UPLC同时测定银黄颗粒中4种黄酮类成分含量

目的:建立银黄颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的UPLC含量测定方法.方法:采用ACQUITY UPLC H-Class超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm× 50 mm,1.7 μm);流动相甲醇-0.2％磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长274 nm,柱温30℃.结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的线性范围分别为1.09 ～21.8,0.340～6.80,0.116 ～2.32,0.102～2.04 μg,加样回收率分别为100.8％(RSD 0.32％),97.1％ (RSD 0.95％),101.5％ (RSD 1.6％),98.7％(RSD 0.059％).结论:该方法简便、快速,分离效果好,可为全面控制银黄颗粒的质量提供参考.     

RP-HPLC同时测定大卫颗粒中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、黄芩素和汉黄芩素的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定大卫颗粒中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、黄芩素和汉黄芩素的含量。方法:采用Diamon-sil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～10 min,10%A→15%A;10～15 min,15%A→25%A;15～25 min,25%A→28%A;25～35 min,28%A→35%A),柱温35℃,流速1.0 mL.min-1,检测波长230 nm,进样量20μL。结果:绿原酸、黄芩苷、连翘苷、黄芩素和汉黄芩素5个成分质量浓度分别在2.80～28.0μg.mL-1(r=0.9992)、25.71～257.1μg.mL-1(r=0.9994)、0.71～7.1μg.mL-1(r=0.9995)、0.81～8.1μg.mL-1(r=0.9990)、0.50～5.0μg.mL-1(r=0.9992)的范围内与峰面积呈良好的线性关系;方法的平均回收率(n=9)分别为100.0%,99.0%,99.0%,99.9%,99.4%。结论:所建立的高效液相色谱测定法简便、准确,重复性好,专属性强,可用于大卫颗粒的含量测定质量控制。     

黄芩素对抗阿尔采末病及改善学习记忆能力的研究进展

阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)是一种以进行性认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统退行性疾病。随着人口老龄化的加剧,AD给患者及其家庭和社会带来了巨大的压力,对人类生活质量的影响乃至生存的威胁日趋明显[1,2]。对于AD这类多因素疾病,目前的治疗药物主要包括胆碱能药物、非胆碱能药物、脑细胞代谢增强剂、雌激素、抗氧化剂等。但该类药物存在问题较多,诸如作用持续时间短、毒副作用大、难于透过血脑屏障、来源困难、实际应用受限等。因此,研发理想的治疗AD的新药成为目前关注的热点。近年来,多数研究者都把目光转向天然产物,对中药、植物药逐步开展了筛选、评价及研发工作,希望从中找到治疗AD的候选药物。黄芩素作为传统中药黄芩的提取物,其表现出的抗氧化、抗炎性、抗凋亡以及改善学习记忆能力的卓越功效,使其有望成为治疗AD的潜在理想药物。     

基于网络药理学的小半夏汤治疗化疗性恶心呕吐的成分与作用机制研究

目的通过网络药理学方法筛选小半夏汤治疗化疗性呕吐(chemotheraphy-induced nausea and vomiting,CINV)的活性成分,预测作用靶点,探讨其治疗CINV作用机制。方法通过中药系统药理学数据库等平台筛选小半夏汤的生物活性成分,利用CTD和OMIM数据库建立与恶心呕吐相关疾病靶点,从而构建小半夏汤有效药物-靶点-疾病网络,并用STRING数据库和DAVID数据库进行生物过程和信号通路分析。结果从数据库筛选出与治疗CINV有关的小半夏汤活性成分6种,作用于19个核心靶点,27条信号通路。显示小半夏汤治疗CINV主要与调控细胞凋亡、调节炎性反应应答及胃肠道黏膜修复、减轻胃肠道平滑肌痉挛等生物过程和信号通路有关。结论小半夏汤对CINV的治疗作用体现了中药多成分-多靶点-多途径的特点,为进一步探究小半夏汤治疗CINV机制提供实验研究依据和思路。     

巴曲酶注射液对改进光化学法致栓塞性脑梗死家兔模型的改善研究

目的 建立同时测定银黄颗粒中7种有机酸类成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和异绿原酸A、B、C）和4种黄酮类成分（黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素）的HPLC方法。方法 色谱柱为AkzoNobel Kromasil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;分段变波长测定;柱温30 ℃;体积流量1.0 mL/min。结果 11种成分的线性关系均良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均低于2%,加样回收率为97.35%～99.23%。结论 该方法简便、准确、灵敏,可用于银黄颗粒质量标准提高研究。     

Reduced system exposures of total rhein and baicalin after combinatory oral administration of rhein,baicalin and berberine to beagle dogs and rats

Ethnopharmacological relevance

Rhein (Rh), baicalin (BG) and berberine (Be) are important coexisted constituents of San-Huang-Xie-Xin-Tang, which was widely used in traditional Chinese medicine for the treatment of gastritis, hypertension, gastric bleeding and peptic ulcers, etc.

