通过沉默P2X4受体减少帕金森病细胞凋亡

【摘要】目的：研究P2X4受体（P2X4R）在帕金森病(PD)细胞模型中的作用。方法：用6-羟基多巴胺（6-OHDA）处理人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）,建立帕金森病细胞模型,检测P2X4R表达。沉默P2X4R,CCK8检测细胞活性,蛋白质免疫印迹法检测凋亡因子和pannexin 1表达。用PCR检测Pannexin 1过表达时TLR-2蛋白表达,检测TLR-2过表达时细胞活性、细胞凋亡和凋亡因子的活性。结果： 6-OHDA处理组P2X4R蛋白和mRNA表达均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。P2X4R沉默后细胞凋亡减少、细胞存活率提高,Caspase 3、Cleaved caspase 3及 Pannexin 1蛋白表达低于PD组,差异有统计学意义（P<0.05）。P2X4R沉默组和受体抑制组TLR2蛋白表达低于PD组,Pannexin 1过表达后TLR2蛋白表达降低（P<0.05）,TLR2过表达时Caspase 3和Cleaved caspase 3蛋白表达降低、细胞活性增高,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：本实验利用帕金森病细胞模型,通过沉默P2X4R改变Pannexin 1和TLR2表达,发现Caspase 3和Cleaved caspase 3蛋白表达降低和细胞活性增高,说明P2X4R很可能通过调控Pannexin 1及TLR2减少细胞凋亡。     

化痰通络方联合醒脑开窍针法治疗脑梗死后遗症患者的效果

目的:观察化痰通络方联合醒脑开窍针法治疗脑梗死后遗症患者的效果。方法:选取100例脑梗死后遗症患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组各50例。两组均予以硫酸氢氯吡格雷、阿司匹林治疗,在此基础上,对照组给予醒脑开窍针法治疗,观察组在对照组基础上联合化痰通络方治疗,比较两组临床疗效、治疗前后中医证候积分、神经功能缺损[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]评分、肢体运动功能[Fugl-Meyer运动功能表(FMA)]评分、颅内动脉平均血流速度(Vm)和不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为96.00%(48/50),高于对照组的80.00%(40/50),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组半身不遂、口舌歪斜、头晕目眩等中医证候积分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组NIHSS评分低于对照组,FMA评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组大脑前、中、后动脉Vm均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗期间未见明显不良反应。结论:化痰通络方联合醒脑开窍针法治疗脑梗死后遗症患者可提高治疗总有效率、FMA评分和Vm,降低中医证候积分和NIHSS评分,效果优于单纯醒脑开窍针法治疗。     

狼疮性肾炎患者外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞的表达及临床意义

目的 探讨狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞检测的临床价值和意义。方法 选取2012年1月至2021年12月于杭州市中医院住院治疗LN患者,检测外周血CD4+、CD8+及CD4+/CD8+,并记录患者的病理分型及狼疮活动度评分（systemic lupuds erythematosus disease activity index, SLEDAI）,分析CD4+、CD8+及CD4+/CD8+与各项临床指标之间的相关性。结果 Ⅴ型LN患者外周血CD4+分别高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅲ+Ⅴ型（P<0.05）。CD4+百分数、计数及CD4+/CD8+与SLEDAI评分呈负相关（P<0.01）,CD8+百分数则与SLEDAI评分呈正相关（P<0.01）。CD4+、CD8+百分数和计数、CD4+/CD8+比值分别与C3（complement 3）、C4（complement 4）、抗ds–DNA（anti–double–stranded,DNA）、（anti–nuclear antibodies,ANA）、（C–reactive protein,CRP）、（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、尿红细胞及血三系水平相关。结论 狼疮性肾炎患者外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞的表达与肾病理分型、疾病活动度及实验室指标之间存在明显相关性,在临床评估病情、指导治疗、改善预后方面具有参考意义。     

