阿魏酸钠对兔激素性股骨头坏死早期促血管生成影响的实验研究

目的探讨药物阿魏酸钠对于激素性股骨头坏死(SANFH)早期干预以及对于血管变化的影响,以达到预防或延缓股骨头坏死的目的。方法利用改良的马血清加甲强龙的方法成功制备兔激素性股骨头坏死早期的动物模型,56只动物随机zhi分为对照,模型和治疗三组。分别选取激素注射后2周、4周、8周、12周共4个时间点,每组随机处死四只动物进行股骨头大体观察、HE染色、VEGF免疫组化染色、透射电镜观察。分析每组各时间点相关指标的变化情况以及各组之间的差异。结果大体观察以及HE染色和透射电镜观察发现早期股骨头坏死动物模型建立成功,且治疗组与模型组相比股骨头坏死表现明显减轻,VEGF表达增强,两组差别有统计学意义(P0.05)。结论阿魏酸钠可以有效地you,治疗e were dividied into 3 groups延缓或降低股骨头坏死的发生。     

TGF-β2体外诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型的观察

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）在TGF-β2诱导下向软骨细胞表型转化的能力,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可能性。方法：抽取兔髂骨骨髓液3-4ml,进行原代和传代培养,传代后实验组以高糖DMEM无血清特定培养液诱导f含TGF-β2 10ng／ml、地塞米松10^-7M、维生素C50μmol／L）,对照组以高糖DMEM无血清培养液培养,相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。结果：诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21天后细胞形态变化最为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀。结论：TGF-β2可有效诱导MSCs向软骨细胞表型转化,分泌软骨细胞特异性基质,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源。     

双基因共表达腺相关病毒穿梭质粒的构建与鉴定

目的 合成和筛选nogc66-siRNA干扰片段,克隆神经生长因子-β(NGF-β),构建含nogu66-siRNA和NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒.方法 设计针对nogo66的siRNA,插入载体pGenesil-1.1,转染大鼠胶质瘤C6细胞,通过RT-PCR和Western-blot检测筛选有效的干扰质粒;培养人MI-Apaca-2细胞,提取总RNA,进行RT-PCR得到人NGF-β基因,插入T-easy载体;将pGenesil-1.1与pAAV-MCS进行重组,得到含U6和CMV双启动子的重组腺相关病毒穿梭质粒pAAV-U6/CMV-EGFP;将nogo66-siRNA和NGF-β分别插入pAAV-U6/CMV-EGFP中,构建含nogo66-siRNA和NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒.结果 干扰质粒pGenesil-nogo66-siRNA测序显示干扰序列正确;RT-PCR结果显示转染后各条带相对亮度有差异,转染pGenesil-nogo66-siRNA-1和pGenesil-nogo66-siRNA-2使nogo基因表达降低;Western-blot结果显示转染pGenesil-nogo66-siRNA-1使NOGO蛋白表达下降73%,转染pGenesil-nogo66-siRNA-2使NOGO蛋白表达下降78%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P<0.05);质粒T-easy-NGF-β酶切可见3000 bp、736 bp条带,测序显示基因序列正确;酶切pAAV-U6/CMV-EGFP、pAAV-U6-nogo66-siRNA/CMV-EGFP可见4300 bp、800 bp条带,转染细胞后均可见绿色荧光蛋白表达;酶切pAAV-U6/CMV-NGF-β、pAAV-U6-nogo66-siRNA/CMV-NGF-β可见4300 bp、736 bp条带;质粒pAAV-U6βnogo66-siRNA/CMV-NGF-β测序显示载体中的基因序列止确.结论 成功构建了含有nogo66-siRNA与NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒,为深入研究脊髓损伤的修复提供了实验基础.     

miRNA作为精神分裂症分子标志物的研究进展

精神分裂症(schizophrenia)是一种受多种微、中效基因调控及多因素影响的严重精神疾病,发病率约为1%,发病机制至今未明。该病对患者的身心健康有严重影响,给社会和家庭带来了极大的负担,如何早期筛查和有效治疗已成为研究热点。本文对miRNA与精神分裂症的相关研究作一综述。     

烟酸治疗维持性血液透析伴高钙高磷血症的有效性及安全性

目的：观察烟酸治疗维持性血液透析同时伴发高钙血症及高磷血症的临床疗效及安全性。方法对经2周洗脱期后血清磷≥1.78 mmol·L-1、血清校正钙≥2.5 mmol·L-1的25例维持性血液透析患者在采用常规治疗基础上给予烟酸口服,观察治疗前及治疗4、8周后血清磷、血清校正钙、钙磷乘积、全段甲状旁腺激素（iPTH）和血碱性磷酸酶、血小板计数、血尿酸、血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的变化。结果与治疗前比较,治疗4周后血清磷及钙磷乘积明显下降（均P〈0.05）,而血清校正钙、血iPTH、血碱性磷酸酶、血小板计数、血尿酸、血糖及总胆固醇、三酰甘油、HDL-C及LDL-C水平无显著变化（均P〉0.05）;与治疗4周后比较,治疗8周后使血清磷及钙磷乘积进一步下降（均P〈0.01）,血iPTH、血碱性磷酸酶、血胆固醇、三酰甘油、LDL-C也显著降低（P〈0.05或P〈0.01）;相反,HDL-C则显著增加（P〈0.05）。血清校正钙、血小板计数、血尿酸及血糖未见显著变化（均P〉0.05）。结论烟酸可有效降低伴有高钙血症血透患者的血磷水平,改善血脂异常,安全性好。     

