高脂血症患者SLCO1B1和APOE基因多态性与血脂水平的相关性

目的 探讨高脂血症患者SLCO1B1和APOE基因多态性,分析二者与患者血脂水平的相关性。方法 选取郑州颐和医院2019年1月至2021年12月收治的154例脂代谢异常患者为研究对象,同期选择体检健康者113例作为健康人对照组,采用PCR-荧光探针技术检测SLCOIB1和APOE的基因分型,分析基因多态性的分布特点,探讨高脂血症患者SLCOIB1和APOE基因与血脂水平的相关性。结果 高脂血症患者SLCO1B1基因以正常代谢性基因表型(*1a/*1a、*1a/*1b和*1b/*1b)为主,占所有基因型的79.9%,其中各单体基因型频率分布以1b型占比最高,为64.4%,疾病组和健康人对照组基因表型频率组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。高脂血症患者APOE基因表型以E3组(E3/E3和E2/E4)为主,占比66.9%,APOE各等位基因频率分布以E3表型占比最高,为76.7%;疾病组E3基因表型明显低于健康人对照组,E4基因表型明显高于健康人对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。高脂血症患者SLCO1B1各基因表型的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度...     

大动脉粥样硬化型缺血性脑卒中患者SLCO1B1基因多态性分布——185例分析

目的:分析大动脉粥样硬化型缺血性脑卒中(LAA-IS)患者185例中SLCO1B1基因388A>G和521T>C多态性位点的分布。方法:LAA-IS患者185例纳入研究,通过聚合酶链反应-荧光探针方法对其外周血样本中SLCO1B1基因的388G>A和521T>C位点进行检测并统计分析其基因分型分布。结果:根据SLCO1B1基因多态性分型,185例LAA-IS患者中SLCO1B1基因388A>G位点纯合野生型占8.6%,杂合突变型占40.5%,纯合突变型占50.8%;521T>C位点纯合野生型占77.8%,杂合突变型占21.0%,纯合突变型占1.1%。结论:本组185例LAA-IS患者中分布有较多的突变型SLCO1B1基因。     

71例缺血性脑卒中合并危险因素患者SLCO1B1和ApoE基因多态性研究

目的 探讨急性缺血性脑卒中合并危险因素患者SLCO1B1和ApoE基因多态性分布情况,为临床他汀类药物个体化用药提供参考。方法 采用抽签法随机选取2019年1月1日至2019年12月31日入住联勤保障部队第九〇〇医院神经内科的脑卒中并相关危险因素患者71例进行回顾性分析,测定其SLCO1B1和ApoE的基因多态性,观察基因多态性分布情况、患者一般人口学资料在不同基因型表达中是否存在差异以及不同基因型对血脂的影响。结果 本研究71例患者共检测到7种SLCO1B1基因型,其中Ⅰ类正常代谢型(~*1b/~*1b、~*1a/~*1b、~*1a/~*1a)占71.83%;而在检测到的3种ApoE基因型中,E3大众类基因型(ε3/ε3、ε2/ε4)占80.28%。基因型频率观察值符合Hardy-Wenberg遗传平衡,具有群体代表性。SLCO1B1 3组基因型在性别、年龄、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平方面无统计学差异(P>0.05),但在体重指数方面,Ⅱ类中间代谢型较Ⅰ类正常代谢型更高,与Ⅰ类正常代谢型差别具有统计学差异(P<0.05);在甘油三酯(triglyceride...     

CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒的性能验证

目的 对华法林代谢相关的人细胞色素P450超家族第二亚家族C9代谢酶(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因多态性检测试剂盒进行性能验证.方法 根据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)制定的有关要求,结合试剂说明书,从符合率、精密度、检出限、抗干扰能力4个方面对苏州旷远生物分子技术有...     

