中国人FⅧ基因内XbaI多态性研究与甲型血友病基因诊断

本文研究了中国人FⅧ基因22内含子中限制酶XbaⅠ的多态性。在83个中国人的79条无遗传关系的X染色体中,该多态性位点出现的频率为0.56,提供的多态性信息量为0.49。利用RFLP法,分析了17个甲型血友病家系,其中14个家系可以用此RFLPs进行基因诊断。认为核RFLPs作为FⅧ基因内的多态性遗传标志,在甲型血友病基因携带者检出和胎儿出生前诊断中具有重要的应用价值。     

血管紧张素原基因M235T多态性与肥厚型心肌病及高血压性心肌肥厚的关系

血管紧张素原 (AGT)基因的多态性与心血管疾病的关系日益引起重视。在中国人群中 ,高血压性心肌肥厚 (HCH)和肥厚型心肌病 (HCM)在AGT基因多态性方面有何异同的研究尚少 ,本研究旨在探讨AGT基因M2 35T多态性与HCM及HCH的关系。1.资料与方法 :( 1)研究对象 :HCM组 ,40例 ,汉族 ,男2 2例、女 18例 ,平均年龄 ( 5 3 4± 19 8)岁 ,诊断符合临床和超声心动图标准 ,除外家族性遗传及高血压病、瓣膜病、先天心脏病等所致心肌肥厚 ;HCH组 ,5 0例 ,汉族 ,男 2 8例、女2 2例 ,平均年龄 ( 6 0 8± 14 5 )岁 ,高血压诊断标准符合 1978年WH…     

荧光指纹图谱法筛查基因突变技术及其临床应用

我们采用一种以ＤＮＡ自动测序仪为基础的基因突变筛查新技术———荧光指纹图谱法（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ，ＦＦ），筛查乙型血友病基因突变。该技术可使ＤＮＡ自动测序仪的基因突变检出效率提高几倍至十几倍，已应用于乙型血友病等的基因诊断，...     

在基层医院治疗流行性出血热的体会

笔者在基层医院工作多年，曾救治过100余例EHF患者，其中有成功的经验，也有失败的教训，现结合实例谈几点体会，供同道参考。［例12张某某，男，54岁，因发热、头痛、腰痛5天，于1995年10月12日入院。既往无高血压及脑血管方面的病史。体温38．SC，脉搏gO次／分，血压11／8千帕，急性病容，酒醉貌，皮肤无明显出血点，浅表淋巴结无肿大。眼结膜充血水肿，双侧瞳孔等大等圆，对光反射灵敏。软腰可见钟点状出血点。心肺无异常。腹软，肝脾未触及，肾区叩痛。神经系统生理反射存在，病理反射来引出。尿蛋白（仰）、白细胞（＋）。血红蛋白1…     

应用MOEA技术进行β－地中海贫血基因诊断

β－地中海贫血是一种多见于我国南方的遗传性疾病。本文应用突变寡核苷酸延伸扩增ＰＣＲ（ＭｕｔａｎｔＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＥｘｔｅｎｓｉｏｎＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＭＯＥＡ）技术，检测了３个家系的１２条染色体的β－珠蛋白基因突变类型，共检测到３种基因突变类型：ｅｏｄｏｎ４１－４２（－ＴＣＴＴ）移码突变，ＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）突变和ｃｏｄｏｎ１７（Ａ→Ｔ）突变（各占３３．３％）。     

人α-珠蛋白基因的次级克隆及高比活基因探针的制备

利用人完整α_1-珠蛋白基因的1.5kbDNA片段,与载体M13mp7,M13mp8DNA重组,得到两株含人α_1-珠蛋白基因的克隆7~#及2~(’#),并为其RF-DNA的限制性内切酶图谱分析所证实。以2_(’#)SS-DNA为模板,以EcoRI和PstI双酶切质粒pUR222直接变性作引物,以α-32P-dATP作放射性标记,合成载体M13正链的放射性互补链;而插入的α_1-珠蛋白基因部分仍呈单链。α_1-珠蛋白基因单链特异性的探针其比活度通常可达5～7×10~8dpm/μg基因片段。     

生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变基因

碱基突变可直接影响人类基因的功能,导致各种遗传病的发生。本文作者建立了用生物素标记寡核苷酸探针探测扩增的病理性突变基因的方法。标记时寡核苷酸的用量仅需6ng,在末端转移酶的催化下,把生物素标记的脱氧核苷酸连接到寡核苷酸的3’羟基末端。经分离纯化后,进行斑点杂交和Southern印迹杂交,最后用ABC系统(即:Avidin-Biotin-碱性磷酸酶复合物)酶标显示杂交信号。用两种寡核苷酸探针(β_(41-42)~Αβ_(41-42)~Τ等探针)分别与克隆化扩增的正常和突变的β-珠蛋白基因DNA杂交,结果表明:~(32)P探针     

特异的DNA扩增

在一个简单的试管反应中,可以用PCR(聚合酶链反应)合成上百万拷贝数的某DNA片段。耐热的DNA聚合酶极大地促进了这一技术。近年来,临床上诊断遗传病和传染病的时候,越来越需要对某特殊的DNA顺序进行分析,只有PCR技术使这类DNA的快速、简便的分析成为可能。因为PCR能通过一个简单的试管内反应,使某特异的DNA顺序片段合成数百万个拷贝。 PCR扩增DNA的特异性是决定于两个人工合成的寡核苷酸引物。这两段引物的DNA顺序与待扩增DNA片段两端的DNA顺序分别相同,因此可同与之互补的一条链杂交。PCR是反复进行如下的循环过程:模     

单链DNA噬菌体在基因研究中的应用

DNA重组技术的发展日新月异。作为一类新的DNA克隆载体,丝状单链DNA噬菌体迅速发展起来。由于其具有显著超过其它双链DNA载体的某些优点,故其在基因研究中的应用前景越来越广阔。单链DNA噬菌体的生物学成熟的单链DNA噬菌体M_(13)、fd和fl,长约1微米,呈细丝状。其DNA为单链环状,6.4kb,含8个基因.M_(13)和fd的全序列已测定,分别含6407个和6408个核苷酸,二者有97％的同源性;fl序列尚未全知,但据信,它甚至比fd更接近M_(13)。它们对大肠杆菌(E.coli)的感染是雄专一性的。感染后,在寄主细胞中成为环状双链DNA,即复制型(RF)DNA。每个细胞中有50～100个拷贝,并不断排出成熟的噬菌体颗粒到细胞外面去。这些噬菌