精神分裂症患者血清特征多肽及其鉴定的研究

目的验证筛选出的具有特异性的血清蛋白标志物,为精神分裂症寻找客观的临床诊断依据。方法利用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术和自动酶标仪分别测出血清特征多肽在精神疾病组和健康对照组中的吸光度值,再通过SPSS17.0对数据进行单因素方差分析,以此验证血清多肽的特异性。结果在单因素方差分析中,神经肽2在精神分裂症组与健康对照组比较,显著性水平为0.040,其他精神疾病对照组与健康对照组比较,显著性水平为0.008,说明神经肽2在这两组比较中差异有统计学意义（P〈0.05）;在多独立样本检验中,神经肽2的渐近显著性水平为0.031,神经肽2在各组之间的表达差异有统计学意义（P〈0.05）。结论神经肽2在精神分裂症患者与健康人之间存在明显特异性,对该病诊断、治疗和基因的研究具有重要意义。     

大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中的氧化应激

目的 探讨大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中的氧化应激反应机制.方法 18只雄性SD大鼠随机分成对照组、6h组、24 h组,每组6只.复制大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤模型,6h组、24 h组大鼠分别在烟雾吸入后6h或24 h行安乐死,ELISA法检测大鼠肺组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)浓度,荧光定量PCR法行肺组织iNOS mRNA、γ-GCS mRNA定量.结果 6h组、24 h组大鼠肺组织匀浆中的MDA、NO、iNOS、γ-GCS浓度、iNOS mRNA和γ-GCS mRNA的相对表达量均高于对照组,且NO浓度、iNOSmRNA和γ-GCS mRNA的相对表达量24 h组高于6h组(P值均＜0.05);而6h组和24 h组GSH浓度均低于对照组,且24 h组低于6h组(P值均＜0.05).结论 在大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中,氧化应激反应加剧,同时抗氧化体系的激活不足以对抗氧化应激损伤,氧化/抗氧化体系失衡,导致肺损伤逐渐加重.     

胸膜间皮瘤11例临床分析

胸膜间皮瘤是原发于胸膜间皮组织或胸膜下间质组织的肿瘤。占全部癌瘤的0．02％～0.4％。本病早期诊断困难，易误诊为结核性胸膜炎、肺癌胸膜转移等。1993年3月至2003年3月我院共收治该病患者11例，均经组织学及细胞学检查证实。现分析如下。     

乳酸乳球菌食品级载体的构建及Mn-SOD基因的克隆和表达

目的 构建乳酸乳球菌（L．lactis）食品级载体，并利用其表达锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）。方法 PCR方法扩增L．lactis subsp．cremoris Wg2的隐性质粒pWV01的复制子、L．lactis MG1363的thyA基因及质粒pUC18的多克隆位点，PCR方法连接后构建食品级载体pSH91，CaCl2法转化大肠杆菌X51菌株。提取质粒pSH91电转化L．lactis MBP71（△thyA），检测转化子在改良SA培养基上的生长能力。PCR扩增L．lactis MG1363菌株的sodA基因（含自身启动子），克隆到质粒pSH91中，构建食品级表达载体pSH91：SOD，电转化L．lactisMBP71，黄嘌呤氧化酶法测定转化子L．lactis MBP71／pSH91：SOD的SOD酶活性。结果 经PCR扩增、连接、鉴定，食品级载体pSH91构建成功；转化L．lactisMBP71后，突变株回复了在改良SA培养基上生长能力，并且其生长速率和酸化能力与野生株相似。PCR扩增得到sodA基因并克隆入pSH91，构建了食品级表达载体pSH91：SOD。重组菌L．lactis MBP71／pSH91：SOD的SOD酶活性较出发菌株L．lactis MBP71高10余倍。结论 成功构建了食品级载体pSH91；利用该载体可在L．lactis中表达Mn-SOD等外源蛋白。     

2046例婴幼儿期心脏病的外科治疗

目的:探讨婴幼儿期心脏病的外科治疗结果和经验。方法:对我院1990年1月至2003年12月间2046例3周岁以下婴幼儿心脏外科手术进行总结。年龄为1天～36个月(平均16.6个月),其中12个月以下784例(38.3%)。体重为1.3～15.5(平均为8.2)kg,其中≤5kg者347例(17.0%)。1796例在体外循环(CPB)下手术,其中28例在CPB过程中未阻断主动脉。250例在非CPB下手术。结果:2046例中住院死亡121例,病死率5.9%。<12个月9.3%(73/784),其中<1个月新生儿26.7%(12/45)、1～3个月15.0%(16/107)、4～6个月13.3%(26/196)、7～12个月4.4%(19/436);13～24个月3.8%(24/640);25～36个月3.8%(24/622)。结论:随着婴幼儿期手术的大量开展,对具有手术适应证患儿的先天性心脏病外科治疗时机已可不受年龄和体重限制。加强对3个月以下小婴儿,特别是新生儿期危重复杂病例的研究,可望使整体手术住院病死率进一步下降。