产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药谱的连续监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药谱的变化,为临床经验用药提供依据。方法采用法国Bio-Merieux公司的VITEK-60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,K-B单片琼脂扩散法做药敏试验,WHONET5.0分析软件对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的药敏试验进行统计。结果检出912株大肠埃希菌,其中产ESBLs 386株,占42.3%;体外试验显示亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢西丁、头孢他啶对产ESBLs大肠埃希菌有较高的抗菌活性;产ESBLs大肠埃希菌的耐药率均明显高于非产ESBLs菌。结论我院大肠埃希菌产ESBLs株主要是头孢菌素型(CTX-M型),ESBLs尚未有效控制,仍然处于较高水平;3年间产ESBLs大肠埃希菌耐药谱变化不大,亚胺培南、美罗培南对产ESBLs株未发现耐药,阿米卡星及哌拉西林/他唑巴坦具有良好的治疗效果。     

内科监护病房的感染分析

目的了解本院内科监护病房的感染和细菌耐药情况.方法按<全国临床检验操作规程>进行分离培养,细菌用法国梅里埃公司VITEK-60自动细菌鉴定仪鉴定菌种,药敏试验采用K-B法.真菌用梅里埃公司API 20C AUX鉴定条和ATB FUNGUS药敏条进行鉴定和药敏试验.结果革兰阴性杆菌感染占36.3%,革兰阳性球菌占27.4%,真菌占36.3%.革兰阴性杆菌对不同的抗生素敏感性不一,革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁敏感性高,真菌对5-氟胞嘧啶、两性毒素B等抗真菌药物敏感.结论多数细菌呈多重耐药性,完善消毒制度和合理使用抗生素对降低感染率和控制耐药菌株的传播具有重要意义.     

832株念珠菌的分布及其药物敏感性结果分析

目的 对本院临床送检的标本所分离的念珠菌的分布及药敏结果进行分析,为临床用药提供依据。方法 血培养用Bact/Alert血培养瓶抽血后在仪器上培养,阳性后转种沙保罗培养基,其他标本直接接种沙保罗培养基,分离纯菌用API 20C AUX进行鉴定,ATB FUNGUS进行药敏。其中氟康唑用Etest试验。结果 共分离出832株念珠菌,白色念珠菌最为多见,其次为热带念珠菌和光滑念珠菌。药敏结果：总敏感率由高到低是两性霉素B97.7%、制霉菌素95.4% 、5-氟胞嘧啶92.2%、酮康唑68.5%、益康唑62.5%、咪康唑53.6%;氟康唑共测33株全敏感。结论 念珠菌感染中以白色念珠菌、热带念珠菌最常见,其药敏结果显示两性霉素B、制霉菌素、5-氟胞嘧啶、氟康唑敏感率高。     

神经外科重症监护病房鲍氏不动杆菌感染与耐药性分析

目的分析神经外科重症监护病房(NICU)鲍氏不动杆菌(ABA)感染与耐药情况,为临床预防医院感染以及合理应用抗菌药物提供依据。方法收集2006年1月-2009年12月NICU收治的患者痰标本分离出37株ABA,采用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动细菌分析系统及其配套的细菌鉴定卡和药敏卡进行检测。结果 ABA所致的感染率0.99%,其对抗菌药物表现为多药耐药性;敏感率最高的抗菌药物是阿米卡星,为75.68%,其次为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、妥布霉素、美罗培南,分别为56.76%、45.95%、37.84%、32.43%,而耐药率最高的是头孢替坦,为97.30%,其次为氨曲南、头孢噻肟、庆大霉素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑,分别为91.89%、89.19%、86.49%、83.78%。结论通过健全医院感染控制制度、培训医护人员、加强临床实验室监控的改进,对遏制ABA耐药率的增高和提高治疗效果有重要意义。     

