帕金森病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义

目的 研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清犬尿氨酸(kynurenine,KYN)、犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)和色氨酸(trptophane,TRP)浓度及代谢改变,探讨其临床意义.方法 采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测16例首发PD患者、36例美多巴(Madopar)治疗PD患者、20例正常对照人群血清KYN、KYNA和TRP的浓度,比较血清KYN、KYNA、TRP以及KYNA/KYN和KYN/TRP比值的差异性.结果 美多巴治疗PD患者血清KYNA水平和KYNA/KYN比值较首发PD患者和正常对照人群显著升高(P<0.01);首发PD患者及美多巴治疗PD患者血清中TRP水平较正常对照人群显著升高(P<0.01).结论 采用HPLC-FLD检测PD患者血清中的KYN、KYNA及TRP的含量,可为帕金森病的临床诊断和药物治疗提供部分实验室依据.     

薄层色谱-自显影技术分离检测石榴皮清除自由基活性成分

目的:采用薄层色谱分离和生物活性检测相结合的薄层色谱-自显影技术,对石榴皮提取物清除自由基活性成分进行研究。方法:以三元溶剂二甲苯∶乙酸乙酯∶乙酸=3∶5.5∶1.5为展开剂对石榴皮提取物进行展开分离,以二苯代苦味肼自由基(DPPH)为显色剂,喷洒于经展开后的TLC进行显色拍照。结果:石榴皮提取物在传统显色剂下分离到6个化合物,利用DPPH自由基显色,表明其中4个化合物具有较强的清除作用,且活性成分主要为鞣质类化合物。结论:薄层色谱-自显影技术是一种快速分离鉴定天然产物中清除自由基活性成分的实验方法。     

酸回流-气相色谱测定粮谷中溴甲烷残留的效果

采用酸回流提取器,建立了粮谷中熏蒸剂-溴甲烷残留量的气相色谱测定方法。本方法解决了低沸点熏蒸剂（溴甲烷）的回收率低这一问题。结果表明溴甲烷进样量在0.04μg/ml～1.0μg/ml范围内具有良好的线性关系,相关系数r=0.9994。其方法检出限为0.02mg/kg。在3个添加水平上进行加标回收试验（n=10）,平均回收率为77.00%～96.68%。精密度（RSD）为6.10%～8.50%。     

液相色谱串联质谱法检测血清载脂蛋白C的酶解效率

目的分析液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测载脂蛋白(apo) C-Ⅰ、C-Ⅱ和C-Ⅲ的酶解效率,为其准确定量检测提供依据。方法对不同apo C含量的混合人血清样品进行变性、还原、烷基化等前处理,经胰蛋白酶酶解,用LC-MS/MS定量检测目标肽段;分析多肽释放图谱和样品间多肽释放的相关性。结果肽段TP(apo C-Ⅰ)、TY(apo C-Ⅱ)和GW(apo C-Ⅲ)的响应值较高。酶解1 h时,肽段ES和DA即达释放峰值; 3 h时,TY释放最充分;而TP、GW和EF的释放速率相对较慢,在8 h达最高值。TP、TY和GW达峰值后,峰面积随酶解时间延长而逐步下降。apo C-Ⅰ释放出的2条肽段EF和TP在5份样品之间一致,相关系数(r)=0.993 9(3 h)和0.992 9(20 h); apo C-Ⅱ(ES和TY肽段)和apo C-Ⅲ(DA和GW肽段)的r值介于0.976 1～0.997 3。结论 apo C-Ⅰ、apo C-Ⅱ和apo C-Ⅲ肽段的酶解效率受肽段自身特性和酶解环境影响,合适地选择代表性肽段和酶解条件将有助于其准确定量检测。     

T－2毒素对ATP的影响及硒的保护作用

报告了高效液相色谱法测定Ｔ－２毒素和Ｔ－２加硒饲料喂养的鸡肝、脑、肾、心等组织ＡＴＰ含量的结果。表明：Ｔ－２毒素可引起肝脏、心脏和脑组织ＡＴＰ含量下降，其中肝组织ＡＴＰ含量下降最为明显；加硒组肝脏ＡＴＰ含量和对照组相似，而心和脑组织ＡＴＰ含量则和Ｔ－２组相同，仍低于对照组。揭示Ｔ－２毒素主要影响肝组织ＡＴＰ的含量；硒对Ｔ－２毒素引起的肝脏ＡＴＰ减少有保护作用。     

