SLCO1B1&APOE基因多态性检测性能验证

目的对人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行性能验证。方法参照产品行业标准要求及相关文献,设计验证方案,对武汉友芝友医疗公司生产的人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒的准确性(与金标准测序法结果比较)、特异性、最低检出限和抗干扰能力4个方面进行性能验证。结果 20个临床样本的荧光定量PCR检测结果与测序法结果比对,符合率为100%,满足试剂准确性验证要求;40个临床样本荧光PCR野生型位点的检测结果用测序方法均未检出突变,满足试剂特异性验证要求;基因检测试剂盒的最低检出限为10 ng/μL;血红蛋白、总胆红素和三酰甘油3种干扰物质加入已知基因型结果的血液样本后进行检测,与对照组结果均符合,满足试剂抗干扰能力验证要求。结论人类SLCO1B1APOE基因检测试剂盒各项性能验证参数与厂家声明基本一致,符合相关质量管理要求,可应用于临床标本检测。     

99Tcm-3P-RGD2用于肺癌整合素αv β3表达水平检测的实验研究

目的 采用99Tcm-3聚乙二醇4-RGD2(3P-RGD2)评估小细胞肺癌和肺腺癌细胞荷瘤鼠动物模型中整合素αvβ3表达水平.方法 按试剂盒说明书制备99Tcm-3P-RGD2.选取H446人小细胞肺癌细胞进行受体竞争抑制实验,检测3P-RGD2与整合素αvβ3的特异亲和性.通过细胞摄取实验检测H446和A549人肺腺癌细胞对99Tcm-3P-RGD2的摄取情况,以流式细胞术和免疫荧光染色测定2种细胞中整合素αvβ3的表达.观察99Tcm-3P-RGD2在H446和A549肺癌荷裸鼠模型(各6只)的microSPECT/CT显像情况.显像后断颈处死裸鼠,取部分肿瘤组织制备单细胞悬液,以流式细胞术检测细胞整合素αvβ3表达;部分组织制成切片,以免疫组织化学法检测肿瘤组织整合素αvβ3的表达.采用配对t检验对实验数据进行统计学分析.结果 99Tcm-3P-RGD2标记率为(97.0±2.0)％,4h时后放化纯仍高达95％.3P-RGD2与整合素αvβ3特异性结合的半数抑制浓度(IC5o)为8.759 nmol/L.H446细胞对99Tcm-3P-RGD2的亲和性高于A549细胞,摄取率均于120 min达峰值,分别为(5.75±0.50)％和(3.35±0.28)％(t=9.324,P＜0.05).H446和A549肺癌细胞均表达整合素αvβ3,且H446高于A549[(18.01±2.83)％和(5.77±0.64)％,t=7.488,P＜0.05].免疫荧光染色示H446细胞整合素信号明显高于A549细胞.MicroSPECT/CT显像示注射99Tcm-3P-RGD2后3 h T/NT达最大值,H446荷瘤鼠T/NT比值为6.39±1.29,高于A549荷瘤鼠(3.62±0.33,t=6.869,P＜0.05).H446和A549肿瘤组织经流式细胞术检测,整合素αvβ3表达水平分别为(22.89±3.63)％和(10.23±1.94)％(t=13.967,P＜0.05).免疫组织化学检测结果示H446和A549肿瘤组织和新生血管内皮细胞均有整合素αvβ3表达.结论 99Tcm-3P-RGD2可用于整合素αvβ3阳性肺癌的显像,并可无创评估不同肺癌组织整合素αvβ3的表达水平.     

肿瘤坏死因子家族及其相关药物的研究进展

细胞凋亡是进化保守的重要生物学过程,具有重要的生理和病理作用,如在免疫系统的发育与稳态以及多种疾病(包括肿瘤)的发生、发展、预后及治疗等过程中起重要作用。因此,近年来参与细胞凋亡信号转导的肿瘤坏死因子(TNF)/TNF受体(TNFR)家族的重要成员TNFα/TNFR、Fas/Fas L和TRAIL/TRAILR成为重要的药物靶点,并开发出多个相关靶向药物,尤其是生物药物,其中有些在临床疗效和商业上获得巨大成功。简介参与细胞凋亡信号转导的TNF/TNFR家族重要成员,着重对其通过介导细胞凋亡而发挥的生物学作用及其相关药物研发作一综述,希望对我国的药物研发有所裨益。     