急性坏疽性胆囊炎诊治的研究进展

急性坏疽性胆囊炎是临床上常见的急腹症之一,常见于老年人群中,病情进展迅速。如处理不当,易危及患者的生命,因此,应早发现、早诊断及尽早行手术治疗。急性坏疽性胆囊炎患者不仅常合并其他基础疾病,且手术条件极差,胆囊壁水肿、坏疽情况严重;胆囊三角区粘连紧密,界限不清,从而使得解剖关系极其复杂,此时进行胆囊切除术无疑是对手术医师的挑战。而且此病术后并发症较多,所以寻求该病的最佳诊治方法也一直是外科研究的热点。本文将介绍目前国内外一些学者对于急性坏疽性胆囊炎的术前病情判断及治疗方案,以期能够优化治疗,改善预后。     

扁塑藤素对LPS诱导的HUVEC细胞功能损伤和焦亡的作用

目的研究扁塑藤素对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及可能机制。方法 建立LPS诱导HUVEC损伤模型,HUVEC细胞分为对照组、LPS组以及低、中、高剂量扁塑藤素组(0.1、0.2、0.4 μmol/L扁塑藤素)。CCK-8法测定细胞活力;试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18蛋白水平;蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测焦亡相关分子NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白和mRNA表达量。 结果与对照组比较,LPS组细胞活力和SOD含量显著下降(P＜0.05),LDH和MDA含量、NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白和mRNA表达量均显著升高(P＜0.05)。扁塑藤素呈剂量依赖性提高细胞活力和SOD含量,抑制LDH、MDA,降低NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白和mRNA表达水平(P＜0.05)。 结论扁塑藤素呈剂量依赖性抑制细胞焦亡和减轻氧化应激,从而改善LPS诱导的HUVEC功能损伤。     

转移性结直肠癌抗EGFR治疗耐药机制的研究进展

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer, mCRC)的主要治疗靶点之一,然而抗EGFR治疗的耐药一直是亟待解决的临床难题。肿瘤细胞本身EGFR相关信号通路异常激活,基因组不稳定性等遗传学或表观遗传学改变是引发耐药最常见的机制,近期也有研究发现肿瘤微环境中细胞丰度和细胞因子的变化等也是引发抗EGFR治疗耐药的重要机制。我们将从肿瘤细胞和肿瘤微环境两个方面,对mCRC抗EGFR治疗的耐药机制进行综述。     

超声联合Ki67分析Graves病患者131I治疗后甲亢未愈或复发的相关因素

目的 应用超声新技术及Ki67等指标研究与Graves病（GD）患者131I治疗后甲亢未愈或复发的相关因素。方法 研究2020年1月~2021年11月在我院核医学科接受131I治疗的GD患者89例。随访结局分为甲状腺功能亢进（甲亢）未愈或复发、早发甲状腺功能减退（早发甲减）和甲状腺功能正常或失随访。131I治疗后1个月为随访开始,每位患者最长随访时间为1年。治疗前应用三维超声自动测量技术、剪切波弹性成像技术和超声引导下细针穿刺抽吸技术,获取患者甲状腺容积、腺体剪切波弹性值和滤泡上皮细胞Ki67表达情况。并纳入年龄、病程、用药史、131I治疗剂量、TRAb等因素。应用竞争风险模型分析患者发生甲亢未愈或复发的相关因素并计算其调整风险比（HR）和95%置信区间（95% CI）。结果 在89例GD患者中,出现甲亢未愈或复发的患者有27例,早发甲减患者有50例,甲状腺功能恢复正常的患者1例,失随访11例。竞争风险模型分析显示Ki67表达、131I治疗剂量及甲状腺容积与治疗后甲亢未愈或复发存在独立关联,其HR（95% CI）分别为0.36（0.15,0.86）、0.81（0.68,0.96）和1.11（1.07,1.15）。结论 Graves病患者甲状腺滤泡上皮细胞Ki67表达阳性、131I治疗剂量及甲状腺容积与131I治疗后甲亢未愈或复发存在独立关联。超声新技术可以在评估GD患者131I治疗结局中发挥重要作用。     

