自噬在类风湿关节炎中的作用及中药干预研究进展

类风湿关节炎(RA)目前临床上多使用糖皮质激素或免疫抑制剂进行治疗,但长期使用具有明显的毒副作用,且免疫抑制剂价格昂贵,一定程度限制其广泛的应用。中药治疗RA历史悠久,且毒副作用小,但其具体作用机制不甚明确。自噬的过程是细胞自身在受到外界的刺激,通过细胞内信号转导,触发的一系列细胞维持内环境稳定的一种主动的生物学过程,其异常参与多种疾病的发生。目前研究表明自噬异常与RA的发生发展过程关系密切,可以干预RA血管翳生成、滑膜炎症和骨破坏等关键病理环节,从而影响RA的进展和预后。近年来很多研究发现中药复方及其活性成分可以通过调节自噬过程,发挥治疗RA的作用。本文对中药调控自噬进而干预RA的相关文献进行调研,以期为中药治疗RA重要作用机制、新药开发及临床治疗提供新思路。     

基于血管平滑肌自噬探讨瓜蒌-薤白对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的:探究瓜蒌-薤白药对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)主动脉斑块血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及自噬水平的影响。方法:高脂饲料饲养ApoE^-/-小鼠40只复制AS动物模型,随机分为模型组、瓜蒌-薤白组、雷帕霉素组、阿伐托他汀组,以普通饮食C57BL/6J小鼠10只为正常组。正常组及模型组给予生理盐水灌胃,瓜蒌-薤白组、雷帕霉素组及阿伐托他汀组每日给予相应药物灌胃,共8周。实验结束后处死小鼠,酶标仪检测小鼠血清,总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平;主动脉油红O染色观察并测量主动脉斑块面积占总面积之比。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉中膜VSMCs增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平。透射电镜观察VSMCs自噬小体并检测VSMCs自噬相关蛋白酵母ATG6同源物(Beclin-1),酶联相关轻链蛋白Ⅱ(LC3Ⅱ),p62蛋白表达。结果:与模型组比较,瓜蒌-薤白组可显著减少AS小鼠主动脉脂质积累及斑块面积,降低TC,TG,LDL-C水平(P<0.01),升高HDL-C(P<0.05)。瓜蒌-薤白显著降低主动脉VSMCs内增殖相关抗原PCNA及α-SMA水平(P<0.01),抑制VSMCs过度增殖;瓜蒌-薤白显著上调主动脉VSMCs内Beclin-1及LC3Ⅱ蛋白表达,降低p62积累(P<0.01),增加VSMCs自噬小体的表达,上调VSMCs自噬水平。结论:瓜蒌-薤白调节AS小鼠体内血脂水平,抑制主动脉VSMCs过度增殖抑制AS小鼠主动脉的斑块形成,其机制可能与其上调VSMCs自噬活性有关。     

