家兔脊髓缺血损伤后谷氨酸受体活性变化

目的：探讨谷氨酸（Ｇｌｕ）及其受体（ＧｌｕＲ）在脊髓缺血过程中的量变特征在继发损伤中的作用及２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）的治疗作用。方法：选用体重２～２５ｋｇ的日本大耳白家兔７０只,用腰动脉分支阻断法建立脊髓缺血模型,用放射配基结合分析法检测脊髓缺血损伤后０５～２４ｈ期间及在缺血６０ｍｉｎ时用ＡＰＶ处理后脊髓神经细胞膜的ＧｌｕＲ活性（Ｂｍａｘ,ＫＤ）。结果：缺血６０ｍｉｎ后ＧｌｕＲ的最大结合量降低,亲和力升高,开始再灌流后最大结合量迅速升高,至２ｈ到达高峰,之后迅速下降,至再灌流４ｈ降至最低,此后缓慢回升,而亲和力在再灌流０５ｈ时继续升高,然后下降,再灌流２ｈ降至最低,此后趋势与最大结合量变化相反。ＡＰＶ在再流灌早期使受体活性增高,再灌流４ｈ后无显著性差异。结论：Ｇｌｕ通过其受体中介参与了脊髓缺血再灌流损伤,但在缺血再灌流过程中ＧｌｕＲ活性的变化可能具有不同的作用效应,同时也说明脊髓继发性损伤机制单以Ｇｌｕ兴奋性损伤是解释不了的。     

家兔脊髓缺血再灌流皮层体感诱发电位的变化及其意义

观察缺血再灌流损伤脊髓感觉传导功能的变化规律。方法２４只家兔随机化方法分为对照组,缺血３０ｍｉｎ组,缺血６０ｍｉｎ组和缺血９０ｍｉｎ组,以选择性腰动脉阻断法模拟脊髓缺血再灌流损伤,记录各组在伤前,缺血及再灌注对皮层体感诱发电位的变化。结论脊髓缺血时间越长,再灌流损伤越得 ,脊髓的感觉传导功能损害越明显。     

川芎嗪对过氧化氢诱导星形胶质细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对过氧化氢(H202)所致大鼠星形胶质细胞凋亡的保护作用.方法 利用SD新生鼠(24～48h)分离、培养星形胶质细胞,按随机数字表法分为空白对照组(以正常培养液培养)、模型组(100 μmol/L的H202作用24 h)、TMP剂量组(25、50、100 μmol/L TMP预处理48 h后,加入H202作用24 h).采用CCK-8检测各组细胞存活率;GFAP染色观察细胞形态;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活力;Real-time PCR 检测各组细胞中PI3K、AKT、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 的表达;Western blot检测各组细胞PI3K、AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达.结果 与空白对照组比较,模型组细胞存活率明显降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),LDH含量增加(P＜0.05),SOD活性降低(P＜0.05),PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA 表达下调,Bax、Caspase-3 mRNA 表达上调(P＜0.05),PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax、Caspase-3蛋白表达明显升高(P＜0.05);与模型组比较,TMP预处理后细胞存活率明显升高(P＜0.05),其中50 μmol/L组的细胞存活率最高(P＜0.05),细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),LDH含量降低(P＜0.05),SOD活性升高(P＜0.05),PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达上调,Bax、Caspase-3 mRNA 表达下调(P＜0.05),PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax、Caspase-3蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 TMP对H202所致的大鼠星形胶质细胞氧化应激损伤具有保护作用,可改善损伤后细胞形态并抑制凋亡,该作用可能与PI3K、p-AKT蛋白活化有关.     

新生大鼠脊髓损伤后再生相关基因文库构建及EST筛选

目的：分析新生大鼠损伤后再生时运动皮层神经元基因表达变化以探讨相关的再生机制。方法：新生大鼠脊髓双侧半横断后即刻单侧胚胎脊髓移植，术后3天用抑制性消减杂交技术筛选大鼠双侧运动皮层神经元差异表达基因，构建差减cDNA文库，通过蓝白斑实验和cDNA斑点杂交验证差异表达基因真阳性克隆，测序分析。结果：发现25个全新的EST片段，在GenBank中登陆并获得注册。结论：新生大鼠皮层神经元轴突中断后的再生过程中有基因表达变化，变化的基因可能与神经元再生有关。     

脊髓损伤早期手术减压对功能恢复的影响

将120例Wistar大鼠随机分为4组,A、B、C、D组分别为大鼠脊髓挫伤即刻、挫伤后2、8、24 h手术减压组.术后1、3、7、14、28 d进行行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况.结果 :行为学检查和感觉诱发电位、运动诱发电位潜峰时的恢复从优到劣依次为A、B、C、D组.提示大鼠脊髓损伤后早期手术减压能促进大鼠后肢功能恢复.     

