叶酸对铝诱导的人神经母细胞瘤细胞活性氧和线粒体膜电位水平的影响

目的 探讨叶酸对铝诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)水平的影响.方法 叶酸与不同金属共同处理SH-SY5Y细胞24 h,不同浓度Al分别染毒SH-SY5Y细胞6 h,不同浓度叶酸干预Al诱导SH-SY5Y细胞6 h,检测上述各组细胞ROS水平.测定叶酸对Al诱导SH-SY5Y细胞的毒性、MMP水平.结果 与control组比较,300μmol/L Al诱导SH-SY5Y细胞的ROS水平最高(P<0.05).50μmol/L叶酸+300μmol/L Al组细胞DCF相对荧光值、MMP降低的细胞比例、细胞存活率分别为15926±8200、38.04％、82.7％,与300μmol/L Al组20118±12503、45.88％、71.9％比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 叶酸可能通过拮抗铝诱导的SH-SY5Y细胞ROS水平升高来阻止MMP的降低,从而提高铝诱导下SH-SY5Y细胞的存活率.     

肝硬化患者中性粒细胞免疫功能障碍的研究进展

肝硬化患者易并发感染,这与其免疫功能障碍密切相关。中性粒细胞作为固有免疫的主要效应细胞,其数量减少及功能损伤在肝硬化患者免疫功能障碍中起关键作用,损伤的功能包括趋化、吞噬、呼吸爆发、形成和释放中性粒细胞胞外诱捕网等。本文在近年来最新研究进展的基础上就肝硬化患者中性粒细胞功能受损的原因及其机制进行了综述,阐述了改善肝硬化患者中性粒细胞功能的一些措施,以期为肝硬化患者中性粒细胞功能损伤的机制探索及治疗提供新思路。     

氧化应激与脑血管病危险因素

氧化应激系指机体活性氧产生过多和(或)机体抗氧化能力减弱,产生与清除失衡,导致活性氧在体内聚积并引起细胞氧化损伤的病理过程。这一病理过程与脑血管病关系密切,吸烟、血糖水平波动、高脂血症、高血压和高同型半胱氨酸血症等多种脑血管病危险因素均可使活性氧的产生增加。     

丁苯酞软胶囊对急性脑梗死患者氧化损伤及抗氧化能力的影响

目的研究丁苯酞对急性脑梗死患者氧化损伤及抗氧化能力的影响。方法选择急性脑梗死患者62例,分为实验组(添加丁苯酞软胶囊)和对照组(未添加丁苯酞软胶囊),所有患者均采用Fenton法测定血清活性氧(ROS)水平和ELISA法检测患者的血清总抗氧化能力(T-AOC)水平,并比较两组的差异。结果治疗后1周实验组患者的血清ROS水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后1周实验组患者的血清T-AOC水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);实验组患者的血清T-AOC水平治疗后较治疗前升高明显,差异有统计学意义(P0.05);实验组2周后NHISS评分低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论丁苯酞可能通过减少ROS,提高机体总抗氧化能力,达到对神经元的保护,从而有效改善神经功能缺损症状。     

肝胆管结石患者血浆自由基的检测及分析

近年来 ,对自由基与肝胆结石病的关系的研究越来越受到人们的重视 ,并取得一定成果[1] 。肝胆是体内代谢极其活跃的器官 ,耗氧量大 ,产生自由基多 ,氧自由基在肝胆病变中起着重要作用[2 ] 。我们测定了 5 0例肝胆管结石病人与 30例正常人血浆超氧化物歧化酶 (ＳＯＤ)和超氧阴离     