侵袭性肺部真菌感染的实验室检测方法

近年来,侵袭性肺部真菌感染的发病率逐年上升,并逐渐成为导致患者死亡的重要原因之一。由于侵袭性肺部真菌感染临床表现缺乏特异性,早期诊断困难,且病情易被基础病掩盖,造成误诊﹑漏诊而延误治疗。精准的实验室诊断是实现精准临床诊疗的前提和基础。该文对目前侵袭性肺部真菌感染常用实验室检测方法,包括标本直接镜检、组织病理学检查、真菌培养、抗原检测、核酸检测等的诊断性能及注意事项进行介绍与评价,从而提高临床医师及实验室人员对侵袭性肺部真菌感染实验室检测方法的认识。     

北京和广州地区四家医院不动杆菌碳青霉烯酶基因型研究

目的调查北京、广州地区不动杆菌属对碳青霉烯类的耐药性，确定其耐药株产生的碳青霉烯酶的基因型。方法用WHONET-5软件分析1999—2002年北京、广州两地不动杆菌的耐药性；从北京、广州4家医院收集对亚胺培南耐药且具有多重耐药性的不动杆菌39株；等电聚焦电泳测定酶的等电点；碱裂解法提取质粒；脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定耐药株的亲缘关系；对TEM、SHV型基因及碳青霉烯酶基因OXA-、IMP-、VIM-进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)及序列分析。结果近4年北京协和医院分离的鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性在1．8％～8．5％之间。多重耐药(即3种以上的抗生素耐药)的菌株从1995年的5％升至2002年的67％，最常见的多重耐药模式为同时对头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林／三唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦及环丙沙星耐药的菌株(占44％)。广州中山医科大学附属第一医院多重耐药株从1998年的20％升至2002年的57％，同时对上述4～5个药耐药的达35％。39株亚胺培南耐药株均不含质粒，接合试验证实亚胺培南的耐药基因不能转移。所有测定菌产多种B内酰胺酶：TEM-1酶、高产AmpC酶、SHV型酶及pI为6．7，6．0的2个酶。PCR及序列分析证实35株菌产生0xA-23型碳青霉烯酶(pI为6．7)，有3株携带PER-1型酶。PFGE发现在4家医院均有耐药株的克隆传播，并且常见于医院呼吸机相关肺炎及外科术后感染。结论北京、广州丽地对亚胺培南耐药的不动杆菌，绝大多数产生OXA-23型碳青霉烯酶，亚胺培南耐药株的增加主要由耐药克隆株播散所致。     

肝移植术后感染乙酸钙不动杆菌碳青酶烯酶的研究

目的 研究医院肝移植术后感染乙酸钙不动杆菌产生碳青酶烯酶的基因型.方法 用WHONET 5.4软件分析自肝移植患者分离的不动杆菌属的耐药性;收集对亚胺培南耐药且具有多药耐药性的乙酸钙不动杆菌8株;等电聚焦电泳测定酶的等电点;脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定耐药株的亲缘关系;对TEM、SHV型基因及碳青酶烯酶基因OXA、IMP、VIM进行聚合酶链反应(PCR)及序列分析.结果 肝移植术后感染的耐亚胺培南乙酸钙不动杆菌对多种药物耐药性高,PCR及序列分析证实8株菌均产生OXA-23型碳青酶烯酶(pI=6.7);PFGE发现器官移植病区有耐药株的克隆传播.结论 医院器官移植病区存在产OXA-23型碳青酶烯酶乙酸钙不动杆菌的克隆株播散流行,加强细菌的耐药性监测,对控制感染有重要意义.     

耐万古霉素肠球菌的基因型和同源性分析

目的了解中山大学附属第一医院临床分离的耐万古霉素肠球菌(VRE)的基因型和同源性,为本地区VRE的感染治疗和预防控制提依据。方法收集临床分离的VRE,E-Test法确定万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的最低抑菌浓度(MIC),多重PCR法检测万古霉素耐药基因,脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测菌株的同源性。结果共收集到8株VRE菌株,均为屎肠球菌,分离自腹腔引流液。8株VRE均对万古霉素高度耐药(MIC≥256mg/L),对替考拉宁中介或耐药,对利奈唑胺、替加环素和四环素敏感,耐药基因型均为VanA;PFGE分型分为A、B两个克隆,其中7株为A克隆,1株为B克隆。结论中山大学附属第一医院VRE菌株均携带VanA基因,且多重耐药,在院内有小范围的流行,但非单一克隆流行。     

