二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心Smac/DIABLO蛋白表达的抑制作用

目的： 探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道（mitoKATP）开放剂二氮嗪（DE）对离体大鼠供心不同时程冷保存时促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达的影响及机制。方法：SD大鼠随机分为3组,包括空白对照组、单纯冷保存组、DE组（Celsior保存液中含30μmol/L DE）,后2组又按冷保存时程不同,分别分为3、6、9、12 h组。实验结束后采用原位末端标记染色法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡,采用Western blotting法检测心肌组织中caspase-3蛋白及胞浆Smac/DIABLO蛋白表达。结果：（1）在Celsior保存液中加入DE后,心肌细胞凋亡指数及caspase-3蛋白表达显著低于相应单纯冷保存组。（2）DE可使Smac/DIABLO蛋白表达高峰由冷保存6 h延迟至9 h。（3）DE的上述作用可被mitoKATP通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐（5-HD）所取消。结论：DE具有对抗冷保存诱导心肌细胞凋亡的作用,这种保护作用可能与其激活mitoKATP 通道和减少促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达有关。     

高糖通过环加氧酶2依赖性途径诱导GRP78表达改变

目的： 观察高糖慢性处理对血管内皮细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达的影响及其作用机制。方法：培养的HUVECs细胞用含正常糖（5.5 mmol/L）或高糖（30 mmol/L）的培养基处理不同时间后,用MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡,Western blotting法测定蛋白表达情况。结果：与相应对照组相比,HUVECs细胞经高糖孵育24-48 h 后,GRP78蛋白表达量先增加后减少;而环加氧酶-2（COX-2）蛋白表达量逐渐增加。COX-2选择性抑制剂尼美舒利与高糖共孵育后,可明显抑制高糖引起的GRP78蛋白表达改变;同时尼美舒利可抑制高糖孵育48 h 后诱导的细胞凋亡。结论：高糖慢性处理可诱导HUVECs细胞GRP78表达先增加后减少,此过程依赖于COX-2蛋白的上调。     

铁负荷对离体大鼠心脏和分离心室肌细胞的作用

目的：研究水溶性Fe³⁺和透膜的脂溶性Fe³⁺复合物对心肌功能和心肌脂质过氧化水平的影响。方法：采用离体灌流心脏和酶解分离心室肌细胞模型，检测心肌力学指标、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）及冠脉流量等指标。结果：FeCl₃缩短舒张期心室肌细胞长度，5、15 μmol/L FeCl₃增加细胞收缩幅度和速度；FeCl₃使灌流心脏LVDP、±dp/dt_max、心率、冠脉流量增大，对心肌LDH、CK释放量和MDA无明显影响。Fe-HQ使心室肌细胞舒张期长度、收缩幅度和±dL/dt_max减小，引起灌流心脏LVDP、±dp/dt_max、心率、冠脉流量先增加后降低的双相变化，高浓度时可使冠脉流出液LDH和CPK量明显增高，心肌MDA增高，心律失常加重。结论：心肌细胞内铁增加可引起心功能受损和脂质过氧化程度增高，水溶性Fe³⁺对心肌细胞功能的影响较脂溶性Fe³⁺小。     

葡萄糖浓度降低对幼龄鼠及成年鼠海马长时程增强的影响

目的:观察葡萄糖浓度降低对幼龄鼠15-16日龄及成年鼠56-63日龄海马CA1区长时程增强(LTP)诱发的影响。方法:采用脑片灌流及电生理学技术,以场兴奋性突触后电位的初始斜率(S-EPSP)为观测指标。结果:当将灌流液中葡萄糖浓度降为3或1.5mmol/L时,S-EPSP显著减小。在葡萄糖浓度为3或1.5mmol/L的介质中,以高频刺激(HFS)作用于成年鼠脑片仅出现短时程增强反应;但在葡萄糖浓度为3mmol/L的介质中,HFS仍可在幼龄鼠脑片上诱导出LTP。结论:低糖可使突触的传递活动减弱;在突触可塑性方面,幼龄鼠对低糖的耐受性要强于成年鼠。     

HSP90依赖的Akt线粒体转位参与IGF-1对低温保存心脏的保护作用

目的: 观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)是否可对抗低温保存诱导的心肌损伤,并探讨其可能的机制。方法: 观察SD大鼠心脏低温保存9 h后,再灌注期左心室发展压(LVDP)和细胞凋亡指数的变化。Western blotting法检测蛋白激酶B(Akt)蛋白表达。结果: (1)Celsior保存液中加入10 nmol/L IGF-1可促进低温保存9 h后心脏收缩功能的恢复、减少心肌细胞凋亡的发生、抑制线粒体渗透性转换孔开放。(2)IGF-1可上调心脏Akt蛋白磷酸化水平。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002不仅可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化水平,且可逆转IGF-1促进低温保存心脏心功能的恢复和抗凋亡作用。(3)抑制热休克蛋白90(HSP90)可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化和线粒体转位,阻断IGF-1的心肌保护作用。结论: IGF-1可明显减少低温保存心脏心肌细胞凋亡的发生,促进再灌注期心功能的恢复,其机制可能与HSP90依赖性Akt的激活和线粒体转位有关。     

四氢生物喋呤改善大鼠心脏冷保存12小时的效果

四氢生物喋呤(BH4)是一氧化氮合酶(NOS)的重要辅助因子[1],细胞内BH4的水平与一氧化氮(NO)的合成密切相关,而NO参与机体多种生理功能的调节,内源性NO可减轻心脏缺血再灌注损伤.     