维生素辅助治疗儿童癫痫56例疗效观察

目的:观察抗自由基药物(VE和VC)辅助治疗儿童癫痫的疗效。方法:癫痫患者56例,所有病例均符合国际抗癫痫联盟癫痫的诊断标准,随机分为传统抗癫痫药组(18例)、传统抗癫痫药+VE组(19例)、传统抗癫痫药+VC+VE组(19例),检测各组治疗前后静脉血中总抗氧化力(T-Aoc)及丙二醛(MDA)的平均水平。结果:(1)传统抗癫痫药+VE组静脉血中T-Aoc的平均水平较传统抗癫痫药组高,P<0.05;MDA的平均水平较传统抗癫痫药组低,P<0.05。(2)传统抗癫痫药+VC+VE组T-Aoc的平均水平较传统抗癫痫药+VE组高,但P>0.05,无统计学意义;MDA的平均水平较传统抗癫痫药+VE组低,P<0.05。(3)传统抗癫痫药+VC+VE组、传统抗癫痫药+VE组、传统抗癫痫药组治疗后的总有效率分别为68.4%、63.2%、55.6%。结论:对癫痫患儿加用抗自由基药物(VE和VC)作为辅助治疗,在血液指标与疗效方面可能优于未加者。VE、VC联合应用能起到协同效应,二者联合可能增强了抗氧化效果与抗癫痫作用。     

甘草查尔酮A对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 观察甘草查尔酮A对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法 细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度甘草查尔酮A对MDA-MB-231细胞存活率的影响;甘草查尔酮A（10,20,40 μmol·L^-1）作用MDA-MB-231细胞24 h,分别用细胞凋亡试剂盒（Annexin V-FITC/PI）检测细胞凋亡情况;荧光探针法（DCFA-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平,荧光探针（JC-1）法检测细胞线粒体膜电位（MMP）;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）的表达及内质网应激相关蛋白（CHOP）,转录激活因子4（ATF4）,蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）,磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK）,真核翻译起始因子2α（eIF2α）,磷酸化真核翻译起始因子2α（p-eIF2α）表达。结果 与空白组比较,随着甘草查尔酮A浓度增大,从甘草查尔酮A 5 μmol·L^-1开始,细胞存活率明显降低（P<0.05）,其半数抑制浓度（IC₅₀）为19.05 μmol·L^-1;甘草查尔酮A（10,20,40 μmol·L^-1）组细胞凋亡明显升高（P<0.05）,甘草查尔酮A 40 μmol·L^-1时细胞凋亡率达30.2%（P<0.05）;甘草查尔酮A（10,20,40 μmol·L^-1）使抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显降低（P<0.05）,促凋亡蛋白Bax表达明显升高（P<0.05）,且呈浓度依赖性;甘草查尔酮A（10,20,40 μmol·L^-1）明显升高细胞内ROS水平（P<0.05）,降低线粒体MMP水平（P<0.05）,导致线粒体功能障碍,呈浓度依赖性;甘草查尔酮A（10,20,40 μmol·L^-1）诱导内质网应激,使内质网应激相关蛋白CHOP,ATF4表达明显增多,磷酸化（p）-PERK,p-eIF2α表达明显升高（P<0.05）,呈浓度依赖性。结论 甘草查尔酮A可能通过增加细胞内ROS水平,降低MMP引起线粒体功能障碍和内质网应激诱导MDA-MB-231细胞凋亡。     

人参-三七-川芎提取物对内皮微粒介导HUVECs衰老的干预作用

目的:观察人参-三七-川芎提取物对延缓内皮微粒(EMPs)诱导的血管内皮细胞衰老的影响,并探索其作用机制。方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,复制性衰老10~12代细胞作为衰老模型,实验分为年轻组(2~4代细胞)、衰老组(10~12代细胞)、单纯EMPs干预组(提取衰老细胞产生的EMPs来干预年轻细胞)以及中药低、中、高剂量组(200,300,400 mg·L-1)。结合衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法和碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期来判断细胞衰老程度。采用细胞活性和细胞增殖检测(CCK-8)法筛选给药浓度,两步离心法分离出EMPs,藻红蛋白(PE)CD31抗体或异硫氰酸荧光素(FITC)Annexin V标记分离得到的EMPs,并用流式细胞术进行定量,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFDA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果:与衰老组比较,中药给药组可显著降低衰老细胞SA-β-gal活性(P<0.01),使细胞周期S期阻滞得到恢复(P<0.01),并降低衰老细胞分泌CD31+EMPs及Annexin V+EMPs的数量(P<0.05)。与年轻组比较,单纯EMPs干预组可诱导年轻细胞SA-β-gal活性增强(P<0.01),细胞周期阻滞于S期(P<0.05),与衰老组比较,但在EMPs干预的同时给予中药干预后,可明显抑制EMPs介导增强的SA-β-gal活性(P<0.05),并使S期阻滞得到恢复。中药组还可明显抑制EMPs诱导的细胞内ROS增高(P<0.05,P<0.01)。结论:人参-三七-川芎提取物可通过影响EMPs延缓复制性血管内皮细胞衰老,其机制可能与抑制EMPs诱导的细胞内ROS水平增高有关。     

