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目的:构建pEGFP—N1/CpG-HBcAg(ISS)真核表达载体,探讨乙肝病毒核心抗原(HBcAg)在树突状细胞(DC)中的表达,为研制乙肝治疗性疫苗奠定基础。方法:根据HBcAg基因序列,设计合成两对引物,在引物中引入针对人敏感的CpG基序和不合CpG的片段,用PCR方法从慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA中扩增出HBcAg基因片段,将扩增产物与pEGFP—N1连接,构建重组体pEGFP—N1/CpG-HBcAg,进行酶切、PCR及测序鉴定;分离人外周血单个核细胞(PBMC),体外诱导分化为DC,通过脂质体将重组质粒pEGFP—N1/CpG-HBcAg和空载体分别转染DC,Western blot检测HBcAg在DC的表达。结果:HBcAg基因体外扩增产物大小为530bp。所构建的pEGFP-N1/CpG—HBcAg经双酶切及PCR鉴定,与预期片段的大小相符。测序结果与GenBank中收录的HBcAg全长序列一致,表明pEGFP—NI/CpG-HBcAg真核表达体构建正确;PBMC体外成功刺激分化为DC,HBcAg可在DC中表达。结论:成功构建了真核重组表达载体pEGFP—N1/CpG—HBcAg,且可在DC中表达,为CpG的功能研究和乙型肝炎治疗性疫苗的研制奠定基础。 相似文献
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女性高血压与口服避孕药及ACE基因关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价口服避孕药(OC)的使用和血管紧张素转换酶基因(ACE)多态性联合作用对妇女高血压的发病风险.方法 采用病例对照研究的方法,选择665例女性高血压病例和665名女性高血压对照,按照年龄(±3岁)和地区进行匹配.采用限制性片断长度多态性-多聚酶链式反应(RFLP-PCR)方法进行基因型检测.结果 (1)ACE基因I/D位点和A2350G位点基因型在病例组和对照组间分布差异无统计学意义;(2)与携带ACE基因ID+DD基因型且未服用OC的妇女比较,携带ACE基因ID+DD基因型的妇女服用OC≥15年明显增高患高血压的风险0.66倍(OR=1.66,95%(7/=1.11~2.48);与携带ACE基因AG+GG基因型且未服用OC的妇女比较,携带ACE基因AG+GG基因型的妇女服用OC≥15年也明显增高患高血压的风险0.66倍(OR=1.66,95%CI=1.09~2.54).结论 携带ACE基因D等位基因或者G等位基因的妇女服用OC≥15年可以明显增加息高血压的风险. 相似文献
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Ithas been reported thatthe incidence of urinarycomplications after renal transplantation was3— 3 0% ,the mortality associated with the complicationswasabove 1 0 % .Theupperurinary tractobstructionis one of the mostcommon complications.The causeof oliguria afterrenal transplantation involves compli-cated mechanisms and itisdifficultto diagnose upperurinary tract obstruction and identify the underlyingdisease.In the present study,a group of patientswith renal transplantation were investigated … 相似文献
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本文报告1例以甲状腺急剧增大伴压迫症状为表现的原发性甲状腺淋巴瘤。患者女, 58岁, 因"颈部进行性肿大3个月, 伴吞咽困难、胸闷气促3 d"于2021年2月7日入住上海交通大学医学院附属第六人民医院。患者自2020年10月体检发现甲状腺肿大以来颈部肿块增长迅速, 并于就诊前出现进食困难、吞咽费力等颈部压迫症状。入院后行甲状腺粗针穿刺活检, 诊断为原发性甲状腺淋巴瘤。给予糖皮质激素(地塞米松静脉滴注, 10 mg/次, 1次/d), 3 d后患者甲状腺肿块明显缩小, 颈部压迫症状明显改善。随访2个月, 患者按期化疗, 甲状腺肿大较前缓解。 相似文献
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目的探讨输尿管镜碎石术后感染性休克继发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)的治疗方法。方法总结分析15例输尿管镜碎石术后感染性休克继发ALI/ARDS患者的临床表现和治疗方法。患者在输尿管镜碎石术后2~78 h出现ALI/ARDS表现,予以抗感染、机械通气、糖皮质激素、连续性肾脏替代治疗(CRRT)、营养支持等综合治疗。结果 15例患者中,即使是合适的术前泌尿系统抗感染的治疗,术后安置输尿管内双J管的扩张引流,也并不能完全防止输尿管镜碎石术后出现全身炎症反应,引发ALI/ARDS。菌血症和全身炎症反应综合征(SIRS)持续时间影响着住院时间和预后。本组15例患者诊断感染性休克至出现ALI/ARDS时间25.13 h;CRRT替代治疗8例(53.3%);平均在科时间10.8 d;机械通气时间平均72 h;治愈13例,自动出院2例。结论对输尿管镜碎石术后感染性休克继发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)的患者,早期发现诊断、积极合理的抗生素应用、有效的机械通气支持、精确的容量管理、糖皮质激素的补充及营养支持,同时在上述综合治疗的基础上增加CRRT协助治疗可提高治疗成功率。 相似文献
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目的 观察内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在实验性视网膜脱离兔中的表达.方法 选取18只(36眼)中国大白兔,对照组2只(4眼);实验组16只(32眼).实验组大白兔在间接检眼镜直视下,用50 nm玻璃微管在兔眼下方6:00钟位赤道部视网膜造孔并注射0.5 mL生理盐水于视网膜下间隙.实验组各取2只4眼兔于术后0.5 h、1 h、3 h、6 h、24 h和3 d、7 d、14 d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学和原位杂交的方法检测ET-1在视网膜的表达,并于抽取玻璃体降眼压以及取眼球时分别抽出玻璃体用放射免疫测定法检测ET-1浓度.结果 实验组兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围3:00-9:00钟位.从模型建立后3 h,经放射免疫测定开始可检测出玻璃体中存在ET-1,浓度逐渐上升,并随后下降,而免疫组织化学的结果提示,ET-1在模型建立后24 h开始表达.原位杂交检测结果也证实,建模后玻璃体液中检测出ET-1,ET-1的mRNA主要表达在视网膜神经层各层细胞和RPE的细胞核,胞浆只有较弱的着色,造模24 h后,胞浆的着色才明显加深,并且在建模后3 d时着色明显,7 d、14 d减弱.结论 ET-1在视网膜脱离中是一种早期表达的细胞因子,有峰值,也有低谷,除与视网膜脱离的损伤有关外,其在视网膜下液含量的波动与外屏障的破坏和细胞因子间的相互作用有关. 相似文献
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