Aim of the study

Based on the extensive phase II conjugation reactions of polyphenols (Rh and BG) in vivo, the aims of the present study were to investigate the effects of combination (Rh, BG and Be) on the system exposures of total Rh and BG involving the phase II conjugates metabolites and its possible mechanism.

Materials and methods

A 3×3 Latin square single heavy design was used to investigate the pharmacokinetics influence of total Rh and BG after combination of Be by treating plasma samples with β-glucuronidase/sulfatase both in beagle dogs and Wistar rats. In vitro and in situ experiment models including in situ rat intestinal perfusion, Caco-2 cell monolayer transport and small intestinal flora incubation system were used to discuss the possible mechanism.

Results

The results of pharmacokinetic interactions showed that combination significantly reduced the system exposures of total Rh and BG. Compared with Rh or BG alone, the mean area under concentration-time curves (AUC_0–t) of total Rh and BG reduced by 31% and 77% in beagle dog experiment. In Wistar rat experiment, the AUC_0–t of total Rh and BG reduced by 22% and 21%. Subsequently, the results of in situ rat intestinal perfusion and small intestinal flora incubation system tests revealed that combination may decrease the absorption and metabolism of BG. However, combination could not affect the transport profile of BG across the Caco-2 cell. Moreover, combination did not affect the absorption or metabolism profile of Rh in all three in situ/in vitro experiments.

Conclusions

It was deduced that the possible mechanism of the reduction of the system exposures of total Rh and BG was related to that combination decreased the metabolism of BG to B or the phase II conjugates of Rh/BG excreted from liver/bile duct to their free aglycones in vivo by inhibiting intestinal flora. The potent effects of combination on the phase II conjugates of Rh and B in pharmacokinetics, shown in this paper, indicated that more attention should be paid to the phase II conjugates metabolites of these polyphenols (undergo extensive phase II conjugation reactions in vivo) when applied herbal products composed of these coexist compounds.     

光照对黄芩黄酮类活性成分积累及其相关基因表达的影响

目的:研究光照对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响。方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,应用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析。结果:光照对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,与黑暗条件相比,细胞生长13 d后黄芩苷含量显著增长了806.1%,黄芩素含量显著增长了42.5%,PAL基因在光照条件下的转录水平高于在黑暗条件,光照条件下UBGAT同黄芩素显著相关(r=-0.995)。结论:光诱导对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,光诱导刺激了与有效成分的积累相关基因(PAL,UBGAT)的表达。     

HPLC同时测定小柴胡汤中5种有效成分

目的:建立小柴胡汤中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草酸的HPLC-PDA测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Symmetry ShieldTMRP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm);流动相乙腈-0.01%磷酸溶液梯度洗脱;流速0.45 mL.min-1;检测波长251 nm;柱温30℃。结果:本方法的准确度、精密度、重复性、专属性和定量线性范围均符合要求,同时测定了小柴胡汤中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草酸的含量。结论:该方法简便快速、准确可靠,可用于同时测定小柴胡汤中5种有效成分的含量。     

黄芩素对内毒素诱导的内皮细胞细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究黄连解毒汤有效成分黄芩素对细菌脂多糖（LPS）诱导的人血管内皮细胞细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和抑制蛋白KB（I-KB）表达的影响。方法分别用LPS（终浓度1μg／mL）或LPS＋黄芩素（终浓度1umol／L,10μmol／L、50μmol／L）处理生长良好的ECV-304细胞，用RT～PCR和WesternBlot法检测ICAM=1表达情况和I—KB含量变化。结果LPS刺激ECV-304细胞可促进I～KB降解，上调ICAM-1表达水平，与空白对照组比较有统计学意义（P〈O．01）；黄芩素预处理能抑制LPS诱导的I—gB降解，降低IcAM-1l表达水平，与LPS组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论黄芩素可通过抑制I—KB降解，影响NF-KB炎症信号途径，下调IcAM-1的表达，这可能是黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

HPLC测定清肝活血方中4种黄酮的含量

 目的 建立HPLC同时测定清肝活血方中葛根素、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。方法 采用HPLC进行分析，色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)，流动相为甲醇-0.5%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min-1，检测波长为276 nm。结果 葛根素的线性范围为0.12~1.98 g·L-1(r=0.999 8)，平均回收率为99.87%，RSD=2.04%；黄芩苷的线性范围为0.24~3.82 g·L-1(r=0.999 9)，平均回收率为99.74%，RSD=1.84%；黄芩素的线性范围为0.01~0.14 g·L-1(r=0.999 6)，平均回收率为99.64%，RSD=1.96%；汉黄芩素的线性范围为0.007~0.12 g·L-1(r=0.999 5)，平均回收率为100.83%，RSD=2.37%。结论 本方法操作简便，测定结果准确可靠，可用于清肝活血方的质量控制。