黄连多糖不同组分抗氧化活性比较研究

目的研究黄连粗多糖和带电量不同的黄连多糖组分的抗氧化活性。方法用二乙氨乙基纤维素(阴离子交换柱层析)分离纯化除蛋白后的黄连粗多糖,用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和2,2-二苯基-1-苦味肼基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)分析法测定黄连粗多糖及纯化后带电量不同的多糖组分体外抗氧化作用。结果经阴离子交换柱层析,可获得4种带电量不同的黄连多糖组分,且这4种组分和黄连粗多糖对羟自由基、超氧阴离子和DPPH都有一定的清除作用,其中带电量高的组分对不同抗氧化模型均具有较高的清除作用。结论黄连多糖有一定的抗氧化活性,其抗氧化活性和其带电量具有正相关性。     

灯盏花素对内皮细胞的保护作用及机制

探讨灯盏花素对内皮细胞的保护作用及机制。采用用不同浓度的灯盏花素(10,20,40 μmol/L)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)预处理4 h,再采用氧化型低密度脂蛋白诱导细胞氧化损伤20 h,然后检测细胞的改变,包括采用MTT方法检测细胞增殖活力、流式细胞仪检测细胞凋亡及活性氧含量,以及蛋白免疫印迹及定量PCR方法检测细胞信号通路关键分子的改变。实验结果发现,灯盏花素可以逆转氧化型低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤并呈剂量依赖效应,并减少内皮细胞的凋亡。为探索灯盏花素的作用机制,首先检测了细胞与多种浓度及时间(2,4,6 h)的灯盏花素预孵育后的活性氧含量改变,结果发现灯盏花素可剂量及时间依赖地减少活性氧的产生。进一步发现,细胞信号通路分析发现灯盏花素可促进BCL-2的表达,抑制BAX的表达及细胞色素C的释放及caspase-3的剪切。灯盏花素可减少Keap1及激活Nrf2的核内转运,促进下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和谷胱甘肽-S-转移酶Mu1型(GSTM1)的基因转录及蛋白表达,增强NQO1酶活。此外,灯盏花素还可减少IKK及IKB及抑制NF-κB核内转运,而促进eNOS的表达。本研究表明灯盏花素对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞损伤有保护作用,其作用可能与其抗氧化作用及抑制NF-κB活化有关。     

虾青素抑制氧化应激改善陈旧红细胞保存质量

目的:观察虾青素能否抑制陈旧悬浮红细胞内的氧化应激,改善红细胞保存质量。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组,对照组加入DMSO,另外3组悬浮红细胞的保存液内加入抗氧化剂虾青素使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,悬浮红细胞于2℃~6℃内保存。保存至28 d、42 d采用倒置荧光显微镜观察悬浮红细胞内活性氧族的表达状况,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族的含量,采用硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛含量,扫描电镜观察红细胞的超微结构,采用化学比色法测定三磷酸腺苷含量,采用紫外测试法测定2,3-二磷酸甘油酸含量。结果:与各自对照组相比,加虾青素的三组储存28 d和42 d悬浮红细胞内活性氧族和丙二醛含量降低,三磷酸腺苷和2,3-二磷酸甘油酸水平升高,改善了红细胞的形态。结论:虾青素可以通过降低储存悬浮红细胞内的氧化应激水平改善红细胞保存质量。     

杨梅苷通过抑制线粒体功能障碍减轻MPP~+诱导的SN4741细胞凋亡

目的:研究杨梅苷(myricitrin,五羟基黄酮-3-鼠李糖,Myr)对1-Methyl-4-phenylpyridinium iodide(MPP+)诱导的SN4741细胞凋亡的影响及其可能机制。方法:利用MPP+处理多巴胺能SN4741细胞,建立帕金森病体外细胞模型;4-甲基偶氮唑蓝(MTT)检测SN4741细胞活性;TUNEL法检测细胞凋亡断裂的DNA片段;Mitotracker观察线粒体形态;流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)。结果:MPP+(80μmol/L)作用于SN4741细胞24 h后,与对照组比较,细胞存活率降低(47.3±2.9)%(P0.01),断裂DNA片段增多,线粒体碎片增多,ROS生成增多;杨梅苷(10、20μmol/L)预处理24h后,细胞存活率增加(69.3±3.2)%和(87.7±5.2)%(P0.01),DNA断裂片段减少,线粒体碎片减少,ROS生成减少。结论:杨梅苷对MPP+诱导SN4741细胞凋亡具有浓度依赖性的保护作用,其作用机制可能与减轻线粒体功能障碍、抑制ROS生成有关。     

补中益气汤含药血清诱导肺癌A549细胞凋亡及抗氧化能力的研究

目的研究补中益气汤含药血清诱导肺癌A549细胞凋亡及其抗氧化能力的分子机制。方法利用补中益气汤含药血清干预体外培养的肺癌A549细胞,分别应用MTT法检检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡发生,蛋白质免疫印迹实验检测Caspase 3活化,细胞活性氧实验检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果补中益气汤含药血清能抑制A549细胞增殖,诱导Caspase 3依赖的细胞凋亡,且细胞凋亡发生与ROS活化相关。结论补中益气汤含药血清诱导A549细胞凋亡可能与ROS信号通路相关     

