自杀基因治疗中的旁观者效应及机制

自杀基因治疗肿瘤的作用很大程度上取决于旁观效应，目前为止，旁观效应机制尚未有明确结论，本仅从缝隙连接，细胞凋亡，机体免疫，介质扩散及肿瘤缺血坏死等五个方面就旁观效应机制作一综述。     

自杀基因治疗肿瘤研究进展

自杀基因治疗肿瘤近年来在国内外研究较多并已取得了明显的疗效。本文就近年来有关的进展 ,从自杀基因治疗作用体系机制及其旁观者效应、增强自杀基因转导效率方面的载体应用和肿瘤特异性靶向性转导、自杀基因与免疫系统反应的关系、自杀基因与靶向性放射性核素治疗、免疫因子及自杀基因 3种方法的联合应用等进行综述     

重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk的构建及在细胞内的热诱导表达

目的:构建用于靶向基因治疗的重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk(pHT),体外转染SMMC-7721肝癌细胞,观察热诱导基因表达情况. 方法:设计1对引物,以pHSV-106质粒为模板进行PCR扩增,将扩增产物纯化所得目的基因片段与pD3SX载体连接,转化大肠杆菌E.coli DH5α,克隆PCR法筛选菌落,测序鉴定后大量抽提质粒.磁性转染法将pHT导入SMMC-7721,加热处理后,用RT-PCR法检测tk基因的整合. 结果:获得重组的hsv-tk基因条带. 结论:成功构建了pHT质粒,可用于进行靶向性基因治疗研究.     

PEI-氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的实验观察

目的:评价氧化铁磁性纳米颗粒(MNPs)作为体外基因载体的可行性及外加磁场对于其转染效率的影响.方法:以FeCl3水溶液作原料,采用部分还原沉淀法制备纳米磁性颗粒,并用聚乙烯亚胺(PEI)对其进行表面修饰.利用电镜、X-射线衍射、琼脂糖凝胶电泳等手段对MNPs的形貌、粒度分布、物相组成、DNA结合能力等进行表征.应用荧光素酶报告基因系统,检测MNPs-PEI将外源基因转染至不同细胞系的转染特性以及外加磁场对基因载体效率的影响.结果:MNPs-PEI可将外源基因转染至多个细胞系并高效表达.不同细胞系的转染效率和时间各不相同.外加磁场可使转染效率提高4～5倍.结论:PEI修饰的磁性纳米颗粒是一种可用于体外转染的新型非病毒基因载体,外加磁场可提高其转染效率.     

无锡市新生儿甲状腺功能低下的筛查分析

目的 探讨无锡市新生儿先天性甲状腺功能低下的发病率及治疗观察.方法 2000年1月～2005年2月在无锡地区（包括江阴和宜兴）出生的新生儿为筛查对象于出生后72小时充分哺乳后采取足跟血,应用DELFIA法检测标本中TSH,并用电化学发光法检测阳性患儿血清中TSH、T3、T4水平确诊,确诊后,即给予口服甲状腺素片治疗,并有定期随访.结果 88 077例新生儿中检出CH患者27例,发病率为1/3 262.结论 早期诊断和治疗可避免患儿发生智能落后,减少残疾儿的产生,对提高人口素质有十分重要的意义.     

胸苷激酶基因对乳腺癌细胞的杀伤性研究

目的　探讨逆转录病毒 (RV )载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV -TK )基因转染小鼠乳腺癌细胞 ,联合抗病毒药物丙氧鸟苷 (GCV )对小鼠乳腺癌细胞系MA 782 /5S -810 2体外杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法　采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA3 17、G 418筛选抗性克隆 ,采用PCR方法检测HSV -TK基因整合情况。取滴度最高的病毒上清液感染小鼠乳腺癌细胞MA 782 /5S -810 2 ,经G 418筛选后 ,得到带有HSV -TK基因的MA 782 /5S -810 2 /TK细胞 ;将MA 782 /5S -810 2和MA 782 /5S -810 2 /TK细胞按不同比例混合培养后 ,给予 10 μg/mlGCV ,4天后采用MTT法计算细胞成活率 (SR ) ,观察旁观者效应。结果　GINaTK载体成功转入包装细胞PA 3 17,病毒滴度为 4.0× 10 4cfu/ml。用病毒上清液感染MA 782 /5S -810 2 ,成功得到了表达HSV -TK基因的MA 782 /5S -810 2 /TK细胞。混合培养结果显示 ,当MA782 /5S -810 2 /TK细胞数占混合细胞数 10 %时 ,低浓度 (10 μg/ml)的GCV就可将 5 0 %左右的肿瘤细胞杀死。 结论　逆转录病毒可介导HSV -TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782 /5S -810 2并获稳定表达 ,RV -HSV -TK /GCV系统杀伤癌细胞存在旁观者效应。     

阴道微生物对宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的影响研究

阴道微生物群在女性下生殖道健康中发挥着重要作用,健康女性阴道内存在不同类型和数量的微生物,这些微生物与宿主之间相互依赖、相互制约,共同维持阴道微生态系统的动态平衡。阴道菌群失调与高危型人乳头瘤病毒感染存在相关关系。本文综述了育龄期妇女正常阴道微生物的组成、宫颈高危型人乳头瘤病毒感染患者阴道微生物变化以及益生菌辅助制剂治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的现状,以期为临床宫颈人乳头瘤病毒感染的防治提供新思路。     

低离心力对正常及不液化精液精子形态分析结果的影响分析*

摘要:目的探讨低离心 力对正常精液与不液化精液精子形态分析结果的影响。方法收集2021年1月至12月在解放军联勤保障部队第904医院生殖中心进行精液常规检查与精子形态学检查的169 例患者作为研究对象,其中126 例为精液常规检查正常患者,43例为精液不液化患者。比较126例正常精液采用直接涂片与两种不同低离心力下离心处理所得精子形态学分析结果差异;比较43例不液化精液采用促液化后直接涂片与离心处理所得精子形态学结果差异。结果正常精液 标本340xg离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.39+0.50)%]较直接涂片法[(11.08+0.41)%]显著降低,所得精子中段异常率[(62.05+1.44)%]较直接涂片法[(57.17+0.82)%]显著增加;151xg离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.41+0.57)%]亦较直接涂片法显著降低,所得精子中段异常率[(60.95+1.17)%]亦较直接涂片法显著增加。对于不液化精液标本,340xg离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.61+0.60)%]与促液化后直接涂片法[(11.10+0.73)%]差异无统计学意义,所得精子中段异常率[(60.21+1.51)%]与促液化后直接涂片法[ (57.36+ 1.34)%]差异无统计学意义。结论两种低离心力均对精子形态学造成影响。离心力对不液化精液无显著影响。检查精子形态学的临床应用中应参考男性精液性质决定是否离心以及离心力大小。     

叶酸偶联人血清清蛋白(folate-HSA)的制备

目的:制备叶酸偶联人血清清蛋白(folate-HSA).方法:利用叶酸活性酯与清蛋白纳米粒表面的氨基反应,制得叶酸偶联清蛋白纳米粒.采用葡聚糖凝胶柱色谱法及紫外分光光度法验证偶联是否成功,并测定叶酸偶联的程度.结果:通过葡聚糖凝胶柱色谱法使叶酸偶联清蛋白纳米粒与未反应的叶酸活性酯完全分离,采用2,4,6-三硝基苯磺酸显色法测得HSA的表面活性氨基的含量为168 μg/mg HSA,则偶联于HSA表面的叶酸密度为27.26%.结论:叶酸偶联人血清清蛋白制备成功,为下一步实验奠定了基础.