间歇性禁食对小鼠脑缺血再灌注 TLR4/NF-κB通路的作用

目的 探讨间歇性禁食对小鼠脑缺血再灌注损伤中TLR4/NF-κB通路的作用及对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法 KM小鼠45只平均随机分为假手术组(Sham组)、正常饮食组(CIRI组)和间歇性禁食组(IF组)。IF组造模前连续间歇性禁食14天,除Sham组外,其他各组构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察各组小鼠行为学变化,HE染色观察细胞形态,免疫组化法测定TLR4及NF-κB 阳性细胞的表达情况。结果 IF组神经功能缺损评分较CIRI组明显下降(P＜0.05),IF组TLR4及NF-κB阳性细胞表达较CIRI组明显下降(P＜0.05)。HE染色显示IF组缺血半暗带及海马区神经元细胞深染及皱缩较CIRI组明显减轻,细胞形态明显改善。结论 间歇性禁食对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用可能与减轻炎症,抑制TLR4及NF-κB的表达有关。     

新发VTE患者血栓风险分层下的临床特征分析

目的 分析住院新发静脉血栓栓塞症(venous thromboembolism,VTE)患者不同血栓风险分层下的临床相关特征,为VTE的分级临床流程管理建设和完善提供数据支持。方法 纳入2017年11月~2018年8月住院后新发生的经下肢血管超声诊断的VTE患者,分析不同血栓初始风险评估分组患者的基本住院信息、血栓形成部位、血栓危险因素、临床检查、临床治疗与预防的特征与差异。结果 纳入669例新发VTE患者,661例(98.80%)行血栓初始风险评估。新发VTE患者的初始风险评估分层中,极高危311例(47.05%)、高危284例(42.96%)、中危59例(8.93%)、低危7例(1.06%)。不同风险分组间血栓形成的肢体(Fisher, P=0.35)及解剖部位(χ²=4.28, P=0.90)分布比较,差异均无统计学意义。外科危险分层分布比较,差异有统计学意义(Fisher, P=0.02),其中极高危与高危比较,差异有统计学意义(Fisher,P=0.03)。不同风险分层的VTE患者,在基本住院信息、危险因素、临床检查、预防与治疗管理流程中的多个环节的分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 不同VTE风险分层的新发VTE患者临床特征的差异性,可作为血栓风险分级指导下VTE临床管理流程的建设与完善提供数据支持。     

CENPU在结直肠癌组织中高表达并对患者的远期预后有评估价值

目的 分析着丝粒蛋白U（CENPU）在结直肠癌组织中的表达及对远期预后的评估价值。方法 2005年1月~2011年12月,纳入我院结直肠癌根治术患者102例,免疫组化分析CENPU在结直肠癌组织中的表达水平;以CENPU相对表达量的中位数为界将患者分为CENPU低表达组（n=51）和CENPU高表达组（n=51）,并进一步分析其对术后患者远期预后的评估价值;在体外采用慢病毒转染的方式将结直肠癌细胞株分为正常对照组、CENPU低表达组及CENPU高表达组,并通过CCK-8和Transwell实验分析其对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 结直肠癌组织中CENPU在蛋白水平上较癌旁组织显著高表达（t=30.45,P<0.05）,且CENPU表达量与Ki67（r=0.569,P<0.05）及VEGF-C间均呈显著正相关关系（r=0.629,P<0.05）;结直肠癌组织中CENPU表达水平与患者肿瘤进展及临床病理分期密切相关（P<0.05）;K-M生存分析显示CENPU高表达组患者术后总生存期（Log-rank χ2=11.155,P<0.05）显著降低;多因素Cox回归分析显示CENPU表达水平是影响结直肠癌患者术后总生存期的独立危险因素（HR=1.848,P<0.05）。此外,体外实验显示CENPU可促进结直肠肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。结论 CENPU在结直肠癌组织中高表达,且与肿瘤进展密切相关,有望成为评估根治术后结直肠癌患者远期预后的潜在分子标志物。