姜炭在虚寒性出血证大鼠体内的整合药代动力学与温经止血药效学的相关性研究

目的:探讨姜炭在虚寒性出血证大鼠体内的整合药代动力学与温经止血药效学之间的相关性。方法:18只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和姜炭组,每组6只。模型组和姜炭组大鼠诱导虚寒性出血证模型。造模同时,姜炭组大鼠灌胃给予0.007 g/kg姜炭乙酸乙酯提取液,空白组和模型组大鼠灌胃给予等体积蒸馏水,连续5 d。末次给药后分别于0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12 h采集血样。高效液相色谱(HPLC)法测定各组大鼠不同时间点血清中6-姜烯酮、6-姜烯酚、姜酮、二乙酰基-6-姜酚、6-姜酚、10-姜酚的含量。基于自定义权重系数法建立整合药代动力学模型,并计算整合药动学参数。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清血栓素B_2(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(lα))的含量,并计算药效强度。对整合血药浓度与药效强度进行相关性分析。结果:①建立整合药代动力学模型,计算药动学参数半衰期(t_(1/2))为(3.59±0.20)h,达峰时间(T_(max))为(3.00±0.00)h,最大浓度(C_(max))为(6.34±0.24)μg/ml,曲线下面积(AUC_(0-∞))为(44.44±1.41)μg·h/ml,平均滞留时间(MRT)为(5.85±0.18)h,表观清除率(CL/F)为(47.29±1.49)ml/(mg·h)。②与空白组相比,模型组大鼠各时间点血清TXB_2含量及TXB_2/6-keto-PGF_(lα)比值均显著降低(P0.05)。与模型组相比,姜炭组大鼠各时间点血清TXB_2含量及TXB_2/6-keto-PGF_(lα)比值均显著升高(P0.05),且药效强度较高。③多成分整合血药浓度与血清TXB_2和TXB_2/6-keto-PGF_(lα)的药效强度变化趋势基本一致,给药4 h后整合血药浓度与药效强度呈正相关。结论:姜炭药效组分在虚寒性出血证大鼠体内的整合药代动力学与温经止血的药效学具有一定的相关性。     

PGC-1ɑ在多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织的表达变化

  目的  探讨多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome, PCOS）大鼠模型及肥胖PCOS大鼠模型卵巢组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α（PGC-1α）的表达,以及PCOS 发生的可能机制。  方法  SD大鼠30只,随机分为对照组、PCOS组及肥胖PCOS组,PCOS两组大鼠每日一次予脱氢表雄酮〔DHEA,60 mg/（kg·d）〕溶于0.2 mL注射用大豆油中皮下注射,共21 d,制备PCOS模型,肥胖PCOS模型组大鼠在DHEA制模基础上加入高脂饮食,每组大鼠各10只。造模前（0 d）和造模后第22天称体质量,取腹主动脉血检测血清睾酮（testosterone,T）水平,取大鼠卵巢组织,HE染色观察组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blot检测PGC-1ɑ蛋白表达。  结果   造模前3组大鼠体质量差异无统计学意义,造模后第22天,大鼠增加的体质量以及大鼠血清 T 质量浓度,均为肥胖PCOS组>PCOS组>对照组,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。大鼠卵巢组织HE染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织镜下可见不同发育时期的卵泡和少量黄体,颗粒细胞排列多为4～6层;PCOS组及肥胖PCOS组大鼠卵巢组织中未成熟的小卵泡数量明显增加,颗粒细胞1～3层排列、较松散,部分卵泡闭锁,肥胖PCOS组大鼠卵巢闭锁卵泡直径增大,颗粒细胞层数减少,卵母细胞消失等现象更明显。免疫组化染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织PGC-1ɑ蛋白阳性表达主要分布于卵丘及颗粒细胞。从PGC-1ɑ蛋白在卵巢组织的表达平均灰度均值来看,PCOS组（0.53±0.06）和肥胖PCOS组（0.36±0.03）均低于对照组（0.75±0.03）,差异有统计学意义（P<0.05）,肥胖PCOS组PGC-1ɑ表达低于PCOS组（P<0.01）。Western blot检测结果与免疫组化染色结果一致。  结论  PGC-1ɑ表达降低与高脂环境下卵巢颗粒细胞损伤有关。PGC-1ɑ在卵巢卵泡的颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因。     