CYP2C19基因多态性检测的临床实验室性能验证

目的对人细胞色素P450酶等位基因(CYP2C19)多态性检测试剂盒进行性能验证。方法根据中国合格评定国家认可委员会CNAS-GL039:2019《分子诊断检验程序性能验证指南》相关要求,结合试剂盒说明书,从符合率、精密度、检出限和抗干扰能力4个方面对“人CYP2C19基因多态性检测试剂盒(荧光PCR法)”进行性能验证。符合率验证采用荧光PCR法和Sanger测序法检测;精密度验证选择杂合突变CYP2C19 c.681GA、c.636GA样本进行检测;抗干扰能力验证判断基因型检测是否受影响。结果PCR法和Sanger测序法的检测符合率为100%;CYP2C19 c.681 G和A等位基因的FAM和ROX荧光通道精密度检测CV值分别为3.78%、1.76%、3.76%和3.56%;CYP2C19 c.636 G和A等位基因的FAM和ROX荧光通道精密度检测CV值分别为3.08%、2.81%、3.40%和3.73%;样本最低检出限为10 ng/μL;抗干扰能力验证显示基因型可以正常检测。结论人CYP2C19基因多态性检测试剂盒(荧光PCR法)符合ISO15189质量管理要求,可以为临床提供准确可靠的检测结果。     

ISO15189认可关于CYP2C19基因多态性检测性能验证评价

目的评价荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人类CYP2C19基因多态性的分析性能。方法依据ISO15189认可要求对试剂盒的准确度(与金标准比较)、特异度、精密度、检测下限和抗干扰能力进行性能评价。结果 20份临床标本荧光定量PCR与Sanger测序法结果比对,准确度符合率为100%(测序符合率为100%);10份临床标本3个基因型位点荧光定量PCR与Sanger测序法结果均为野生型,特异度符合率为100%;荧光定量PCR对临床标本重复检测15次的结果完全一致,且Ct值CV≤5%;试剂盒最低检出限为0.550ng/μL;血红蛋白、胆红素和三酰甘油3种干扰物质加入已知基因型结果的血液标本后进行检测,与对照结果符合率为100%。结论荧光定量PCR检测人类CYP2C19基因多态性的性能验证满足ISO15189认可要求,适合于临床应用。     

人CYP2C19基因分型检测试剂性能验证

目的 通过设计合理的实验对人CYP2C19基因分型检测试剂盒[荧光聚合酶链反应(PCR)法]进行性能验证,证实其检测结果的可靠性。方法 参照CNAS-GL039:2019《分子诊断检验程序性能验证指南》要求,选择符合实验条件的样本,严格按照CYP2C19基因分型检测试剂盒标准操作流程进行基因型别的检测。通过数据分析和统计,对试剂盒性能进行多方面评估,包括方法符合率、检出限、交叉反应以及抗干扰能力。结果 15例临床样本(10例突变型+5例野生型)试剂盒检测结果与金标准测序结果完全一致,方法符合率为100%;经梯度稀释验证,试剂盒最低检出限为10 ng/μL;CYP2C19 1*/1*型(c.681G和c.636G)临床样本中,加入CYP2C19*17等位基因(c.-806C>T)和同源基因CYP2C9(c.1075A>C)突变型质粒,检测结果仍为1*/1*型,满足交叉反应验证要求;干扰物质(血红素20.0 g/L,甘油三酯11.0 mmol/L,总胆红素60.0μmol/L)对试剂盒检测结果无影响,抗干扰能力合格。结论 人CYP2C19基因分型检测试剂盒(荧光PCR法)性能评...     

基因多态性与新生儿高胆红素血症的关系研究进展

<正>新生儿高胆红素血症(neonatal hyperbilirubinemia,NH)是新生儿常见的疾病,超过50%的新生儿在出生后的一周内会出现黄疸,也是导致新生儿住院治疗的首要原因^[1-3]。误诊或延迟诊断可能会使NH新生儿面临神经功能障碍的风险,严重的NH疾病可能会导致胆红素脑病,甚至可能会导致神经系统出现慢性或永久性损伤和后遗症^[4]。研究证实,临床的发病因素难以提供真正的病因,遗传变异才是造成这种疾病的根本原因^[5]。NH的特征是血液中总血清胆红素(total serum bilirubin,TSB)水平升高,与胆红素代谢相关的基因有:     