前向/后向行走训练对痉挛型脑瘫患儿行走能力的影响

目的 对比分析痉挛型脑瘫患儿前向步态（Forward Walking,FW）训练和后向步态（Backward Walking,BW）训练对患儿行走能力的影响。方法 选取2023年3月-2023年6月医院收治的24例痉挛型脑瘫（Cerebral palsy,CP）患儿为研究对象,按照组间性别、年龄、痉挛程度、粗大运动功能分级、改良阿什沃思量表（Ashworth）分级等基线资料均衡可比的原则分为观察组和对照组,各12例。两组患儿每天均采用常规康复治疗,对照组在常规康复的基础上每天再给予25分钟的FW训练,观察组在常规康复训练的基础上每天再给予25分钟的BW训练,每周5次,共8周。比较两组患儿的内收肌肌张力、平衡能力、粗大运动功能。结果 治疗前,两组患儿内收肌肌张力、伯格平衡量表（Berg）、粗大运动功能评分量表88项（GMFM-88）维度D和维度E评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗8周后,对照组患儿内收肌肌张力变化不大,观察组患儿内收肌肌张力有改善,且两组患儿之间内收肌肌张力差异有统计学意义（P<0.05）。治疗8周后,两组患儿Berg、GMFM-88维度D和维度...     

胰岛素抗体阳性的2型糖尿病患者血清甲状腺激素、促甲状腺激素水平分析

目的分析胰岛素抗体阳性的2型糖尿病患者血清甲状腺激素、促甲状腺激素(TSH)水平的变化情况。方法选取2016年11月至2017年11月该院收治的接受重组人胰岛素治疗的2型糖尿病患者156例为病例组,按照胰岛素抗体检测结果分为胰岛素抗体阳性组(85例)与胰岛素抗体阴性组(71例),另选取同期健康体检者64例为对照组,检测3组空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、空腹C肽(FCP)、糖化血红蛋白(HbA1c)以及三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、TSH水平。结果胰岛素抗体阳性组与胰岛素抗体阴性组FINS、FBG、FCP、HbA1c水平均显著高于对照组(P0.05),而胰岛素抗体阳性组与胰岛素抗体阴性组以上指标比较,差异均无统计学意义(P0.05)。3组T4、TSH水平比较,差异无统计学意义(P0.05),胰岛素抗体阳性组与胰岛素抗体阴性组T3、FT3、FT4水平均显著低于对照组(P 0.05),胰岛素抗体阳性组T3、FT3、FT4水平均显著低于胰岛素抗体阴性组(P 0.05)。结论部分2型糖尿病患者应用胰岛素治疗后会产生胰岛素抗体,并且胰岛素抗体阳性的2型糖尿病患者T3、FT3、FT4水平明显降低。     

DLBCL患者经GM-CSF治疗后外周血单个核细胞及树突状细胞变化研究

目的研究弥散性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者经GM-CSF治疗后,外周血单核细胞、树突状细胞(DC)、髓系树突状细胞(mDC)以及浆系树突状细胞(pDC)的变化情况。方法 2014年10月至2016年2月入住该院的33例DLBCL患者静脉注射GM-CSF进行治疗,每周注射1次GM-CSF,每周为1个疗程,共治疗3个疗程。每次注射前,静脉采血3mL,采血后24h内用流式细胞仪对外周血单核细胞和DC进行检测。检测结果用SPSS17.0软件进行统计分析。结果 33例患者GM-CSF治疗前单核细胞水平为(9.85±2.31)%,3个疗程治疗后为(3.67±0.78)%,差异有统计学意义(P0.01)。DC水平治疗前为(0.24±0.04)%,治疗后为(0.58±0.13)%,差异有统计学意义(P0.01)。其中,mDC治疗水平为(0.11±0.02)%,低于治疗后的(0.36±0.08)%(P0.01);pDC治疗前、后比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 DLBCL患者经GMCSF治疗3个疗程后,单核细胞明显减少,DC显著增加,其中mDC显著增加,pDC无明显变化,即GM-CSF治疗激活了DLBCL患者的抗肿瘤免疫。     

一种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂不同检测平台上的验证情况分析

目的 将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价.方法 依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件,应用Roche LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行临床样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验.结果 LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统:2×106 IU/mL浓度水平批内精密度为1.38％,批间精密度为0.25％;2×104IU/mL浓度水平批内精密度为0.35％,批间精密度为0.79％.正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5％,符合厂家说明及文件要求.HBV DNA定量结果在2.1×102IU/mL至2.1×107IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2=0.9994),临床可报告范围为2.1×102IU/mL～2.1×108IU/mL.该系统检测下限为148 IU/mL.ABI 7500型实时荧光定量PCR系统:2×106IU/mL浓度水平批内精密度为0.70％,批间精密度为1.34％.2.5×104IU/mL浓度水平批内精密度为1.18％,批间精密度为3.01％.正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5％,符合厂家说明及文件要求.HBV DNA定量结果在2×102IU/mL至2×10sIU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R2 =0.9991),临床可报告范围为2×102IU/mL ～2×109IU/mL.该系统检测下限为203 IU/mL.结论 圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在Roche LightCycler(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围,检测结果无明显差异,均可准确快捷的对HBV DNA定量检测,为后续超敏定量工作奠定基础.