深海真菌Phomopsis tersa的次级代谢产物及其细胞毒活性研究

目的 研究深海真菌Phomopsis tersa FS441的次级代谢产物及其细胞毒活性。方法 采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相等多种色谱技术对菌株FS441的固体发酵产物进行分离纯化,并通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法对得到的单体化合物进行细胞毒活性测试。结果 从发酵物中分离纯化得到11个化合物,分别鉴定为：5α, 8α-表二氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（1）、麦角甾醇（2）、12-hydroxydehydrobotrydienol（3）、5,6-二羟基-2,3,6-三甲基环己-2-烯酮（4）、1,2-二羟基-3,4-脱氢蒽酮（5）、（1S,2S,3S,4R） -3-氯-4-（2-羟基丙吡啶-2-基）-1-甲基环己烷-1,2-二醇（6）、（-）-5-methylmellein（7）、酪醇（8）、胸腺嘧啶核苷（9）、（R）-（+）-甘油1-9 （Z）,12 （Z）-十八碳二烯酸酯（10）、亚油酸（11）。结论 化合物3～6为首次从Phomopsis属分离得到,化合物1和2对SF-268、MCF-7、HepG-2和A549 4种肿瘤细胞株具有弱的细胞毒活性。     

基于CHPS的全国药品不良反应监测哨点联盟的研究

目的：为政府部门、医院、制药企业等机构的相关人员对基于CHPS的全国药品不良反应监测哨点联盟的认识和了解提供参考。方法：采用基于文献调查和实践观察的规范研究方法,对比分析中美两国的药品不良反应监测哨点联盟的监测方法,并对我国药品不良反应监测哨点联盟建立的作用、意义及其运行情况进行阐述和分析。结果：CHPS在哨点联盟中可以及时、准确、完整地收集药品不良反应信息,促进哨点联盟成员高效率、低成本、高质量地完成药物上市后的研究。结论：哨点医院联盟的建立,为建设和完善我国药品上市后科学评价体系以及药品安全的智能监管体系,提供了新的实现平台。     

Nobiletin对慢性低灌注损伤后小鼠脑海马神经血管单元的影响

目的观察川陈皮素(NOB)对小鼠慢性脑低灌注(CCH)模型海马区神经血管单元各主要组分的保护作用。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组和NOB高、低剂量处理组各10只,模型组和NOB处理组进行双侧颈总动脉结扎,对照组不结扎。术后2 w进行旷场实验及Y迷宫检测学习记忆功能,Western印迹法测定小鼠海马区神经元生长相关蛋白(GAP)-43、突触素(SYN)、水通道蛋白(AQP)4表达,检测海马神经细胞可塑性及血脑屏障功能。结果与模型组相比,NOB处理组自由活动无显著差异,其中高剂量组探索能力显著增强,逃避潜伏期显著减短(P<0.05);NOB处理组均显著增加海马区GAP-43、SYN、AQP4及Claudin-5表达(P<0.05)。结论NOB可通过对海马的神经血管单元各组分的保护作用,改善CCH所致小鼠学习记忆功能受损。     

