期筛查、预防、诊断提供依据。 方法回顾性汇总分析2014年1月至2016年12月期间，浙江省17~74岁的4620名男性尖锐湿疣皮损拭子或组织标本；4620例样本中，其中120份因细胞量不足判定采样失败，剩余4500例样本按不同年龄分为6组(17~20岁组268名、21~30岁组1958名、31~40岁组1156名、41~50岁组667名、51~60岁组355名、>60岁组96名)。用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)和反向点杂交法测定23种HPV基因型，并分析其HPV阳性率分布、HPV阳性率差异和高低危型HPV感染特征。 结果4500例样本中有2799例HPV阳性，总阳性率为62.2%，其中：以6型和11型阳性率最高，分别为15.58%(436/2799例)和10.00%(280/2799例)。高危型阳性率最高的为52型，占4.72% (132/2799例)。在2799例HPV DNA阳性者中，有1266例为单一感染；混合感染1533例，占44.26%，单纯低危型最高为三重感染，单纯高危型最高为四重感染，而高低危混合感染达七重，其中七重感染占2.25%(63/2799例)。高低危混合感染数高于单纯高危型和单纯低危型，两者比较有统计学差异(χ²分别为28.1、82.8，P均<0.05)。HPV阳性结果以21~40岁青壮年为主，占总人数的69.2% (3114/4500)。而HPV阳性率以17~20岁组(75.0%)和51~60岁组(79.7%)最高，与其他年龄段[21~30岁(60.7%)、31~40岁(59.1%)、41~50岁(59.6%)和>60岁(46.4%)组]相比χ²分别为20.48、22.51、18.86、26.02和46.03、48.89、40.99、41.84，P均<0.05。 结论浙江地区男性HPV感染者主要以6、11型为主，高发于青壮年，HPV混合感染比例较高，高低危混合感染较常见。     

PICC维护网络的现状与研究进展

本文从国内外PICC的维护现状及PICC维护网络的建立、管理等方面进行综述,旨在为今后各地PICC维护网的建立和完善提供借鉴和参考。     

鼻胃管留置对心脏大血管手术患者术后肺部并发症及预后的影响

目的 探讨鼻胃管留置对心脏大血管手术患者术后肺部并发症及预后的影响,旨在降低术后肺部并发症的发生率,改善患者预后结局。方法 回顾性收集2018年7月—2019年11月武汉市某三级甲等医院行心脏大血管手术患者的一般信息和临床资料,根据是否留置鼻胃管分为留置鼻胃管组和未留置鼻胃管组,进行倾向性评分匹配后对两组术后肺部并发症的发生情况及预后等进行比较。 结果 经过倾向性评分匹配,留置鼻胃管组和未留置鼻胃管组各纳入158例。与未留置鼻胃管组相比,留置鼻胃管组肺部感染、肺不张、气胸、呼吸衰竭的发生率均较高,总住院时长和ICU住院时长较长,转归较差,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 鼻胃管留置会增加心脏大血管手术患者术后肺部并发症的发生,且会延长患者住院时间,影响患者预后结局。     

伊马替尼耐药或不耐受的 CML 患者更换二代 TKI治疗的疗效观察及相关因素分析

目的：观察伊马替尼耐药或不耐受的慢性髓性白血病(CML)患者更换二代酪氨酸激酶抑制剂(TKI)后的疗效,分析相关因素对疗效的影响。方法随机选取伊马替尼耐药或不耐受而转用二代 TKI(达沙替尼和尼洛替尼)的患者各25例,监测患者3个月或6个月时 BCR/ ABL 融合基因定量结果,分析患者在6个月达到 BCR/ ABL≤10%这一“最佳”疗效与换药原因、换药时分期、换药时血液学缓解状态、换药后依从性之间的关系。结果因耐药或不耐受而换用二代 TKI 的患者6个月达到 BCR/ ABL≤10%分别有16例(41．0%)和9例(81．8%);转用二代 TKI 时处于慢性期和进展期的患者6个月达到 BCR/ ABL≤10%分别有23例(76．7%)和2例(10．0%);转用二代 TKI 时未丧失完全血液学缓解(CHR)和丧失 CHR 的患者6个月达到 BCR/ ABL≤10%分别有16例(72．7%)和9例(32．1%);转用二代TKI 后依从性好和依从性差的患者6个月达到 BCR/ ABL≤10%分别有23例(74．2%)和2例10．5%)。结论伊马替尼耐药或不耐受的 CML 患者改用二代 TKI 药物可取得一定的疗效,且两种二代 TKI 药物(达沙替尼、尼洛替尼)疗效差异无统计学意义。因不耐受而换药的患者的疗效要优于因耐药而换药的患者;换药时处于慢性期的患者的疗效要优于换药时处于进展期的患者;换药时未丧失 CHR 的患者的疗效要优于丧失 CHR 的患者;服用二代 TKI 药物依从性好的患者的疗效要优于依从性差的患者。     

