牙龈卟啉单胞菌膜泡对牙龈上皮细胞MMPs基因表达的影响

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌膜泡对牙龈上皮细胞基质金属蛋白酶(MMPs)基因表达的影响,揭示牙龈卟啉单胞菌在牙周炎中的致病作用.方法:以Real-time RT-PCR法检测牙龈卟啉单胞菌膜泡刺激下牙龈上皮细胞MMP-1和MMP-3的mRNA表达水平.结果:牙龈卟啉单胞菌膜泡显著地上调MMP-1和MMP-3 mRNA表达水平.结论:牙龈卟啉单胞菌诱导牙龈上皮细胞发生细胞炎症反应,可能是牙周炎发生、发展的重要因素.     

牙龈卟啉单胞菌Hgp44基因的克隆表达与纯化

目的 克隆表达牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)牙龈素中黏附素区域的Hgp44基因,并纯化目的蛋白.方法 通过聚合酶链反应(PCR)和基因重组技术,克隆得到PgATCC33277的Hgp4基因,插入到克隆载体pMD18-T中并测序鉴定.经过酶切后将目的基因片段与表达载体pET22b相连,构建出表达质粒pET22b-Hgp44.将重组质粒转化到感受态细胞BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹法进行分析.用固定化金属亲和层析法对重组蛋白进行分离纯化.结果 目的基因片段约为1100 bp,与预期大小相符,测序结果与GenBank中ATCC33277国际标准菌株的RgpA的等位基因序列U15282一致.IPTG诱导后的菌体经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳后形成一个以包涵体形式存在的44 000的融合蛋白.蛋白质印迹法检测证实其具有免疫原性.用镍离子金属螯合层析柱纯化出了目的蛋白,最后得到约3.5 mg/L的目的蛋白.结论 成功克隆表达了PgHgp44基因,并纯化出了目的蛋白.     

口腔微生物与口腔鳞状细胞癌关系的研究进展

口腔微生物群落在人类微生物群落和人类健康中发挥着重要作用,微生物与宿主的不平衡可导致口腔疾病和全身疾病。一些肿瘤已经被认为与细菌等微生物的存在相关,口腔肿瘤和微生物的关系也被逐渐认识。本文对口腔鳞状细胞癌与口腔微生物之间的关系进行综述,阐述口腔微生物导致口腔鳞状细胞癌发生的可能途径以及口腔鳞状细胞癌微环境对微生物的影响,为口腔微生物与肿瘤关系的进一步研究提供参考,以实现口腔鳞状细胞癌早期诊断,甚至辅助治疗的目的。     

牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉血管内皮细胞生物学活性的影响

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,Pg)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响,并探讨Pg对人脐静脉内皮细胞的毒性作用.方法:厌氧培养饴,原代培养HUVECs,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)观察HUVECs的增殖情况;用凋亡试剂盒检测HUVECs凋亡状态.结果:Pg可以明显地抑制HUVEC的增殖,并可以引起HUVEC的凋亡.结论:Pg可以通过损伤人脐静脉内皮细胞而加重局部的炎性反应,可能是牙周炎诱发心血管疾病的病理机制之一.     

牙龈卟啉单胞菌与Toll样受体的研究进展

牙龈卟啉单胞菌是公认的牙周致病菌，能分泌大量的毒力因子。Toll样受体是一种识别病原相关分子模式的跨膜蛋白，在机体的先天性免疫中具有重要的作用。本文就近年来牙龈卟啉单胞菌与Toll样受体的研究进展作一综述。     

牙龈卟啉单胞菌对脐静脉血管内皮细胞产生sICAM-1的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)对人类脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)产生可溶性细胞间粘附分子－1（soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的影响。方法：应用厌氧袋法培养P.gingivalis，并用其感染HUVECs，采和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定培养上清中sICAM-1的含量，结果：HUVECs基础表达少量的sICAM-1;P.gingivalis剂量依赖性增强HUVECs产生sICAM-1蛋白的水平；紫外线、超声波和65℃的热处理都不能抑制P.gingivalis的作用；sICAM-1蛋白水平在P.gingivalis刺激后的4h未见改变，增高的作用从刺激后的8h开始，在12h,16h和20h继续增加。结论：活的和灭活的P.gingivalis都剂量依赖性和时间依赖性地增强HUVECs产生sICAM-1,P.gingivalis可能同样诱导牙龈血管内皮细胞表达sICAM-1，升高的sICAM-1可能参与调节牙周病炎症反应和免疫反应过程。     

