牙龈卟啉单胞菌与Toll样受体的研究进展

牙龈卟啉单胞菌是公认的牙周致病菌，能分泌大量的毒力因子。Toll样受体是一种识别病原相关分子模式的跨膜蛋白，在机体的先天性免疫中具有重要的作用。本文就近年来牙龈卟啉单胞菌与Toll样受体的研究进展作一综述。     

牙龈卟啉单胞菌对脐静脉血管内皮细胞产生sICAM-1的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)对人类脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)产生可溶性细胞间粘附分子－1（soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的影响。方法：应用厌氧袋法培养P.gingivalis，并用其感染HUVECs，采和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定培养上清中sICAM-1的含量，结果：HUVECs基础表达少量的sICAM-1;P.gingivalis剂量依赖性增强HUVECs产生sICAM-1蛋白的水平；紫外线、超声波和65℃的热处理都不能抑制P.gingivalis的作用；sICAM-1蛋白水平在P.gingivalis刺激后的4h未见改变，增高的作用从刺激后的8h开始，在12h,16h和20h继续增加。结论：活的和灭活的P.gingivalis都剂量依赖性和时间依赖性地增强HUVECs产生sICAM-1,P.gingivalis可能同样诱导牙龈血管内皮细胞表达sICAM-1，升高的sICAM-1可能参与调节牙周病炎症反应和免疫反应过程。     

牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉血管内皮细胞生物学活性的影响

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,Pg)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响,并探讨Pg对人脐静脉内皮细胞的毒性作用.方法:厌氧培养饴,原代培养HUVECs,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)观察HUVECs的增殖情况;用凋亡试剂盒检测HUVECs凋亡状态.结果:Pg可以明显地抑制HUVEC的增殖,并可以引起HUVEC的凋亡.结论:Pg可以通过损伤人脐静脉内皮细胞而加重局部的炎性反应,可能是牙周炎诱发心血管疾病的病理机制之一.     

F.nucleatum和P.gingivalis对种植体周龈沟液sICAM-1表达的影响

目的 :研究种植体周围龈沟中F .nucleatum (Fn)和P .gingivalis(Pg)对其龈沟液 (PISF)可溶性细胞间黏附分子 -1(sICAM -1)表达的影响。方法 :用PCR法检测种植体周龈沟中的细菌标本 ,根据Fn和Pg检出情况将 3 2名患者的 5 1枚钛种植体分为 3组 ,考察mPLI和PD ,用 periopaper滤纸条收集PISF ,用ELISA方法检测sICAM -1。结果 :检出Pg和 (或 )Fn组与未检出Pg和Fn组之间的PD值有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ,单独检出Fn组的sICAM -1与未检出和同时检出Pg及Fn组之间有统计学差异 (P <0 .0 1)。 结论 :细菌是调节PISF中sICAM -1表达水平的重要因素 ,Fn可能是上升调节的作用 ,Pg是一种下降调节的作用     

牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶K-caspase样亚基的表达与青春期龈炎的临床相关性

目的检测并比较青春期龈炎的牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，PS）临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中牙龈蛋白酶K（gingipain K，Kgp）-caspase样亚基的表达强度及酶活性，揭示Kgp与青春期龈炎之间可能存在的致病关系。方法检测并记录36例14～17岁的青春期龈炎患者的牙龈指数、龈沟出血指数及探诊深度，取龈下菌斑进行Pg的分离培养，16SrRNA PCR法鉴定。将获得的10个Pg临床分离株复苏，在对数生长期末提取分泌蛋白和菌体蛋白，测定其酶活性，并用Kgp-caspaae样亚基的单克隆抗体进行Western blot检测。Kgp的表达强度及酶活性与各牙周指数之间的相关关系用等级相关系数。结果青春期龈炎的Pg临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中，Kgp-caspase样亚基的表达强度及酶活性与各牙周指数的大小呈正相关关系，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论青春期龈炎龈下菌斑中Pg的Kgp十分复杂，存在表现为低相对分子质量形式的caapase样活性分子，这些细胞内功能蛋白分子将影响Pg和宿主间的相互作用；Kgp对青春期龈炎有一定的致病作用。     