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗的依从性分析

目的研究慢性乙型肝炎患者的服药依从性并分析其影响因素。方法采用回顾性队列研究,选取2011年1月1日-2016年12月31日广州市第八人民医院门诊治疗的3732例慢性乙型肝炎患者,通过医院信息系统收集其人口学特征、就诊医生资料、取药信息、检查信息,依据药物持有率将患者分为良好依从性组(n=2346)与不良依从性组(n=1386),采用χ~2检验比较两组间的人口学特征和诊疗情况,影响因素分析采用两水平稳健Poisson方差成分模型。结果慢性乙型肝炎患者药物持有率为0. 789±0. 269,持有率在0. 8以上的良好依从性患者占比62. 86%。多因素分析结果显示,结算方式、治疗时间、医生职称及用药模式是良好依从性的影响因素(P值均0. 05)。在控制了其他协变量后,医保患者其良好依从性比自费患者高0. 119倍;良好依从性总体呈下降趋势,第2～5年的良好依从性分别是第1年的84. 7%、77. 3%、78. 5%、65. 9%;副主任医师负责的患者,其良好依从性比主治及住院医师负责的患者高0. 249倍;服用替比夫定的患者其良好依从性比服用恩替卡韦的患者高0. 120倍。结论慢性乙型肝炎患者的服药依从性与医保、治疗时间、主管医生的职称、用药模式密切相关,应鼓励未纳入医保的患者积极购买医保;建议加强慢性乙型肝炎患者的健康教育,促进患者遵指南进行慢性乙型肝炎治疗。     

鼻腔负压置换疗法联合布地奈德治疗儿童鼻窦炎临床疗效

目的探讨鼻腔负压置换疗法联合布地奈德治疗儿童鼻窦炎的临床疗效及对中耳功能的改善作用。方法选取广东省妇幼保健院自2017年2月至2018年2月收治的81例鼻窦炎患儿为研究对象。采用随机数字表法将其分为A组(n=39)与B组(n=42)。A组患儿采用布地奈德治疗,B组患儿采用鼻腔负压置换疗法联合布地奈德治疗。观察并比较两组患儿的临床疗效、鼻部症状评分、理化指标及不良反应发生率。结果 B组患儿的治疗总有效率为92.9%(39/42),显著高于A组的69.2%(27/39),差异有统计学意义(P<0.05)。B组患儿鼻塞、流涕、喷嚏、鼻痒及总分均显著低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿的理化指标均较治疗前显著改善,且B组的改善程度优于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组患儿不良反应发生率为17.9%(7/39),高于B组的7.1%(3/42),差异有统计学意义(P<0.05)。结论鼻腔负压置换疗法联合布地奈德治疗儿童鼻窦炎的临床疗效显著,可改善患儿的临床症状,缓解病情发展,保护中耳功能,安全可靠。     

雷公藤多苷肝毒性发生机制及减毒相关研究进展

雷公藤多苷是一种从植物雷公藤中提取出的有效组分,具有免疫抑制、抗炎等作用,临床上多用于治疗风湿性关节炎和肾病综合征等。在雷公藤多苷众多不良反应中,其肝脏相关不良反应尤为显著。针对雷公藤多苷的肝毒性作用,总结近十年对雷公藤多苷肝毒性作用及机制的研究进展,并对其毒性物质基础进行了分析,对相应的配伍减毒药物以及其保护机制进行了总结分析,为雷公藤多苷的临床合理使用及配伍减毒提供文献和理论依据。     

红色荧光蛋白变种mCherry的表达、纯化和应用探讨

目的 应用pET表达系统原核表达红色荧光蛋白变种mCherry,分析重组mCherry表达与荧光变化的关系,为其纯化及作为原核报告系统应用提供依据.方法 根据GenBank中收录的mCherry氨基酸序列合成其编码基因,构建pET-mCherry表达质粒,转化入大肠埃希菌BL21 (DE3)表达宿主.在不同诱导时间点,考察菌株荧光强度、mCherry表达量、培养上清液mCherry泄漏情况.诱导10h后提取重组mCherry,利用荧光强度估算提取收率,并通过凝胶电泳分析提取液的蛋白纯度.结果 成功构建pET-mCherry表达载体,并在BL21(DE3)中得到高效诱导表达.荧光检出滞后于mCherry的表达,随诱导时间延长重组mCherry不断泄漏至培养液中.初步提取的重组mCherry纯度达到95％以上.结论 应用pET表达系统可高效表达mCherry,过表达mCherry可泄漏至胞外,方便其纯化.mCherry作为原核报告系统应用时,合理的诱导时间可能是关键影响因素.