人参-三七-川芎提取物延缓过氧化氢诱导的内皮细胞衰老中线粒体氧化应激的作用

目的 通过观察人参-三七-川芎提取物（GNC）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）衰老中线粒体氧化应激的影响,探讨GNC对衰老HUVECs的治疗机制。方法 本研究以HUVECs作为研究对象,H₂O₂诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白组,H₂O₂组,H₂O₂+DMSO组（DMSO）,白藜芦醇组（Resv）及GNC提取物低（GNC-L）,中（GNC-M）,高（GNC-H）质量浓度组,除空白组,H₂O₂组外,其余各组分别给予DMSO 1 mL·L^-1,Resv 8 μmol·L^-1,GNC 400,300,200 mg·L^-1药物干预,24 h后除空白组外给予300 μmol·L^-1 H₂O₂诱导HUVECs衰老,再给予正常培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色法鉴定细胞衰老程度,流式细胞仪分析细胞周期,采用Mito SOX RED荧光染色法测定细胞内线粒体活性氧（mtROS）水平,以JC-10为荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测含锰超氧化物歧化酶（MnSOD）与磷酸化（p-）p66的蛋白表达。结果 SA-β-gal染色结果显示,与空白组比较,H₂O₂组SA-β-gal染色蓝染细胞显著增多（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各浓度组SA-β-gal染色蓝染细胞显著减少（P<0.01）;细胞周期结果显示,与空白组比较,H₂O₂组G₀/G₁期细胞数量比例明显增多（P<0.05）,G₂/M期细胞比例明显减少（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC各组及Resv组G₀/G₁期细胞数量比例明显减少（P<0.05）,GNC-H组,Resv组在G₂/M期细胞比例明显增加（P<0.05）。线粒体ROS荧光结果显示,与空白组比较,H₂O₂组强度明显减弱（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M组强度明显增高（P<0.05）;线粒体膜电位结果显示,与空白组比较,H₂O₂组荧光强度显著下降（P<0.01）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M,GNC-L组线粒体膜电位荧光强度显著增高（P<0.01）,Resv组明显增高（P<0.05）;Western blot结果显示,与空白组比较,H₂O₂组MnSOD含量明显降低（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H与GNC-M组表达明显增多（P<0.05）;与空白组比较,H₂O₂组p-p66含量显著增高（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各用药组表达显著降低（P<0.01）,表明用药后可减轻细胞内线粒体氧化应激反应。结论 中药人参-三七-川芎提取物可以延缓H₂O₂诱导的血管内皮细胞的衰老,药物干预后,细胞线粒体活性氧、线粒体膜电位及相关蛋白MnSOD,p-p66蛋白发生明显改善,氧化应激反应减轻,其机制可能是中药通过抑制线粒体氧化应激反应延缓血管内皮细胞衰老的进程。     

基于VEGF通路探讨断藤益母汤抑制胶原诱导型关节炎小鼠血管翳形成的作用

目的 探讨断藤益母汤抑制胶原诱导型关节炎（CIA）小鼠血管翳形成的机制。方法 SPF级DBA/1雄性小鼠24只,随机分为4组,分别是空白组（NC组）,模型组（CIA组）,甲氨蝶呤组（MTX组）,断藤益母汤组（DTYM组）,每组6只。除正常组外,其余组小鼠进行造模。二次免疫起,给予灌胃等体积溶媒,MTX（1 mg·kg^-1）和DTYM（15.4 g·kg^-1）,给药35 d。观察小鼠一般情况、关节炎指数;取材后进行膝、踝关节微型计算机断层摄影（micro CT）扫描,苏木素-伊红（HE）和番红-固绿染色观察病理改变,免疫组化检测血小板-内皮细胞黏附分子-1（CD31）,血管内皮生长因子-α（VEGF-α）,血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）,磷酸化（p）-VEGFR2的表达。结果 与NC组比较,CIA组小鼠踝关节红肿明显,关节炎指数评分显著上升（P<0.05,P<0.01）,膝、踝关节关节面明显破损,软骨厚度降低,膝、踝关节micro CT骨破坏评分明显升高（P<0.01）,滑膜中CD31,VEGF-α,VEGFR2,p-VEGFR2积分吸光度显著升高（P<0.01）;与CIA组比较,DTYM组踝关节红肿程度明显减轻,给药3周后小鼠关节炎指数评分明显下降（P<0.05,P<0.01）,膝、踝关节关节面更完整,软骨厚度增加,膝、踝关节micro CT骨破坏评分均明显降低（P<0.05,P<0.01）,滑膜中CD31,VEGF-α,VEGFR2,p-VEGFR2积分吸光度显著降低（P<0.01）。结论 断藤益母汤可能是通过调控VEGF通路抑制CIA小鼠血管翳的形成。     