牙龈卟啉单胞菌FtsZ第322位的甘氨酸在细胞分裂中的作用

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌FtsZ（PgFtsZ）第322位的甘氨酸在细菌细胞分裂过程中的作用。方法：通过site—directed mutagenesis技术,采用megaprimer方法,使用三个引物进行两轮的PCR,构建Pg—FtsZ第322位甘氨酸的点变异型质粒pYW9（ZG322P,携带PgFtsZ第322位甘氨酸由脯氨酸取代的点变异型基因）和pYW10（ZG322H,携带PgFtsZ第322位甘氨酸由组氨酸取代的点变异型基因）,然后将质粒pYW9、pYW10和pEZ1（携带野生型PgFtsZ的基因）分别转化到Escherichia coli BL21（DE3）pLysS中进行表达、分离和纯化目的蛋白质。同时将载体pET3a也转化到E．coli BL21（DE3）pLysS中作为阴性对照。进一步通过免疫印迹法鉴定构建的点变异型ZG322P和ZG322H。E．coli的形态通过显微镜观察。结果：野生型PgFtsZ的过表达导致E．coli细胞分裂的明显抑制,含质粒pEZl的E．coli和仅含有载体作为对照的E．coli相比延长大约20倍。然而点变异型ZG322P和ZG322H的过表达并未引起E．coli细胞分裂的抑制,即含质粒pYW9的E．coli和含质粒pYW10的E．coli表现出正常的形态,与仅含有载体作为对照的E．coli细胞的形态相似。免疫印迹分析表明野生型PgFtsZ、点变异型ZG322P、ZG322H在相同位置出现阳性带,并且表达水平相似。结论：牙龈卟啉单胞菌FtsZ第322位的甘氨酸在细菌细胞分裂中起着重要的作用。     

口腔内致病菌——嗜CO_2噬纤维菌的超微结构及表面抗原血清型的研究

本文报告对口腔内新分离的嗜CO_2噬纤维菌(C.S)和黄褐CO_2噬纤维菌(C.O)透射电镜观察和表面抗原研究结果。结果提示:C.s和C.o均能在生活状态下以产生囊泡的方式向外界释放其内毒素,但有无囊泡不能作为区分二者的依据。通过交叉凝集试验和免疫荧光法研究证实:C.e和C.o的表面抗原结构不同,但二者存在部分共同表面抗原成部分,用免疫学方法能对二者作出快速鉴定。     

血管淋巴样增生伴嗜酸粒细胞增多1例报告

血管淋巴样增生伴嗜酸粒细胞增多 (ａｎｇｉｏｌｙｍｐｈｏｉｄｈｙ ｐｅｒｐｌａｓｉａｗｉｔｈｅｏｓｉｎｐｈｉｌｉａ ,ＡＬＨＥ)又称假性或非典型化脓性肉芽肿 ,是一种比较少见的疾病 ,临床上容易误诊。国内皮肤科陆续有所报道 ,但口腔科报道此病极少。现将我科收治的 1例报告如下。患者 ,女性 ,31岁 ,湘藉 ,因右颞顶部肿物 2年于 2 0 0 0年4月 2 3日入院 ,患者曾经诊断为右颞部皮肤斑点状血管瘤于1998年 3月在当地医院冷冻治疗 ,术后半年于原患处出现小手指头大小红色隆起肿物 ,渐长大 ,瘙痒感 ,无痛 ,破损后易出血 ,并在邻近部位相继…     

腺样囊性癌中雪旺氏细胞标记物S100蛋白表达的超微结构观察

目的:从超微结构水平了解雪旺氏细胞标记物 S100蛋白在腺样囊性癌中的表达,进而分析腺样囊性癌中哪种细胞成份发生了雪旺氏细胞分化。方法:采用免疫电镜方法研究 S100蛋白,肌动蛋白(muscle actin,MA)在腺样囊性癌中的表达。结果:S100阳性细胞与 MA 阳性细胞具有相同的分布和超微结构。这种超微结构符合肌上皮细胞的超微结构特点。结论:腺样囊性癌中突变的肌上皮细胞可能发生了雪旺氏细胞分化。     

牙龈卟啉单胞菌与龈沟液中白细胞介素8关系的研究

目的:探讨龈沟液(GCF)中白细胞介素8(IL -8)在慢性牙周炎病程中的变化、IL- 8与牙周临床检测指标以及同龈下菌斑中细菌含量的相关关系。方法: 5名非牙周炎患者的10颗牙周健康牙和30名慢性牙周炎(CP)患者的70颗牙(其中10颗为健康牙, 60颗为牙周炎患牙)纳入本研究。采集观察牙的GCF样本、龈下菌斑样本,同时记录所有牙的牙龈指数(GI)、牙周袋探诊深度(PPD)、临床附着丧失水平(CAL)。用ELISA法检测样本中IL -8的水平,用厌氧菌培养技术培养菌斑标本,用PCR法检测菌斑中的牙龈卟啉单胞菌(Pg),结果:慢性牙周炎组的GCF中IL -8的总量高于临床牙周健康组,而IL -8的质量浓度在各组中无差异。GCF中IL- 8浓度与GI、PPD、CAL无相关关系,而IL -8的总量与GI、PPD、CAL呈正相关关系。龈下菌斑中Pg的检出量与GCF中IL- 8的含量间未发现有相关关系。结论:慢性牙周炎患者龈沟液中IL- -8量增加与龈沟液分泌增加有关而与牙龈卟啉单胞菌检出CFU无关。