cFLIP蛋白在大肠癌细胞中的表达及其对大肠癌细胞凋亡的影响

目的检测细胞型Fas相关死亡区域蛋白样β白细胞介素1转换酶抑制蛋白(cFLIP)在大肠癌细胞中的表达,探讨其在大肠癌细胞凋亡中的作用。方法应用Western蛋白印迹法检测3株人大肠癌细胞株中cFLIP蛋白的表达及大分子合成抑制剂放线菌素D(ActD,10μg/L)对SW620细胞cFLIP表达的影响,并运用四唑盐比色法(MTT法)检测cFLIP对SW620细胞凋亡的影响。结果SW1116及SW620细胞株cFLIP蛋白呈阳性表达,而LoVo细胞株呈阴性表达。ActD(10μg/L)可明显下调SW620细胞中cFLIP蛋白的表达水平,其作用1h以后,cFLIP表达水平开始下降(为0h的86%),作用24h后下降最明显(为0h的59%)。同时,抗Fas抗体(1mg/L)可最大程度地诱导28.8%的SW620细胞发生凋亡。结论cFLIP蛋白在大肠癌细胞中表达并可能在抑制大肠癌细胞凋亡中发挥重要作用。     

放线菌素D和VM-26对大鼠胶质瘤细胞增殖的影响的体内实验研究

目的研究放线菌素D（Actinomycin D，ACTD）和替尼泊苷（Teniposide，VM-26）对大鼠胶质瘤细胞增殖的体内治疗效果。方法将野生型的C6鼠胶质瘤细胞接种于鼠脑右侧尾状核（对照组10只，空载组10只），并对鼠脑内已形成的C6胶质瘤分别用ACTD及VM-26抗瘤缓释剂瘤区原位注射（治疗组各10只）。观察各组大鼠的一般情况、生存期、肿瘤病理学和磁共振成像（MRI）动态改变，采用PCNA计数、TUNEL法检测肿瘤细胞增殖活性及凋亡。结果对照组及空载组大鼠平均生存期为19．3天，ACTD组6只及VM-26组3只大鼠生存期明显延长，存活期超过200天；除因病理检查人为处死各2只外，ACTD组治疗后4周内死亡2只，VM-26组5只。MRI检查对照组大鼠脑内有明显瘤灶，治疗组大鼠脑内瘤灶治疗后明显减少或消失，均与病理学检查结果一致，而且治疗组大鼠C6细胞增殖活性降低，大量细胞凋亡，ACTD较VM-26显著。结论ACTD可望成为体内局部应用治疗胶质瘤的优选化疗药物。     

mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨

目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用RT-PCR检测肿瘤组织中CXC家族趋化因子I-TAC的表达。结果:与对照组相比,瘤苗细胞膜表面MHC-Ⅰ类分子的表达明显上调。瘤苗接种组小鼠NK细胞、CTL的细胞毒活性明显增强。病理分析发现,肿瘤组织中有较多的淋巴细胞浸润并检测到干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)的表达上调。结论:肿瘤细胞瘤苗Sp2/0-mIL21可增强小鼠的细胞免疫作用,其抗肿瘤机制可能与T细胞的增殖、活化,促进NK细胞的分化成熟,淋巴细胞向肿瘤组织浸润,以及增强NK细胞和CTL的细胞毒活性有关。     

放线菌素类似物的合成Ⅳ——2-氨基-4,6-二甲基吩(口恶)嗪酮-(3)-1,9-双多肽的合成

放线菌素是一类具有良好抗肿瘤作用而有较大毒性的抗菌素。作者等推测放线菌素的抗癌作用与其共有的色基结构有较为密切的关系,而环肽部分可能起一种载体作用。基于上述设想,我们曾合成了一系列有关化合物试验其抗肿瘤作用。其中发现放线菌素色基与叶酸的二肽部分结合的化合物具有明显的抗肿瘤作用。本文继续报道将放线菌素的环肽部分调换为简单的二肽、三肽或五肽的化合物;用丝氨酸代替苏氨酸,用甘氨酸和N-甲基甘氨酸代替其他氨基酸。共合成了七个化合物(2～8)。     

抗生素8302-1抗肿瘤作用的实验研究

抗生素8302-1是从灰色链丝菌-变种培养发酵液中,提取的放线菌素K的同类物。本文从体内和体外观察它的抗肿瘤作甩。结果显示体外对人红白血病K562和小鼠S180细胞有明显细胞毒作用,体内对小鼠S180腹水型有明显抗肿瘤作用,作用与药物浓度、剂量和作用时间有明显相关性。腹腔注射急性半数致死量(LD_(50))与8302-1的放线菌素K相仿。结果为进一步扩大临床前药理研究提供实验依据。     

热休克基因表达对过氧化氢所致肺泡巨噬细胞损伤的保护作用

经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析发现热休克预处理（４２℃，２ｈ）使肺泡巨噬细胞（ＰＡＭｓ）中热休克蛋白（ＨＳＰ）７０ｍＲＮＡ增多，ＨＳＰ７０合成增加，且获得抵抗Ｈ２Ｏ２损伤的能力。用放线菌酮和放线菌素Ｄ分别从蛋白合成及基因转录水平阻断热休克蛋白基因的表达，能取消热休克对Ｈ２Ｏ２所致ＰＡＭｓ损伤的保护效应。提示热休克系通过使热休克蛋白基因表达增强，ＨＳＰ７０合成增多，从而保护Ｈ２Ｏ２所致的ＰＡＭｓ损伤。     

新福菌素中放线菌素D的含量测定

目的　建立用 HPLC法测定新福菌素中放线菌素 D含量的方法 ,以排除放线菌素 S3及其他杂质对用抗生素微生物效价测定其含量的影响。 方法 　ODS色谱柱 :检测波长 2 40 nm;流动相 :乙腈 -水 (5 7∶ 43 ) ;外标法。结果 　回收率 99.93± 0 .3 0 % (n=9) ;线性范围 :9.8～ 3 4.3 μg·ml- 1 。 结论 　该法可达到目的要求 ,并且简便 ,准确 ,可靠     

放线菌素23—21对人低分化鼻咽癌细胞系裸小鼠移植瘤的抑制作用

采用人低分化鼻咽癌细胞系裸小鼠移植瘤模型,研究了放线菌素23-21的抗瘤作用。结果表明放线菌素23-21的50μg/kg(LD_(50) 1/10)抑瘤率为58％(p<0.05)。光电镜检查,给药组瘤细胞严重变性坏死,且引起核仁分离和微球体形成的超微结构变化。说明放线菌素23-21能抑制人低分化鼻咽癌细胞系裸小鼠移植瘤的生长,提示放线菌素23-21可能有抑制核仁rRNA合成的作用。     

放线菌素23-21对HeLa细胞的作用

采用本室培养的子宫颈癌细胞PPMI1640加15%小牛血清.研究放线菌素23-21的抗癌作用.通过多项生物学指标的体外实验,证明20μg/ml的放线菌素23-21处理6小时后对HeLa细胞的生长有显著的抑杀作用,其生长曲线、软琼脂生长能力、分裂指数、集落生成率均较未用药的对照降低.放射自显影试验结果,放线菌素23-21对DNA有抑制作用.经此药处理的HeLa细胞在免疫小鼠体内不能生成肿瘤.电镜显示放线菌素23-21对HeLa细胞的损伤改变主要在核膜内侧,失去其原有的层状排列,核仁缩小.