下肢动脉硬化闭塞症患者行人造血管旁路移植术的护理

总结51例下肢动脉硬化闭塞症患者行人造血管旁路移植术的护理经验。认为术前加强患肢护理和让患者戒烟，以减少对血管的危害；术后注重病情观察，主要是血压、心率等生命体征的观察、肢端血液循环的观察、抗凝药物不良反应的观察；出院时侧重抗凝药的应用和观察的指导，以提高术后血管的通畅率。本组术后49例顺利康复，2例因重度并发症，抢救无效死亡。     

冠状动脉内支架植入术的护理

植入性血管内金属支架是治疗动脉硬化性血管疾病的又一新的介入性方法，通过对２１例冠心病患者的血管内支架植入，介绍了该项新技术的操作方法、术前准备、术后的护理观察及健康宣教。通过护理，体会到正确使用抗凝药物及预防并发症的发生极为重要     

36例弥散性血管内凝血患者首次凝血检验异常分析

目的 :探讨弥散性血管内凝血 (Disseminatedintravascularcoagulation ,DIC)早期实验室检查特点。方法 :对 36例DIC患者首次凝血检验异常的资料进行回顾性分析。结果 :DIC患者首次凝血异常以外源性凝血指标异常为主 ,与内源性凝血系统异常的发生率比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ;血小板早期就有改变 ,首次降低者 18例 ,动态降低者 6例 ;内、外凝血系统改变 :方向一致 11例 ,方向不一致 2 0例 ;纤维蛋白原升高者 18例。结论 :DIC患者早期凝血改变时内、外凝血系统改变有明显不均一性 ,代偿性改变明显 ,须动态观察。     

腓肠神经营养血管筋膜皮瓣修复下肢远端软组织缺损的应用

小腿胫前、踝关节及足跟部的软组织移动性差，血运欠佳，外伤后易引起软组织缺损，骨骼、肌腱等深部组织外露，是基层医院骨科治疗较为棘手的问题。本院自2002至2005年应用近端或远端为蒂的腓肠神经营养血管筋膜皮瓣修复胫前、踝关节及足跟部皮肤缺损13例，获得较满意的疗效。报道如下。     

上腔静脉综合征介入治疗的护理14例

上腔静脉综合征(superior vena cana syndrome,SVCS)是由于各种原因引起的上腔静脉狭窄或闭塞,致使静脉回流受阻所造成的一系列临床症候群.临床表现为上腔静脉受压症状,如头面、颈部潮红,颜面部和/或上肢轻度肿胀、胸闷、头晕;上肢静脉压力升高,颈静脉怒张,颈胸部浅静脉曲张,严重者出现胸水[1].SVCS治疗较难,内科疗效差,传统外科手术创伤大,并发症多.随着介入放射学的发展,介入治疗为SVCS治疗提供了安全有效的新途径[2].国内护理文献未见报道.我院1996年9月～2003年3月先后收治了14例SVCS,现将护理体会报告如下.     

加味济川煎对老年阳虚慢传输型便秘患者MTL、SP、VIP影响的研究

目的观察加味济川煎对慢传输型便秘(STC)患者MTL、SP、VIP表达影响,探讨加味济川煎治疗STC的机制,为临床提供疗效依据。方法选取2019年1月—2019年7月井冈山大学附属医院肛肠科就诊的STC患者,采用随机数字表法分为2组,治疗组(加味济川煎)30例和对照组(莫沙必利片口服)30例,2组均以1周为1个疗程,共2个疗程,对比2组患者治疗后的临床疗效,首次排便时间,便秘症状评分及粪便性状评分,采用ELISA测定2组患者胃动素(MTL)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)在0、7、14 d后的表达水平,并记录不良反应。结果疗程结束后,治疗组总有效率高于对照组;治疗组首次排便时间明显短于对照组(P<0.05);与治疗前比较,2组患者治疗后CCS评分明显降低(P<0.05),与对照组相比,治疗组粪便性状有明显改善(P<0.05);与对照组同时间点相比,治疗组MTL、SP表达水平升高,VIP降低(P<0.05)。结论加味济川煎能明显改善STC患者症状,其机制可能与调节MTL、SP、VIP的表达水平相关。