中国14家教学医院院内菌血症与肺炎和腹腔感染病原菌的抗生素耐药监测

目的 监测2006年10月-2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的院内获得病原菌的分布和体外药物敏感性.方法 收集来自于院内菌血症、肺炎和腹腔感染患者标本的病原菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定29种抗菌药物对菌株的MICs,数据输入WHONET5.4软件进行耐药性分析.结果 本研究共收集到2 660株病原菌.引起菌血症(BSI)的病原菌中分离率位于前3位的分别为大肠埃希菌(30.0%)、肺炎克雷伯菌(12.O%)和金黄色葡萄球菌(11.2%);引起院内获得性肺炎(HAP)的病原菌中分离率位于前3位的分别为铜绿假单胞菌(23.4%)、鲍曼不动杆菌(17.4%)和肺炎克雷伯菌(13.8%);引起腹腔感染(IAI)的病原菌中分离率位于前3位的分别为大肠埃希菌(38.8%)、肺炎克雷伯菌(10.2%)和铜绿假单胞菌(9.2%).对于大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于80%的药物包括替加环素(100%)、美罗培南(99.3%～100%)、亚胺培南(98.5%～100%)和哌拉西林/三唑巴坦(83.8%～95.1%),氟喹诺酮类药物的敏感性为12.4%～44.9%.对于肠杆菌属、柠檬酸杆菌属、沙雷菌属,替加环素的敏感性为99.2%-100%,亚胺培南和美罗培南的敏感性为96.6%-100%.另外,敏感性较高的抗菌药物还有阿米卡星(82.8%～96.6%)、哌拉西林/三唑巴坦(73.4%～93.1%)、头孢吡肟(69.O%～82.8%)和头孢哌酮/舒巴坦(72.6%～75.9%),氟喹诺酮类药物的敏感性为55.2%-82.8%.多苇耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的发生率分别为18.7%和54.O%.多黏菌素B对铜绿假单胞菌的敏感性最高(93.5%),其次为阿米卡星和哌拉西林/三唑巴坦(均为75.1%).多黏菌素B对鲍曼不动杆菌的敏感性最高(96.2%),其次为替加环素(92.1%)、亚胺培南(59.4%)、米诺环素(59.4%)和美罗培南(56.5%).金黄色葡萄球菌中MRSA的发生率为64.5%,凝同酶阴性葡萄球菌巾MRSCoN的发生率为82.8%.所有葡萄球菌对替加环素、万古霉素和替考拉宁的均敏感.本次监测中发现9株万古霉素耐药的肠球菌(VRE),VRE发生率为4.3%.结论 替加环素、碳青霉烯类、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星和头孢吡肟对医院分离的肠杆菌科菌保持较高的抗菌活性;多黏菌素B对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌均体现出高抗菌活性,鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率达92.1%;替加环素、万古霉素和替考拉宁对院内革兰阳性球菌保持高的抗菌活性.     

广州地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的研究

目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla_(CTX-M-15)分别位于65 000 bp和90 000 bp的可接合质粒上,65 000 bp质粒除bla_(CTX-M-15)阳性外,未检到bla_(TEM-1)、qnrB、bla_(DHA-1)、bla_(OXA-1),aac(6′)-I6-cr等耐药基因.1株接合菌90 000 bp质粒还存在bla_(OXA-1)和bla_(TEM-1)耐药基因,其余7个90 000 bp质粒所携耐药基因同65 000 bp质粒.所有bla_(CTX-M-15)都位于ISEcp1-like插入序列下游,ISEep1-like末端与blaCTX-M-15间距均为48 bp.结论 广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型主要流行为CTX-M-14型.以CTX-M-15为代表能水解头孢他啶的CTX-M型ESBLs在本地区检出增多值得关注.