阿托伐他汀在C57BL/6小鼠肺纤维化ROCKⅡ信号通路中的作用

目的:探讨阿托伐他汀对小鼠肺纤维化模型的治疗作用及ROCKII信号转导通路在肺间质纤维化发病中的机制。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组,肺纤维化模型组(M),阿托伐他汀(5、10、20、40mg)干预组(B+A5、B+A10、B+A20、B+A40)。应用HE染色、免疫组化、Western-Blot方法,检测ROCKII的表达。结果:经阿托伐他汀干预后,形态学:B+A组纤维化较M组减轻(P<0.01)。免疫组化:B+A组的ROCKⅡ蛋白表达较M组减少(P<0.01);Western-Blot:B+A组ROCKⅡ蛋白表达量减少(P<0.01)。结论:阿托伐他汀可减轻小鼠肺纤维化ROCKII信号通路的通路表达。     

固醇调节元件结合蛋白1c对骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达调控的影响

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1（IRS-1）表达调控的影响.方法 采用酶联合消化法取2～3 d SPF级雄性SD大鼠原代骨骼肌细胞,将原代细胞分为对照组（C）、对照＋胰岛素组（C＋I）、高脂组（PA）及高脂＋胰岛素组（PA＋I）.将表达SREBP-1c腺病毒转染L6细胞,根据感染复数（MOI）分为含绿色荧光蛋白阴性载体（GFP）组、MOI值为5、50、100、200组.将靶基因为SREBP-1c的干扰RNA （siRNA）转染L6细胞,并分为空白对照组、阴性siRNA组及SREBP-1c siRNA组.Western blotting和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白表达,油红O染色法检测细胞内脂质沉积情况.多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法.结果 与C组相比,PA组SREBP-1c基因和蛋白水平升高（分别为2.72±0.08比1.00±0.18,3.02 ±0.19比1.00±0.05,t=15.240、18.289,均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白水平降低（分别为0.71 ±0.04比1.00 ±0.05,0.82 ±0.04比1.00±0.04,t=-7.960、-6.052,均P＜0.05）,丝氨酸磷酸化IRS-1蛋白表达升高,丝氨酸磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达下降（t=20.987、-5.869,均P＜0.05）.与GFP组相比,MOI值为50、100和200组的SREBP-1c基因和蛋白表达呈剂量依赖性上升（均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降（均P＜0.05）.与空白对照组和阴性siRNA组相比,SREBP-1c siRNA组SREBP-1c基因和蛋白水平降低,IRS-1蛋白表达升高（均P＜0.05）.结论 SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰岛素信号通路,参与肌细胞胰岛素抵抗的发生.     

NF-κB信号通路在急性弓形虫感染小鼠神经系统功能异常中的调控作用北大核心CSCD

目的探究NF-κB信号通路的活化对弓形虫感染过程中神经系统功能异常的调控作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为感染组(TDI)和对照组(NC),使用浓度为2×104个/ml的RH株弓形虫速殖子腹腔感染TDI组小鼠,NC组注射等量生理盐水。通过水迷宫实验(包含定航实验和空间探索实验,使用SuperMaze水迷宫图像记录系统进行监测、分析)、细胞因子检测(ELISA法,应用SoftMax Pro 4.3.1LS软件计算细胞因子含量)、Western blot(使用BCA法进行定量)分别检测TDI组和NC组小鼠学习记忆及认知能力、血清中IL-6和TNF-α产生水平、脑组织中NF-κB和caspase3蛋白水平,采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。结果与NC组相比,感染第3、4、5 d TDI组小鼠逃避潜伏期延长、目标象限花费时间明显减少、新物体认知能力显著降低(均P<0.01);TDI组小鼠脑组织中NF-κB蛋白为(1.10±0.01)pg/ml,是NC组(0.51±0.01)pg/ml的2.16倍(P<0.01);TDI组小鼠外周血中TNF-α、IL-6的水平显著升高,分别是NC组的10倍、15倍(均P<0.01);TDI组小鼠脑组织中caspase3蛋白显著升高,为(0.44±0.05)pg/ml,是NC组(0.31±0.02)pg/ml的1.42倍(P<0.01)。结论急性弓形虫感染过程中,小鼠的学习记忆和认知能力受到影响,可能与NF-κB信号通路的活化密切相关。其作用的潜在机制可能是NF-κB活化后诱导TNF-α及IL-6炎性细胞因子分泌增加和/或诱导caspase 3凋亡蛋白的表达从而引起脑神经胶质细胞凋亡而发挥作用。     

新型环保无醛固定液的动物实验研究CSCD

组织固定是病理技术工作中的重要环节,其效果直接影响到后续常规制片质量及免疫组化等相关分子病理检测结果。长期以来．4％中性甲醛是病理科常规组织固定试剂,其对病理标本的固定及常规HE染色和分子生物学检测效果得到病理专家们的肯定。但甲醛存在一定毒副作用,对环境及人体健康均有不良的影响．寻找一种有相同效果且无毒无害的环保固定液一直足病理工作者的期盼。