牙龈卟啉单胞菌FtsZ的C末端在FtsZ-FtsA相互作用中起着关键作用

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌FtsZ与FtsA之间相互作用的功能区域。方法：通过缺失诱变法构建了C末端缺失变异型的PgFtsZ(ZΔC01，ZΔC02，ZΔC03)，并表达和纯化了这些蛋白质，同时进一步通过免疫印迹法来鉴定这些C末端缺失变异型的PgFtsZ。然后，通过overlay assay法，以牛血清白蛋白为阴性对照，检测了这些C末端缺失变异型及野生型PgFtsZ和PgFtsA相互作用的特性。结果：野生型PgFtsZ与PgFtsA表现出极强的结合特性，然而去除C末端的73个氨基酸残基的ZΔC01，则表现出极弱的结合特性，或者当进一步去除C末端的128和177个氨基酸残基的ZΔC02和ZΔC03，同ZΔC01一样也表现出与PgFtsA极弱的结合特性。结论：PgFtsZ和PgFtsA相互作用的功能区域位于PgFtsZ的C末端。     

外周血嗜酸粒细胞联合鼻窦CT在慢性鼻窦炎伴鼻息肉诊断中的应用价值

目的 探讨外周血嗜酸粒细胞（EOS）百分比联合鼻窦CT评分在慢性鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）诊断中的应用价值。方法 选择2019年9月至2020年7月就诊于淮南市第一人民医院并接受手术的53例CRSwNP患者,根据术后病理组织EOS计数,分为嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉（ECRSwNP）组（n=22）与非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉（Non-ECRSwNP）组（n=31）。分析比较两组患者的外周血EOS百分比、鼻窦CT Lund-Mackay评分、血清总免疫球蛋白E （IgE）水平等指标的差异,探讨其在CRSwNP诊断中的应用价值。结果 两组患者年龄、性别、鼻窦CT上颌窦评分、合并变应性鼻炎（AR）、伴随哮喘情况进行比较,差异无统计学意义（P>0.05）;ECRSwNP组患者术前外周血EOS百分比、外周血EOS绝对值、血清总IgE、鼻窦CT Lund-Mackay评分总分、鼻窦CT筛窦评分均高于Non-ECRSwNP组,差异有统计学意义（P<0.05）。logistic回归分析显示,鼻窦CT筛窦评分（OR=3.470,95% CI：1.214~9.919）、鼻窦CT评分E/M比值（OR=3.468,95% CI：1.064~11.310）、外周血EOS百分比（OR=1.807,95% CI：1.248~2.616）是ECRSwNP预测诊断的影响因素（P<0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线显示,联合预测诊断的价值高于单一因素,其中外周血EOS百分比联合筛窦评分预测价值最高。结论 外周血EOS百分比联合鼻窦CT筛窦评分对ECRSwNP有较好的预测诊断价值。     

未确诊的巨大异位嗜铬细胞瘤术中突发儿茶酚胺危象处理1例报告

1 病例资料 患者男,51岁,因"间断性腹痛2年余,加重伴血压升高5 d"于2019年7月27日入院.患者5 d前活动后出现腹痛,持续约5 min,伴大汗、心悸,自测血压为185/100 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),无头晕、视物模糊、晕厥等症状,自诉口服硝苯地平控释片后血压得到控制,休息后症状缓解.既往高血压病史4年,血压最高175/110 mmHg,不规律监测,自诉间断口服降压药物控制血压,外院肾脏超声检查未提示异常.入院后行腹部增强CT(图 1)示胰体尾部囊实性占位病变,大小约9.0 cm×8.3 cm×8.0 cm,囊腺癌可能.腹部彩色多普勒超声(图2)检查示左侧腹区胰体尾部一囊性为主的混合回声包块,边界清,大小约7.9 cm× 8.9 cm×9.3 cm.癌胚抗原 9.02 ng/mL(>5 ng/mL).肾脏、肾上腺区超声及影像学检查未见明显异常,血、尿儿茶酚胺等各项实验室检验结果均未见明显异常,入院后上述症状未发作.术前诊断:腹腔肿物待查?     

Meis1和Cyclin D3在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的 探讨粒细胞嗜酸性白血病整合位点1（Meis1）和细胞周期蛋白D3（Cyclin D3）在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化的方法检测12例正常子宫内膜及45例子宫内膜样腺癌患者组织中的Meis1和Cyclin D3的蛋白阳性表达情况,分析它们之间的相关性。结果与正常子宫内膜相比,Meis1在子宫内膜样腺癌腺细胞中阳性表达率高,差异有统计学意义（P<0.05）;Cyclin D3在子宫内膜样腺癌组中的表达高于正常子宫内膜组（P<0.05）（77.8%>33.3%）;高、中分化腺癌组CyclinD3的阳性表达率高于低分化组及正常子宫内膜组,差异有统计学意义（P<0.05）;Cyclin D3与Meis1的阳性表达率之间呈正相关（2=0.296,P<0.05）;Meis1和Cyclin D3阳性表达的子宫内膜癌患者生存时间短（P<0.05）。结论在子宫内膜样腺癌中,Meis1的表达阳性率升高,与Cyclin D3的表达存在相关。