FISH在产前诊断应用中应注意的相关事项和几点建议

FISH技术的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列,因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位。FISH现被广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。     

放射性3,3’-二碘甲腺氨酸（（131）I-T2）的合成

目的：获得放射性3,3’-二碘甲腺氨酸（131I-T2）,为下一步硫酸化得到3,3’-二碘甲腺氨酸硫酸化物（131I-T2S）作准备。方法：采用氯胺T法以131I标记3-单碘甲腺氨酸（3-T1）,凝胶柱层析法及纸层析法分离、纯化。测定标记率、放射化学纯度和标记物稳定性,并鉴定标记物的免疫活性。结果：131I标记率为65.1%±4.5%（n=5）,标记物的放化纯度为96.5%±1.1%（n=5）。经-20℃储存10d后放化纯度仍〉90%。结论：氯胺T法可获得较高碘标记率及较稳定的标记物。     

131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨^131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）对人乳腺癌细胞生长的影响及其相关机制。方法 采用过氧化氢标记法制备^131I-17-AAG。细胞杀伤实验分为5组：二甲基亚砜（DMSO）对照（A）组，Na^131I370kBq（B）组，17-AAG2．5mg／L（C）组，^131I-17-AAG370kBq（D）组，^131I-17-AAG370kBq＋17-AAG2．5mg／L（E）组。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各种药物对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用，流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化，RT—PCR检测药物处理前后MCF-7细胞中Akt2基因的mRNA表达情况。结果 ^131I-17-AAG的标记率为83％，放化纯为96．6％，比活度为1．48×10^5MBq／μmol。各组药物对细胞的杀伤呈时间效应，随着时间的延长，细胞的抑制率都呈明显上升趋势，尤以E组趋势明显。A～E组药物作用48h后，通过亚G1峰检测MCF-7细胞凋亡率分别为（1．54±0．13）％，（5．72±1．05）％，（12．97±1．44）％，（20．65±1．36）％，（35．39±4．15）％，各组细胞凋亡率差异有统计学意义（P均〈0．05）。C组，D组及E组Akt2基因的mRNA表达均比A组降低，其中E组降低尤为明显。结论 ^131I-17AAG能够抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡，且能有效抑制Akt2基因的mRNA表达，和17-AAG联合应用能够增强肿瘤细胞对放疗的敏感性。     

早产儿出生时血清25-羟维生素D水平与支气管肺发育不良的相关性

目的分析早产儿出生时血清25-羟维生素D[25(OH)D]水平与支气管肺发育不良(BPD)的关系。方法选取2014年1月至2016年12月入住NICU、出生胎龄34周的早产儿,按是否患BPD分为BPD组(41例)和对照组(219例),分析25(OH)D水平与BPD的关系。结果 BPD组血清25(OH)D水平显著低于对照组(37±17 nmol/L vs 47±20 nmol/L;P0.05);维生素D缺乏率显著高于对照组(90.2%vs 74.0%,P0.05)。血清25(OH)D水平与BPD发生率呈负相关(r=-0.201,P=0.001)。结论早产儿维生素D缺乏可能与BPD发病有关,但需多因素分析进一步证实。     