葛根素对铝致痴呆模型小鼠学习记忆

目的 探讨葛根素(Pur)对铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力的影响及机制.方法 给小鼠连续注射AlCl3建立AD模型,用Morris水迷宫法测试小鼠的空间记忆能力,用黄嘌呤氧化酶法测定海马SOD活力,以硫代巴比妥酸法测定海马MDA含量.结果 与正常对照组相比,模型组海马SOD活力[(32.11±18.53)U/mag prot]下降(P<0.01)、blDA含量[(3.94±0.61)nmol/mg prot]上升(P<0.01),同时伴有水迷宫成绩的损害.与模型组比较,Pur中、高剂量组海马SOD活力[(58.63±17.92)U/mg prot,(61.29±19.47)U/mg prot]上升(P<0.01)、MDA含量[(2.93±0.31)nmol/mg prot,(2.89±0.45)nmol/mg prot]下降(P<0.01),Pur低剂量组海马SOD活力[(49.74±16.37)U/mg prot]上升(P<0.05),Pur中、高剂量组对水迷宫成绩的改善作用优于低剂量组.结论 Pur能改善铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力,其作用机制可能与其抗氧化作用有关.     

葛根素对铝致痴呆模型小鼠学习记忆及海马SOD、MDA水平的影响

目的探讨葛根素（Pur）对铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力的影响及机制。方法给小鼠连续注射AlCl3建立AD模型,用Morris水迷宫法测试小鼠的空间记忆能力,用黄嘌呤氧化酶法测定海马SOD活力,以硫代巴比妥酸法测定海马MDA含量。结果与正常对照组相比,模型组海马SOD活力[（32．11±18．53）U／mg prot]下降（P〈0．01）、MDA含量[（3．94±0．61）nmol／mg prot]上升（P〈0．01）,同时伴有水迷宫成绩的损害。与模型组比较,Pur中、高剂量组海马SOD活力[（58．63±17．92）U／mg prot,（61．29±19．47）U／mg prot]上升（P〈0．01）、MDA含量[（2．93±0．31）nmol／mg prot,（2．89±0．45）nmol／mg prot]下降（P〈0．01）,Pur低剂量组海马SOD活力[（49．74±16．37）U／mg prot]上升（P〈0．05）,Pur中、高剂量组对水迷宫成绩的改善作用优于低剂量组。结论Pur能改善铝中毒所致的痴呆模型小鼠记忆能力,其作用机制可能与其抗氧化作用有关。     

线粒体ATP敏感性钾通道开放剂改善大鼠心脏冷保存

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪 (DE)对离体大鼠心脏冷保存效果的影响及作用机制.方法:SD大鼠随机分成对照组、DE组、DE 5-HD组.利用Langendorff离体鼠心灌注法,各组心脏在4℃条件下分别保存3 h和8 h后,复灌60 min,观察各组大鼠血流动力学的恢复情况、冠脉流出液中心肌酶漏出量、心肌水含量的变化及心肌超微结构改变.结果:在Celsior心麻痹液中添加30 μmol/L的DE后,能明显改善冷保存3 h心脏的左心室发展压力的恢复,降低心肌酶(LDH、CK)在某些复灌时间点上的漏出,但对保存后左心室舒张末期压力的抬高和冠脉流量的恢复及心肌水肿程度无明显作用;而相同浓度的DE添加到Celsior心麻痹液中,可明显降低冷保存8 h心脏左心室舒张末期压力的抬高,改善左心室发展压力和冠脉流量的恢复,降低心肌酶(LDH、CK、GOT)的漏出,缓解心肌水肿,对心肌的超微结构也有较好的保护作用,其中30和45 μmol/L DE组对冷保存8 h心脏的保护作用优于15 μmol/L DE组,而3 0及45 μmol/L DE组之间并无显著性差异.DE的上述作用可被线粒体ATP敏感性钾通道的特异性阻断剂5-HD所取消.结论:DE可通过激活线粒体ATP敏感性钾通道显著改善离体大鼠心脏冷保存效果.     

κ阿片激动剂的致心律失常作用涉及百日咳毒素敏感的G蛋白机制

目的：探讨百日咳毒素（ＰＴＸ）敏感的Ｇ蛋白是否介导κ阿片激动剂的心脏效应。方法：应用离体大鼠心脏Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌流模型观察κ阿片激动剂Ｕ５０４８８Ｈ的心脏作用并探讨其可能机制。结果：研究结果表明，Ｕ５０４８８Ｈ可导致心律失常、降低心率、心肌收缩力量和冠脉流量；ＭＲ２２６６和百日咳毒素（ＰＴＸ）预处理后，可取消Ｕ５０４８８Ｈ的致心律失常作用，但不能取消其降低心肌收缩力量和冠脉流量的作用。结论：结果提示κ阿片激动剂的致心律失常作用涉及ＰＴＸ敏感的Ｇ蛋白机制。