深海链霉菌Streptomyces sp. OUCT16-23中放线菌素类次级代谢产物的研究

目的 对一株深海链霉菌Streptomyces sp. OUCT16-23的次级代谢产物进行研究,发现具有新颖化学结构和良好生物活性的化合物。方法 采用V6培养基对Streptomyces sp. OUCT16-23进行发酵培养,经高效液相色谱（HPLC）纯化得到化合物1和2,并综合运用质谱（HR-ESI-MS）、核磁共振（NMR）等波谱学方法进行结构鉴定。结果 从深海链霉菌Streptomyces sp. OUCT16-23中分离得到2个放线菌素类化合物,actinomycin D（1）和actinomycin V（2）,并发现其对多重耐药菌Staphylococcus aureus CCARM 3090,Enterococcus faecalis CCARM 5172,Enterococcus faecium CCARM 5203和Klebsiella pneumoniae ATCC 13883具有显著的抑制活性。结论 从Streptomyces sp. OUCT16-23中分离鉴定了具有优良抗多重耐药菌活性的 2个放线菌素类化合物,为筛选放线菌素类抗生素高产菌株奠定了基础。     

放线菌素D联合甲氨蝶呤及甲氨蝶呤单药治疗低危妊娠滋养细胞肿瘤的前瞻性研究

目的 比较放线菌素D(ACT-D)联合甲氨蝶呤(MTⅨ)及MTX单药治疗低危型滋养细胞肿瘤(low risk gestational trophoblastic neoplasia,LR-GTN)的疗效及安全性.方法 采用前瞻性随机对照研究,选择2014年1月至2017年1月就诊于北京妇产医院的LR-GTN患者,分别给予ACT-D+MTX及MTX化疗,观察疗效、不良反应、疗程数等指标.结果 ACT-D+MTX联合化疗较MTX单药化疗有效率更高(96.0％ vs.83.7％,P=0.025);呕吐反应较MTX组严重(4.2％vs.0.9％,P=0.028),其他毒副反应差异无统计学意义,但其降低β-HCG速度更快,平均治疗疗程数更少(P=0.001),在FIGO≥5分的LR-GTN中耐药率低.结论 ACT-D+MTX联合化疗可作为FIGO≥5分LR-GTN患者治疗的优先选择.     

姜黄素对放线菌素D/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制研究

目的:观察中药单体姜黄素对ActD/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法确定实验药物的最佳浓度;Hoechst33258荧光染色法观察PC12细胞的凋亡;JC-1荧光分子探针检测线粒体膜电位;Real Time PCR检测凋亡基因Bcl-2/Bax的表达。结果:ActD/TNF-α协同作用可导致PC12细胞的活力降低(P<0.05);出现核固缩、核碎裂现象的细胞增多,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞线粒体膜电位下降;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达降低(P<0.05)。经姜黄素(5μmol/L)处理后,PC12细胞的活力增强(P<0.05);细胞核固缩、核碎裂现象减少,细胞凋亡率下降(P<0.05);细胞线粒体膜电位上升;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达增强(P<0.05)。结论:姜黄素可拮抗ActD/TNF-α引起的PC12细胞凋亡,可能与升高线粒体膜电位,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

小儿肾母细胞瘤化学治疗合并肝窦阻塞综合征4例临床分析

目的 总结小儿肾母细胞瘤化学治疗期间合并肝窦阻塞综合征(SOS)的临床特点,以提高对该病的认识.方法 对于2017年8月-2020年8月,在我院行化学治疗的4例肾母细胞瘤患儿合并SOS的临床表现、实验室检查、腹部超声检查、治疗及预后等情况进行回顾性分析.结果 4例患儿均出现腹胀、肝脏肿大、肝脏弹性值增大、脾脏大、腹水、...     

放线菌素类似物的合成Ⅳ——2-氨基-4,6-二甲基吩(口恶)嗪酮-(3)-1,9-双多肽的合成

放线菌素是一类具有良好抗肿瘤作用而有较大毒性的抗菌素。作者等推测放线菌素的抗癌作用与其共有的色基结构有较为密切的关系,而环肽部分可能起一种载体作用。基于上述设想,我们曾合成了一系列有关化合物试验其抗肿瘤作用。其中发现放线菌素色基与叶酸的二肽部分结合的化合物具有明显的抗肿瘤作用。本文继续报道将放线菌素的环肽部分调换为简单的二肽、三肽或五肽的化合物;用丝氨酸代替苏氨酸,用甘氨酸和N-甲基甘氨酸代替其他氨基酸。共合成了七个化合物(2～8)。     

人白细胞干扰素mRNA在大肠杆菌细胞中的翻译研究

现已公认,人白细胞系统是制备人干扰素的一个最为稳定的系统。因此,目前国内外大多数研究单位都采用这一系统来制备人干扰素。近年来,虽然对动物干扰素mRNA在异源细胞或无细胞系统中的翻译研究已有一些报道,但是,对人白细胞干扰素mRNA在大肠杆菌细胞中的翻译研究尚未见有人报道。从干扰素基因工程角度考虑,为寻求重组模板     

TNF抗妇科肿瘤细胞的实验研究

肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）是具有抗肿瘤特性的多功能物质，但不同种肿瘤细胞对ＴＮＦ的敏感性存在着明显差异。在体外试验中，发现卵巢癌细胞（ＡＯ）子宫颈癌细胞（Ｈｅｌａ）和绒癌细胞（ＪＡＲ）对ＴＮＦ都不甚敏感。若ＴＮＦ联合应用γ－干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－Ｔ，ＩＦＮ－γ）或放线菌素Ｄ，则对这３种细胞株的杀伤作用明显增强。提示它们与ＴＮＦ有协同杀伤妇科肿瘤细胞的作用，这对妇科肿瘤的治疗提供了新的线索。     

实时荧光定量分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期

目的:探讨和分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期.方法:建立包含β-actin基因片断的pMD-T载体的梯度稀释曲线,应用VIC标记的Taqman-MGB探针进行检测,用Opticon2.02软件分析结果.以不同浓度和不同时间的放线菌素D阻断SK-N-SH细胞转录,提取总RNA并予荧光定量RT-PCR检测β-actin mRNA.结果:SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期为4 h.与未处理组相比,4 h组β-actin的拷贝数差异有显著性(P＜0.05),12 h和24 h组β-actin拷贝数差异有极显著性(P＜0.01).不同浓度之间放线菌素D对β-actin拷贝数的影响差异不大(P＞0.05).结论:应用实时荧光定量RT-PCR,通过比较mRNA与总RNA的拷贝数,建立了一种准确方便地检测mRNA衰减的方法.同时β-actin不适合做放线菌素D处理实验中的内参照.