ADAM12在产前诊断中的的研究进展

ADAM12是新发现的细胞膜结合糖蛋白家族的一员，它在妊娠期妇女血清中水平显著增高，在胎儿染色体缺陷时降低，它的发现为临床筛查治疗疾病提供了新的靶点。     

无锡地区62141例育龄期妇女TORCH检测结果与季节性变化的相关性分析

目的 通过化学发光免疫分析法检测无锡地区育龄期妇女血清TORCH抗体,并对结果按季节进行统计分析,了解无锡地区育龄妇女TORCH感染情况及其流行特点,为本地区育龄期妇女保健提供一定的参考依据.方法 选择产前检查的62 141例育龄期妇女为研究对象,对TORCH病毒原体弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)进行检测.结果 TORCH四种病原体TOX、RV、CMV以及HSV的免疫球蛋白M(IgM)抗体阳性率依次为1.25‰(77/61 452)、2.66‰(163/61 381)、0.37‰(23/61 387)、129.41‰(7 872/60 829),anti-HSV IgM抗体阳性率远高于其他三种IgM抗体阳性率;anti-CMV IgM、anti-RV IgM、anti-TOX IgM、anti-HSV IgM抗体阳性率总体呈现逐年上升的趋势;统计结果显示,秋、冬季为巨细胞病毒感染高发期(anti-CMV IgM阳性检出率分别为39％、35％),而TOX、RV、HSV的感染率并无明显的季节性变化.结论 育龄期妇女和医疗人员需提高对TORCH感染的季节性认识,同时有针对性的按季节性对孕妇进行TORCH检测,可及时了解孕妇TORCH感染情况,尽早采取方法和措施,对人口的优生优育具有重要意义.     

血浆溶血磷脂酸测定在卵巢癌患者诊断中的价值

目的：探讨血浆溶血磷脂酸（LPA）水平的测定在卵巢癌患者诊断中的价值。方法：用生物化学方法测定卵巢癌患者30例、卵巢良性肿瘤患者32例及36例健康妇女的血浆LPA水平，同时用CLIA法测定卵巢癌患者血清CA125含量，并作对比分析。结果：卵巢癌患者血浆LPA水平明显高于卵巢良性肿瘤患者及健康妇女（P〈0．05），后两者血浆LPA水平无统计学意义；血浆LPA和血清CA125对卵巢癌诊断的敏感性和特异性分别为87．1％、74．2％和90．3％、71．4％。结论：血浆LPA水平在卵巢癌患者中升高，与血清CA125相比更具有临床价值，有望成为新的检测卵巢癌的标志物。     

无锡地区新生儿先天性肾上腺皮质增生症的发病情况探讨

了解无锡市新生儿先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的发病情况。方法采用时间分辨荧光免疫法(TRFIA)检测新生儿足跟血17α-OHP浓度,30nmol/m l为阳性切值,经复检阳性者,行确诊试验判断。结果1992年5月至2006年2月共筛查61284例新生儿确诊4例肾上腺皮质增生症(CAH)患者,发病率为1/15321(4/61284)。结论开展新生儿17α-OHP检测以便早期诊治新生儿CAH。     

线粒体DNA D-Loop区突变与肿瘤

线粒体DNA(mitochondrialDNA, mtDNA)是独立于细胞核DNA外的遗传物质.过去十多年的研究表明线粒体功能异常以及线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变和人类肿瘤形成与发展之间密切相关.本文将目前对线粒体DNA D-Loop区突变与肿瘤之间的研究加以简单的介绍,以利于人们了解线粒体,便于日后对其进行更深层次的研究.     

HSV-TK/GCV自杀基因系统联合γ射线放射治疗宫颈癌的实验研究

目的 探讨HSV-TK／GCV自杀基因系统协同^60Coγ射线放射治疗对人宫颈癌细胞系的体内外联合杀伤作用，以及HSV-TK／GCV对放射治疗的增敏作用。方法 分别以HSV-TK／GCV、^60Coγ射线放射治疗及两者联合治疗人宫颈癌HeLa细胞系和裸鼠宫颈癌移植瘤模型，比较治疗效果；利用增敏效应比值（E／O）、克隆形成实验评价体内外HSV-TK／GCV对放射敏感性的影响。结果 在体外实验中，自杀基因对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制率为45．8％，单纯放疗的抑制率为42．4％，而基因治疗与放疗联用的抑制率为87．5％，与前两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；且联合治疗组对射线敏感性较单独治疗组明显增加，克隆形成率明显下降（P〈0．05）；在体内实验中，单纯基因治疗与放疗对HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑瘤率分别为39．5％和35．8％，而基因治疗放疗联用的抑瘤率达到87．9％，与前两者比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；增敏效应比值（E／O）为3．2（〉1．4），提示HSV-TK／GCV对放疗具有增敏作用。结论 HSV-TK／GCV自杀基因系统具有放射增敏作用，二者联合治疗可作为宫颈癌综合治疗的有效补充方法。