应用高效液相色谱检测慢性肾炎肾功能不全患者尿纤维蛋白肽A及其临床意义

应用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）检测４２例正常人，２４例肾功能正常之慢性肾炎，１２例慢性肾炎肾功能不全氮质血症期患者及２１例尿毒症期患者尿ＦＰＡ水平，其均值分别为：２５．４０±１０．３０ｎｇ／ｍｇＣｒ、２６．９９±５．７７ｎｇ／ｍｇＣｒ、３８．８１±６．２８ｎｇ／ｍｇＣｒ、７９．７４±１８．７６ｎｇ／ｍｇＣｒ。结果显示：氮质血症期组尿ＦＰＡ水平明高于正常对照及肾功能正常之慢性肾炎组（Ｐ＜０．０１），尿毒症期组尿ＦＰＡ显著高于氮质血症期组（Ｐ＜０．０１）。监测尿ＦＰＡ水平与血浆肌酐浓度显示二者呈正相关性（ｒ＝０．９１２０，Ｐ＜０．０１）。揭示，慢性肾炎肾功能不全患者循环血液处于异常高凝状态，其严重程度与疾病的发生、发展密切相关，监测其尿ＦＰＡ水平能较敏感地反映肾功能状态。     

帕金森病相关血清蛋白质标志物的筛选及鉴定

 目的：探讨并初步鉴定帕金森病患者血清中相关蛋白质作为特异标志物的可能性。方法：应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)结合纳米磁珠技术检测44例帕金森病和60例健康对照的血清标本,应用生物信息学方法筛选差异蛋白峰,经高效液相色谱（HPLC）分离出差异蛋白,酶解后进行液质联用串联质谱（LC-MS/MS）分析,利用Xcalibur的程序组件BioWorks 3.2完成蛋白质序列数据库鉴定分析。结果：经SELDI-TOF-MS结合纳米磁珠技术筛选出质荷比m/z位于8 937的蛋白质在帕金森病中高表达(帕金森病组表达强度为27.47±16.58,正常组表达强度为5.01±3.47),有显著差异(P<0.01);6 636和8 697的蛋白质在帕金森病中低表达(帕金森病组表达强度为5.43±2.66和20.22±9.57,正常组表达强度为18.85±7.56和51.13±26.22), 有显著差异(P<0.01)。联合上述3种潜在蛋白质标志物,可区分帕金森病组和对照组,其中帕金森病患者检出率为90.0%(27/30),健康者检出率为92.5%（37/40）。对m/z为6 636、8 697和8 937的标志物进行鉴定,结果分别为载脂蛋白C-I、载脂蛋白 C-III 和补体成分3a。结论：鉴定出的载脂蛋白 C-I、载脂蛋白C-III和补体成分3a在帕金森病的诊断中具有一定价值,值得进一步研究和探讨。     

非肥胖糖代谢异常大鼠血清的代谢组学

 目的 探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法 建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测生化指标,对血清进行代谢组学分析。结果 大鼠在高糖高脂饮食饲养16周后,与基础饲料组相比,血糖、胰岛素、低密度脂蛋白及总胆固醇显著升高,高密度脂蛋白显著下降,同时糖酵解产物丙酮酸降低,三羧酸循环的中间代谢物柠檬酸、苹果酸、延胡索酸及琥珀酸减少,尿酸增加,脂肪酸、氨基酸代谢异常。结论 高糖高脂饮食干预后,肥胖抵抗大鼠能量代谢显著变化,对探讨饮食导致的非肥胖型2型糖尿病发病机理的研究有重要意义。     

脊髓性肌萎缩症的基因诊断及其应用研究

目的 对脊髓性肌萎缩症患者及携带者进行基因诊断和产前基因诊断.方法 对26例脊髓性肌萎缩症患者应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restiction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测SMN1基因第7外显子是否缺失;对于患者的父母应用多重PCR结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的方法进行携带者诊断;而既往生产过患儿的孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断.结果 26例脊髓性肌萎缩症患者中查出25例存在SMN1基因第7外显子纯合缺失;患者的父母全部为SMN1基因第7外显子杂合缺失携带者;对20名既往生产过患儿的孕妇进行了产前诊断,8名存在SMN1基因第7外显子纯合缺失.结论 PCR-RFLP、多重PCR结合DHPLC技术可应用于患者及携带者基因诊断;PCR-RFLP可用于脊髓性肌萎缩症的产前基因诊断.