Ski在大鼠活化星形胶质细胞中表达的变化

目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞中Ski和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达情况,利用间接免疫荧光法检测Ski蛋白在星形胶质细胞中的表达定位。结果:GFAP蛋白在星形胶质细胞中固有表达,LPS活化和划痕损伤后表达均上调。Ski在正常星形胶质细胞中呈低表达状态,1 mg/L LPS活化星形胶质细胞后,Ski表达开始增加,4 d时表达量最高(P0.05),6 d时开始下降,但仍高于未活化组;细胞划痕损伤后Ski蛋白表达情况与上述情况高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形胶质细胞中表达主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d时在胞质中出现明确的Ski表达。结论:Ski蛋白表达于星形胶质细胞,并在活化星形胶质细胞中表达上调。由此,我们推测Ski蛋白可能调控星形胶质细胞的活化、增殖等过程。     

中枢神经损伤后早期轴突再生的障碍:髓磷脂抑制轴突再生的信号转导机制

背景:成体哺乳动物中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)损伤后早期轴突再生的主要障碍是髓磷脂抑制分子的存在。髓磷脂抑制轴突再生的信号转导机制是什么呢?目的:在现有研究的基础上进一步阐明髓磷脂抑制轴突再生的信号转导机制,为有效阻断相关分子的抑制效应促进轴突再生提供有益的启示。资料选择:选择有关髓磷脂、Nogo-A受体(Nogo66Receptor,NgR)、RhoA及轴突再生的文献,不排除其是否为随机、盲法等论证推荐的文章。资料来源:进行全面的检索,包括电子检索、手工检索及个人通信等。资料综合:对检索到的研究文章中的相关信息进行概括综述。结论:髓磷脂抑制轴突再生的信号转导机制可能是通过NgR及其协同受体p75,激活RhoA,最终介导对轴突再生的抑制作用。干预该信号通路,可望促进轴突再生,加速中枢神经系统损伤后的修复过程。     

大鼠坐骨神经离断后髓鞘碱性蛋白的变化研究

目的探讨髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)在坐骨神经离断后的变化以及外源性给予神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)治疗后的影响。方法Wistar大鼠行单侧坐骨神经切断,断端采用硅胶管桥接,管内注入NGF,通过酶联免疫吸附法(ELISA)和电镜扫描法观察坐骨神经组织髓鞘的变化,实验分组为3组,Ⅰ组为:生理盐水对照组,Ⅱ组为:硅胶管内给NGF组,Ⅲ组为:硅胶管内给NGF+每日肌肉注射NGF(500ng/kg连续2周)组。结果(1)ELISA检测显示:治疗组之间比较无统计意义,治疗组与对照组比较有显著性差异(P<0.01),治疗组24h、2周MBP含量较伤前显著升高(P<0.01),1个月后基本恢复到伤前水平;(2)电镜扫描观察到:对照组术后24h,2周严重脱髓鞘,轴浆严重变性,治疗组术后1个月后脱髓鞘和轴浆变性有所缓解。结论NGF治疗后可促进再生神经的生长和轴突髓鞘化,从而降低MBP的含量。     

创伤后应激障碍与神经内分泌关系研究进展

创伤后应激障碍（PTSD）系指受到强烈的精神创伤后,发生的一系列心理、生理应激反应综合征,该综合征在战争和严重灾害受累人群中发生率较高。近年来,有研究结果表明,PTSD患者出现的记忆减退、幻觉重现、噩梦和失眠等临床症状,以及临床上采用磁共振成像检测到的海马萎缩现象,都与神经内分泌密切相关。现就PTSD与神经内分泌关系研究进展综述如下。     

神经干细胞与原浆型星形胶质细胞联合移植对大鼠脊髓半切空洞损伤的修复作用

目的 观察神经干细胞(NSC)与原浆型星形胶质细胞(PAS)联合移植对大鼠损伤脊髓功能和形态的修复作用. 方法 60只Wistar大鼠,制成脊髓L1～L2左侧半切空洞损伤模型,采用随机数字表法分为损伤组(A组)、损伤后移植PAS组(B组)、移植NSC组(C组)、NSC和PAS按2:1比例联合移植组(D组),每组15只.伤后1,4,8周进行伤侧下肢BBB评分、体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检测;8周损伤部位脊髓组织进行HE、Nissl、Holmes银染,观察移植物在损伤脊髓中的形态学变化. 结果 (1)行为学观察:4周时,各组间开始出现差异;8周时,组间差异更为明显,尤其D组大鼠最明显,已能行走,行走时频繁足底离地,并能与前后肢体协调运动,B、C组功能有一定改善,可支重性足底踏步,前后肢共济协调,但仍和D组存在明显差距,A组后肢关节活动幅度增加,足底仍不能着地支重.(2)电生理检查:1周时,各组MEP峰潜时(以N1波计算)和SEP峰潜时(以P1波计算)开始出现差异,至4,8周,B、C、D组峰潜时明显缩短,但D组缩短最为显著(P<0.01).(3)病理观察:8周时,A组缺损严重,新生组织较少,B、C、D组缺损组织基本填补完全,损伤空洞闭合,未见明显的炎症反应,B组损伤处可见大量形态不同、大小不等的新生胶质细胞,胶质纤维排列紊乱,病理染色未见神经元;C组损伤处新生组织较多,以神经胶质细胞为主,少量神经元分布,且可见再生纤维连接;D组损伤处新生组织填补缺损完全,胶质纤维中可见形态典型的新生神经元,数量明显多于C组. 结论 NSC和PAS联合移植到损伤脊髓组织后,能够存活、分化并从结构和功能上较好地修复组织缺损区域.