便携式Celercare M1分析仪CRP检测的性能验证

目的对Celercare M1分析仪定量测定C-反应蛋白(CRP)的分析性能进行验证。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准方案,对CRP测定方法的线性范围、精密度、准确度、干扰试验以及方法比对等方面进行验证。结果 CRP检测方法在0.5~200mg/L范围内线性良好,回归方程为Y=0.979 X+0.456。CRP低值和高值批内精密度变异系数(CV)分别为5.9%、2.0%;日间CV分别为6.3%、2.2%。准确度良好,CRP低值和高值结果的相对偏差分别为2.3%、0.7%。当血清中胆红素水平不高于340μmmol/L、三酰甘油不高于10 mmol/L和血红蛋白不高于8g/L时,对CRP水平的测定没有明显的干扰。Celercare M1分析仪(Y)和IMMAGE 800(X)测定CRP的回归方程为Y=0.944 X+0.206,r2=0.996(P0.05)。Celercare M1分析仪在CRP 3个医学决定水平(3、10、100 mg/L)的相对偏倚分别为1.0%、4.0%和5.0%,小于1/2总允许误差。结论 Celercare M1分析仪定量测定CRP的线性范围、精密度、准确度、干扰性等分析性能良好,可被临床所接受。     

1种新型冠状病毒核酸检测试剂的性能验证

摘要：目的?验证一种新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒的检测性能。方法?依据CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》，使用2019-nCoV RNA液体性能验证参考品，依次对实时荧光RT-PCR试剂的符合率、检出限、交叉反应、精密度和抗干扰能力进行验证及评价。结果?实时荧光RT-PCR试剂检测2019-nCoV RNA的符合率为100%，检出限为125 copies/mL。该试剂检测人冠状病毒HCoV-OC43、人冠状病毒HCoV-HKU1、人冠状病毒HCoV-229E、人冠状病毒HCoV-NL63、SARS冠状病毒、中东呼吸综合征(MERS)冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒、腺病毒、肠道病毒、肺炎支原体、EB病毒、人巨细胞病毒和结核分枝杆菌无交叉反应；2.0×103?copies/mL和2.0×105?copies/mL的精密度参考品N基因检测的批内变异系数(CV)为0.70%及1.36%，批间CV为1.17%及1.72%；ORF1ab基因的批内CV为0.48%及0.52%，批间CV为1.36%及2.39%；加入内源性干扰物血红蛋白及清蛋白、外源性干扰物利巴韦林及阿奇霉素对2019-nCoV RNA的检测结果无影响。结论?该试剂检测2019-nCoV RNA的符合率、检出限、交叉反应、精密度和抗干扰能力均符合临床分子生物学扩增检验的要求，可为临床提供可靠依据。     

7600生化分析仪检测系统的性能验证

目的对日本Hitachi公司7600型全自动生化分析仪检测系统主要分析性能进行验证。方法参照美国临床实验室标准化委员(NCCLS)指南有关检测系统性能验证文件EP5-A、EP6-A的方法对选定生化检测项目的精密度、线性、可报告范围进行评价。结果日立7600检测各项目批内精密度结果除Na外,均在1/4CLIA’88要求的范围内,批间精密度结果除Na外均在1/3CLIA’88要求的范围内;线性验证标本按一定比例稀释后得到理论值与实测值的回归方程y=bx+a中,b均在0.97～1.03范围内,a在可接受范围内;可报告范围验证结果显示,标本经不同比例稀释后,理论值/实测值均在90%～110%,说明在一定范围内的标本稀释检测结果可靠。结论该检测系统的精密度、线性、可报告范围三个方面基本符合临床实验诊断学实验的要求,Na的检测方法需要改进。     

输血相容性检测常用试剂性能验证方案探讨

目的探讨输血相容性检测常用试剂性能验证方案,确保试剂性能满足即定要求及检测结果真实准确。方法采用血清学方法验证自制ccDee Oc、RhD(+)Oc、RhD(-)Oc、A型和B型血样、AB血浆致敏红细胞等)及抗体筛选细胞的特异性、血清试剂(抗-A抗-B、抗人球蛋白(抗IgG,C3d)、抗D(IgM)等)的特异性及效价、凝聚胺检测的准确度、细胞试剂(ABO反定)的特异性及凝集强度、质控品(血型和不规则抗体筛查、交叉配血)的特异性及灵敏度等指标,建立输血相容性常用检测试剂性能验证操作规程,明确需验证的情形、种类及关键性能指标和要求。结果除极少数输血相容性检测试剂性能在使用中未通过验证外,大部分试剂重要性能指标均符合即定的标准。结论输血相容性检测常用试剂性能验证方案应尽可能简便、高效地去反映试剂重要性能指标,并易于操作。     

