肾细胞癌患者组织中RASSF1A、hMLH1及ALU甲基化水平的分析

目的探讨错配修复基因(h MLH1)、RAS相关区域家族1A基因(RASSF1A)启动子区甲基化以及ALU基因甲基化水平与肾细胞癌(肾癌)的关系。方法巢式甲基化特异性PCR(n MSP)检测15例肾癌组织及其相应癌旁组织中h MLH1、RASSF1A基因启动子区的甲基化状态,联合亚硫酸氢钠限制酶分析方法(COBRA)分析ALU基因甲基化水平。结果 h MLH1基因在肾癌组织中的甲基化率(0.41±0.18)%高于癌旁组织(0.32±0.13)%,差异有统计学意义(t=2.52,P0.05);ALU基因在癌组织中的甲基化率(0.11±0.04)%低于癌旁组织(0.12±0.03)%,差异有统计学意义(t=3.82,P0.05)。而RASSF1A基因在肾癌组织和癌旁组织中的甲基化率分别为(0.75±0.11)%和(0.69±0.12)%,差异无统计学意义(t=1.35,P0.05)。结论 h MLH1基因启动子区甲基化以及ALU基因甲基化可能与肾癌的发病有关,RASSF1A基因启动子区甲基化与肾癌发病无关。     

铜绿假单胞菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的铜绿假单胞菌携带的抗药基因情况及其与消毒剂的抗性关系和水平。方法采用PCR方法和肉汤稀释法分别检测临床分离铜绿假单胞菌qacE△1-SulI基因和对消毒剂抗性变化,并与铜绿假单胞菌标准菌株进行了平行比较。结果临床分离的6株铜绿假单胞菌中,有5株检出qacE△1-SulI基因阳性,抗药基因携带率达到83%以上。醋酸氯己定对6株临床分离铜绿假单胞菌的MIC值为7.8mg/L,与标准菌株相同;对氯间二甲苯酚对其中1株临床分离株的MIC高于标准菌株,但有2株低于标准株;苯扎溴铵对6株临床分离的铜绿假单胞MIC均低于标准株;聚维酮碘对5株qacE△1-SulI基因阳性菌株的MIC值与标准菌株相同,但抗药基因阴性菌株的MIC值低于标准株。结论临床分离的铜绿假单胞菌多数携带qacE△1-SulI基因,该抗药基因的携带与其对消毒剂的抗性有一定的相关性。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌qnrB基因的检测

目的:了解临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌株qnrB基因的存在情况及与细菌耐药的关系。方法:收集福建省福州市三家"三甲"医院临床分离的菌株,菌株药敏试验检测采用K-B法,聚合酶链反应对42株产ESBLs肺炎克雷伯菌和44株产ESBLs大肠埃希菌进行qnrB基因筛查。结果:42株产ESBLs肺炎克雷伯菌有5株检出qnrB基因,检出率为11.90%,44株产ESBLs大肠埃希菌中有7株检出qnrB基因,检出率为15.91%。检出qnrB基因的5株肺炎克雷伯菌和7株大肠埃希菌对两种喹诺酮药物均耐药。结论:在福州地区产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中存在qnrB基因,携带qnrB基因的12株细菌对左氟沙星和环丙沙星均耐药。     

老年人鲍曼不动杆菌的耐药分析

目的 分析老年人鲍曼不动杆菌的耐药情况.方法 从老年人中分离的鲍曼不动杆菌对10种抗生素的耐药情况,并用PCR方法检测碳青霉烯酶基因.结果 64株鲍曼不动杆菌检测出20株携带碳青霉烯酶OXA-23基因.结论 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯抗生素耐药主要是产生碳青霉烯酶,也有其它耐药机制起作用.     

SLCO1B1&APOE基因多态性检测性能验证

目的对人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行性能验证。方法参照产品行业标准要求及相关文献,设计验证方案,对武汉友芝友医疗公司生产的人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒的准确性(与金标准测序法结果比较)、特异性、最低检出限和抗干扰能力4个方面进行性能验证。结果 20个临床样本的荧光定量PCR检测结果与测序法结果比对,符合率为100%,满足试剂准确性验证要求;40个临床样本荧光PCR野生型位点的检测结果用测序方法均未检出突变,满足试剂特异性验证要求;基因检测试剂盒的最低检出限为10 ng/μL;血红蛋白、总胆红素和三酰甘油3种干扰物质加入已知基因型结果的血液样本后进行检测,与对照组结果均符合,满足试剂抗干扰能力验证要求。结论人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒各项性能验证参数与厂家声明基本一致,符合相关质量管理要求,可应用于临床标本检测。     