脑复益聪胶囊对老年性痴呆的疗效及其作用机制探讨

目的探讨脑复益聪胶囊治疗老年性痴呆(Alzheimers disease,AD)的疗效与机制.方法将符合美国精神神经疾病学会(diagnostic and statistical manual of mental disorders,DSM-Ⅳ)标准及WHO的ICD-10诊断标准的AD患者,按随机数字表分为脑复益聪胶囊治疗组28例,脑复康对照组27例,进行对照观察,疗程3个月.观察治疗前后患者临床疗效,简易智力状态量表(mini-mental state examination,MMSE)和日常生活能力量表(activity of dailyliving scale,DL)积分值的变化;进行与学习记忆相关的氧自由基、一氧化氮及血脂水平等指标的比较分析.结果脑复益聪胶囊能改善AD患者的MMSE及ADL积分值,对MMSE积分疗效为64.29%,高于对照组48.15%,但组间比较无差异(u=1.20,P＞0.05),对ADL积分疗效为67.86%,较对照组51.85%疗效高,但组间差异无显著性(u=1.26,P＞0.05);治疗组对痴呆临床疗效的总有效率为78.57%,明显优于对照组44.44%,组间有显著性差异(u=2.16,P＜0.01);脑复益聪胶囊可增强红细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,降低体内脂质过氧化物(lipidperoxidativeproduct,LPO)含量;降低一氧化氮含量,减弱一氧化氮合酶(nitric oxide synhase,NOS)活性,并有降三酰甘油,提升高密度脂蛋白的作用;未发现明显毒副作用.结论脑复益聪胶囊能促进AD患者学习记忆的恢复,改善临床症状,通过调节氧自由基,改善体内一氧化氮对神经元的毒性,调整脂代谢紊乱等,可能是其防治AD较好疗效的相关作用机制.     

具有线粒体靶向性的雷公藤甲素TPP-PEG-PCL脂质体的制备及其促肝肿瘤细胞凋亡研究

目的 成功制备雷公藤甲素（3-丙羧基）三苯基溴化膦（TPP）-聚乙二醇-b-聚己内脂（PEG-PCL）脂质体（Tr@TPP/Lip）,评价其靶向性及促肝肿瘤细胞凋亡效果。方法 采用正交试验优选Tr@TPP/Lip的制备工艺,再研究该载药系统的粒径、Zeta电位、载药量、包封率和多分散系数及透射电镜微观形态,评价Tr@TPP/Lip的稳定性、溶血性、释放情况;采用荧光试验,研究脂质体与肝肿瘤细胞的融合情况、线粒体靶向性和肝脏靶向性;在等剂量给药条件下,评价Tr@TPP/Lip促肝癌细胞凋亡效果。结果 正交试验优选的Tr@TPP/Lip粒径为（113.5±17.6）nm,Zeta电位（12.6±0.7）mV,包封率为（71.3±3.2）%,载药量为（3.9±1.1）%,多分散系数为0.12±0.04;透射电子显微镜图片显示Tr@TPP/Lip呈规则圆球形,该脂质体稳定性良好,具有较小的溶血率和良好的缓释药物性能;荧光试验结果显示,TPP阳离子能促进脂质体与肿瘤细胞的融合,并靶向线粒体,还能提高药物在肝肿瘤部位的靶向和滞留效果;细胞药效结果显示,Tr@TPP/Lip具有良好的促肝肿瘤细胞凋亡效果,能明显降低线粒体膜Zeta电位、增加细胞内活性氧水平和Caspase-3的释放,显著增加促凋亡蛋白Bcl-2、减少抗凋亡Bax蛋白的表达,这些细胞凋亡试验结果均明显优于雷公藤甲素普通脂质体和雷公藤甲素。结论 Tr@TPP/Lip具有较好的线粒体靶向功能,能增强药物促肝肿瘤细胞凋亡效果。