有机阴离子转运多肽1B1 521T>C基因多态性与高脂血症发病的相关性

目的:探讨有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)521T>C与高脂血症发病的相关性.方法:采用实时荧光定量TaqMan-MGB探针法,检测321例高脂血症患者和259例健康受试者的基因型,并将其检测结果与DNA测序结果进行比较.结果:321例原发性高脂血症人群和259例健康受试者OATP1B1 521T>C位点的分布频率均为13%,两组间各基因型分布频率无统计学差异(X2=0.575,P>0.05),两组间低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、总胆固醇各个血脂指标的基因型无统计学差异(P>0.05),而Logistic回归分析法对影响高脂血症的相关因素进行回归分析,亦显示OATP1B1 521T>C与高脂血症无显著相关性(P>0.05).结论:SLCO1B1的521T>C突变为中国原发性高脂血症人群中的常见突变,但在中国原发性高脂血症人群和健康人群之间的分布差异无统计学意义,提示SLCO1B1的52IT>C突变与原发性高脂血症的发病率之间可能无相关性.     

蛋白酪氨酸磷酸酶-1B基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶—1B(protein tyrosine phosphastase-1B,PTP—1B)基因387位编码子Pro-Leu多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系。方法 采用多聚酶联反应—限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)的方法对湖北地区130例2型糖尿病患者及138例正常对照者PTP—1B基因387位编码子酶切位点进行研究。结果 2型糖尿病患者和正常对照者PTP—1B基因均以PP基因型为主，其频率分别为0．94和0．96；P等位基因频率分别为0．97和0．98，差异无统计学意义(P＞0．05)。2型糖尿病患者中PTP—1B基因P387L变异与体重指数(BMI)有关，但与空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯等临床变量不相关。结论 未发现PTP—1B基因387位Pro-Leu多态性与中国人2型糖尿病有关。     

焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677基因多态性的性能验证

目的对实验室自建焦磷酸测序法检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)*2和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)677基因多态性的方法进行性能评价。方法对不同浓度(10.0、2.0、0.4、0.0ng/μL)的杂合型DNA标本进行检测,评价方法的检出限;采用经焦磷酸测序法验证的DNA标本的PCR产物各20例,与Sanger测序法进行比较,评价方法的准确度;对3种(野生、杂合和突变型)基因型标本重复检测4次,评价方法的重复性。结果焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677多态性的检出限为2ng/μL基因组DNA;焦磷酸测序法的分型结果与Sanger测序法一致,准确度为100%;批内重复4次检测结果完全一致。结论焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677基因多态性稳定可靠,满足江苏省临床检验中心的要求,可用于临床检测。     

床旁即时检测凝血仪的INR检测性能验证

目的:验证Coagu Check XS凝血仪的国际标准化比值(INR)检测性能。方法:选取体检正常者140名,其中男性70名,女性70名,年龄25~45(34±8)岁;另选武汉亚洲心脏病医院心脏瓣膜置换术后口服华法林抗凝6周以上的门诊患者116例,其中男性67例,女性49例,年龄42~63(40±15)岁。参照ISO17593文件程序,评价CoaguCheck XS凝血仪检测INR的性能。结果:15名正常体检者与30例抗凝患者的INR范围为0.9~4.5,每例个体2次INR结果的重复性达到5%的要求,重复性得到验证。Coagu Check XS凝血仪与ACL TOP血凝仪INR检测结果的相关性R2为0.945,ACL TOP血凝仪检测结果较低,平均偏差为-0.08(95%置信区间:-0.12~-0.05),INR检测结果均达到了ISO17593的最小准确性验证要求,准确度得到了验证。根据120名正常体检者建立的INR参考区间为0.73~1.39。结论:Coagu Check XS凝血仪的INR检测性能达到了ISO17593的检测性能要求,可使用此仪器检测患者的INR。     

载脂蛋白B基因的多态性及其意义

载脂蛋白B(apolipoproteinB ,ApoB)基因具有丰富的多态性 ,这些多态性及其意义已经或正在作广泛的研究 ,本文就此方面进行综述。     

血站核酸检测项目基于ISO 15189的性能验证探讨

目的 探讨血站实验室Cobas s201全自动核酸检测系统及配套MPX V2.0试剂采用PCR-荧光法对HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA-1项目核酸检测方法和程序进行分析性能验证,以满足ISO 15189认可要求,确保核酸检测结果准确.方法 用2020年室间质评标本进行符合率验证,用Roche二代核酸检测...