氧化应激促发颅内动脉瘤的研究进展

氧化应激与炎性反应是颅内动脉瘤(CA)形成和破裂的核心因素。作用机制为:1)直接损伤脑动脉内膜;2)使血管平滑肌细胞(VSMC)由可收缩型向炎性反应型转化并凋亡;3)募集炎性细胞、分泌炎性因子,侵袭管壁;4)激活基质金属蛋白酶(MMP),重构和解体血管壁;5)介导脂质过氧化,引起动脉粥样硬化和高血压。初步研究显示阻断氧化应激可预防CA发展,但详细机制尚需进一步探究。     

依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效分析

目的：探讨依达拉奉对治疗急性脑梗死患者的临床疗效及对血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及神经功能的影响。方法选择符合标准的急性脑梗死患者100例,随机分为观察组和对照组各50例,两组患者均给予常规治疗,观察组加用依达拉奉,对照组加用胞磷胆碱钠,治疗前、治疗后7d及14 d检测患者血清SOD、MDA水平,进行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分。结果治疗后两组血清SOD活力较治疗前明显增强,MDA浓度降低,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组改善幅度明显大于对照组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后两组NIHSS评分较治疗前均明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组下降幅度明显大于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗14 d后两组临床疗效比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论急性脑梗死患者应用依达拉奉可有效保护机体SOD活性,降低血清MDA水平,促进神经功能恢复,改善患者预后。     

虾青素对红细胞氧化应激及胞膜过氧化损伤的影响

目的:探讨抗氧化剂虾青素(Astaxanthin,ASTA)对储存悬浮红细胞内外氧化应激水平的影响和对胞膜的保护作用。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组:A组、B组、C组、D组。在B、C、D3组悬浮红细胞的MAP保存液内加入抗氧化剂ASTA,使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,A组作为对照组只加入ASTA的溶解液DMSO。悬浮红细胞于2℃-6℃冰箱内保存。于保存第7、14、28、42天,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族(ROS)含量;硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛(MDA)含量;分光光度法测定细胞外过氧化氢(H2O2)含量,全自动血细胞分析仪测定平均红细胞体积(MCV);化学比色法测定细胞外游离血红蛋白含量(FHb)。结果:在红细胞储存期间B、C、D组悬浮红细胞内ROS、MDA含量、细胞外FHb和H2O2含量均低于对照组;保存第7天和14天时B、C、D组的MCV与对照组无统计学差异;保存第28天和42天时B、C、D组的MCV低于对照组。结论:ASTA可以降低储存悬浮红细胞内外的氧化应激水平,减轻细胞膜的过氧化损伤。     

依达拉奉治疗急性脑梗死疗效观察

目的观察依迭拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效及安全性。方法我院88例急性脑梗死患者,随机分为治疗组43例和对照组45例,治疗组死亡1例,实际完成观察42例,对照组死亡3例,实际完成观察42例。对照组患者给予丹参、肠溶阿司匹林等常规基础治疗。治疗组在常规治疗基础上加用依达拉奉30mg＋0．9%氯化钠溶液100ml静脉滴注,2次/d,疗程均为14d。在治疗前、后进行神经功能缺损评分（卒中量表CSS）,比较两组的疗效,并观察依达拉奉治疗期间的不良反应。结果两组患者治疗前、后神经功能缺损评分间差异均有显著性意义（P＜0．05）,且两组患者治疗后差异亦有非常显著性意义（P＜0．01）。两组患者临床疗效间差异有非常显著性意义（P＜0．01）。两组均无明显不良反应。结论依达拉奉治疗急性脑梗死是安全、有效的。     

白芍总苷体外抗氧化活性研究

目的研究白芍总苷体外对不同化学体系和生物体系的抗氧化活性。方法通过Fenton反应生成·OH自由基,采用DPPH·自由基,观察不同质量浓度的白芍总苷溶液对化学体系自由基的清除作用。利用邻二氮菲-Fe2+-H2O2产生的·OH自由基造成红细胞膜破裂,以及肝、脑细胞脂质的过氧化,观察不同质量浓度的白芍总苷溶液对生物体系自由基的清除作用。结果白芍总苷对·OH有一定的清除作用,其IC50为0.62 g/L。白芍总苷对DPPH·自由基有较强的清除作用,IC50为6.6 mg/L;对·OH自由基引发的红细胞膜破裂有一定的抑制作用,其IC50为30.17 mg/L,对肝、脑匀浆脂质过氧化有一定的抑制作用,其IC50分别为6.9、16.3 mg/L。结论白芍总苷具有清除自由基作用,在不同体外实验体系中抗氧化量效关系存在差异。