湖南地区人群HLA单倍型的多态性研究

目的 了解湖南地区人群HLA单倍型的多态性。方法 采用PCR-SSP法对3664名湖南籍健康人群进行HLA-A、B、DR位点的低分辨基因分型，计算HLA-AB、HLA-BDR、HLA—ABDR单倍型的连锁不平衡参数及频率，并与其他人群进行比较。结果 共检出350种HLA-AB单倍型、408种HLA—BDR单倍型、1935种HLA-ABDR单倍型。检出具备强连锁的HLA-AB单倍型36种、HLA-BDR单倍型48种，其中，频率较高的单倍型为A2-B46、A11-B60、A24-B60、B46-DR9、B60-DR15、B60-DR4、A2-B46-DR9、A33-B58-DR3、A11-B75-DR12。结论 湖南地区人群的HLA单倍型分布特点与我国南方人接近。但有其自身特征，A2-B＊8102、A24-B46-DR9、A11-B51-DR9可能为湖南人群特有的单倍型。     

先天性出血性疾病和易栓症的分子缺陷

先天性出血性疾病和易栓症的分子缺陷李家增先天性出血性疾病中最常见的是血友病甲。人们很早就发现了血友病，而且随着凝血试验方法的建立和改进将血友病分为甲、乙、丙三型，并明确了其所缺失的凝血因子。但随着免疫学、生物化学及分子生物学的发展，发现与各型血友病有...     

糖尿病并发肾病与对氧磷酶-2基因C311S多态性的关系

目的:研究对氧磷酶-2基因C311S(PON2C311S)多态性和郑州地区汉族人群2型糖尿病(DM)并发肾病的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度(PCR-RFLP)技术,检测DM(122例)、糖尿病合并微量白蛋白尿(MADM,121例)、糖尿病慢性肾功能衰竭(DN-CRF,123例)患者和健康对照组(125例)的PON2C311S多态性,同时测定其血脂和脂蛋白等的水平.结果:DN-CRF组和MADM组等位基因C的频率均低于DM和对照组,S的频率则高于后2组.等位基因C、S频率在DM组和对照组间的差异无统计学意义.观察4组各组内基因型SS和CC组间血脂、脂蛋白水平均无显著差异.PON2C311S致DM并发肾病的相对危险度(OR)及95%可信限(95%CI):DN-CRF组为2.68(1.48～4.48);MADM组为2.63(1.45～4.74).结论:PON2C311S多态性和DM并发肾病具有密切关系,和3组患者血脂、脂蛋白的异常改变无直接相关性.     

BP1基因在成人急性白血病中的表达

目的　研究 β蛋白 1(BP1)基因在成人急性白血病中的表达并分析与急性白血病的关系。方法　用RT PCR方法分别检测 70例急性白血病患者、10名健康对照者及HEL细胞系中BP1基因的表达。结果　在正常人外周血、骨髓和完全缓解的患者骨髓中均没有检测到BP1基因的表达 ;在急性髓系白血病 (AML)中BP1表达阳性率为 5 7% (35例中 2 0例 ) ,在AML M5中阳性率高达 80 % (10例中 8例 ) ;在急性淋巴细胞白血病中无表达。结论　BP1与AML有一定的相关性 ,可作为AML的一种分子标志。     

恶性肿瘤及切缘组织CD71表达率检测的临床意义

目的 探讨恶性肿瘤和切缘组织CD71 表达率的临床意义。方法 采用FCM对179例癌组织、切缘组织和15例正常组织CD71 表达率和DNA分析。 结果 肿瘤组织、切缘组织和正常组织CD71 表达率分别为(53.04±23.82) %、(34.03±23.64) %和(11.16±7.27) % ,各组间比较p<0.001。在各肿瘤组中CD71表达率以乳房癌组为最高 ,与胃癌、大肠癌、食道癌组比较均存在显著差异(p分别为<0.01、<0.05、<0.05)。各切缘组织组CD71 表达率以肝癌组最高 ,但与其它组比较 ,这一差异无统计学意义(p>0.05)。DNA分析有无异倍体之间CD71 表达率和S期细胞的比例 ,异倍体组均高于整倍体组(p<0.05和<0.001)。各类肿瘤 ,无论有无转移其CD71表达率均无明显差异(p>0.05)。结论 利用FCM检测CD71表达率可以定量、快速了解肿瘤的增殖情况 ,对肿瘤的诊断、预后判断和指导治疗具有重要意义