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71.
目的探究芒针深刺秩边穴对大鼠脊髓损伤后运动功能的影响及可能作用机制。方法选择健康雄性Wister大鼠81只,随机分为正常组、模型组和芒针组(正常组9只,其余两组各36只),采用改良Allen's造模法制备大鼠脊髓中度损伤模型,模型组不做特殊处理,芒针组采用芒针深刺秩边穴,每日1次,每次30 min。分别于术后1 d、3 d、5 d、7 d行BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)运动功能评分;术后1 d、3 d、5 d、7 d取受损段脊髓组织行酶联免疫吸附测定(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和苏木素-伊红染色(HE染色)。结果术后5 d和7 d,芒针组大鼠BBB评分高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01);脊髓损伤后,模型组和芒针组大鼠脊髓组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、核转录因子kB(NF-kB)、白介素-6(IL-6)含量及HMGB1mRNA、NF-kBmRNA、IL-6mRNA水平显著升高(P<0.05);受损的脊髓组织松散,灰质中有许多空洞形成,伴有炎性细胞浸润。芒针治疗后,芒针组大鼠脊髓组织中HMGB1、NF-kB、IL-6含量及HMGB1mRNA、NF-kBmRNA、IL-6mRNA水平较模型组降低,且在3 d、5 d、7 d差异有统计学意义(P<0.05);受损部位的空洞及炎性细胞逐渐减少。结论脊髓损伤后,炎症因子的大量聚集引起级联性炎症反应,影响大鼠运动功能的恢复。芒针的抗炎机制可能包括抑制HMGB1的表达,降低NF-kB信号通路的传导,下调促炎因子IL-6的分泌。 相似文献
72.
目的:采用黄芪多糖(APS)与放射治疗(IR)联用,研究APS对人鼻咽癌CNE-1细胞的放疗敏感性及上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法:采用细胞计数(CCK-8)法检测不同质量浓度APS(0,6.25,12.5,25,50,100,200 g·L-1)对CNE-1细胞的细胞毒性;克隆形成实验计算12.5 g·L-1APS与不同放射剂量(0,2,4,6 Gy)联用后对CNE-1细胞的存活分数(SF),利用线性二次方程数学模型(LQ)根据SF值绘制放射敏感曲线;细胞划痕和transwell小室实验分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞的EMT标记物、凋亡标记物以及蛋白激酶B/细胞外调节蛋白激酶(Akt/ERK)通路蛋白的表达水平。结果:克隆形成实验和放射敏感曲线结果表明,非毒性剂量12.5 g·L-1APS与4 Gy放射剂量联合给药可以明显增加CNE-1细胞的放疗敏感性;与空白组及IR组比较,APS与IR联用可以抑制CNE-1细胞的迁移和侵袭能力(P0.05),明显增加CNE-1细胞的凋亡率(P0.05)。与空白组及IR组比较,APS与IR联用可以显著下调间质型钙黏蛋白(N-cadherin),p-Akt和p-ERK蛋白表达水平,明显上调上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平(P0.05)。结论:APS与IR联用可以抑制CNE-1细胞的迁移和侵袭,增加放疗引起的细胞凋亡,其可能通过抑制EMT和Akt/ERK通路有关。 相似文献
73.
目的:探讨miR-145调控肝癌腹水模型Th9细胞升高的作用机制。方法:构建小鼠H22肝癌腹水模型。造模两周后处死小鼠并分离出脾脏组织,流式细胞术分析肝癌腹水组(MA组)与正常对照组(Control 组)小鼠脾脏Th9细胞表达水平。ELISA法检测脾脏IL-9表达水平。RT-PCR法检测脾脏miR-145表达水平。Western Blot法检测脾脏中PI3K/Akt/mTOR/P70S6K/HIF-1α相关蛋白表达水平。分选小鼠脾脏CD4+T细胞,随机分为miR-145 mimics组和NC组,分别应用miR-145-5P mimics、阴性对照寡核苷酸(negative control,NC)进行转染,RT-PCR检测各组miR-145、HIF-1α mRNA及IL-9 mRNA表达水平。结果:与Control 组相比,MA组Th9细胞及其细胞因子IL-9表达均升高(P<0.05),miR-145表达降低(P<0.05),p-PI3K、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p-P70S6K、HIF-1α蛋白均升高(P<0.05)。与NC组相比,miR-145 mimics组miR-145显著升高,HIF-1α mRNA及IL-9 mRNA表达下降。结论:肝癌腹水中Th9细胞升高可能与miR-145下降导致的PI3K/Akt/mTOR/P70S6K/HIF-1α通路激活有关。 相似文献
74.
75.
2011年新修订的经济合作与发展组织(OECD)化学品测试指南中增添了指南456——H295R细胞系类固醇生成试验,用来筛选和检测潜在的内分泌干扰物。H295R细胞能表达类固醇激素生成过程中涉及的所有酶类,已作为有效的体外筛选环境类固醇激素干扰物的模型,也可作为研究肾上腺皮质分化及其类固醇激素的分泌与调控以及雄激素产生的调节作用的模型。H295R试验已用于美国内分泌干扰物筛选项目(EDSP)的一级筛选,还发展了高通量H295R细胞系类固醇生成试验方法。本文主要就H295R细胞系的建立,在环境类固醇激素干扰中的应用,以及目前存在的问题作一综述。 相似文献
76.
目的:探究miRNA-325-3p 及其靶基因细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌细胞CNE1 的放疗敏感性的影响。方法:通过miRBase、Targetscan 及Microcosm 三大数据库预测miRNA-325-3p 的潜在靶基因,并通过双荧光素酶活性检测实验进行验证,qPCR检测不同放射剂量下鼻咽癌细胞CNE1 中miRNA-325-3p 及其靶基因的表达水平变化,通过克隆形成实验观察不同放射剂量下过表达miRNA-325-3p 及敲低靶基因后CNE1 细胞克隆形成率的变化,流式细胞术验证过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1 在不同放射剂量下凋亡水平的变化,MTT法检测miRNA-325-3p 过表达和CK13 敲低组鼻咽癌细胞CNE1在不同放射剂量下的细胞存活率以验证其放疗敏感性的变化。结果:CK13 确认为miRNA-325-3p 的潜在靶基因,鼻咽癌细胞CNE1 经放射处理后,miRNA-325-3p 的表达水平显著升高、CK13 的表达水平显著降低(均P<0.05)。miRNA-325-3p 表达量上调和CK13 基因沉默均显著提高CNE1 细胞的存活率[miRNA上调时:(60.14±3.55)% vs(19.23±3.42)%,t=14.37、P<0.01;CK13 沉默时:(76.15±5.13)% vs(28.53±3.68)%,t=13.06、P<0.01]和克隆形成率,降低了凋亡率[miRNA 上调时:(27.95±2.67)% vs(51.68±3.47)%,t=9.39、P<0.01;CK13 沉默时:(20.31±2.62)% vs(38.14±3.83)%,t=6.66、P<0.01]。结论:miRNA-325-3p 能够通过下调靶基因CK13的表达降低鼻咽癌细胞CNE1 对放疗的敏感性。 相似文献
78.
《中国医学前沿杂志(电子版)》2020,(7)
目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达和侵袭、迁移能力的影响。方法荧光定量聚合酶链反应检测卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞MEG3表达情况。通过慢病毒转染携带MEG3全长序列的载体和空白载体于SKOV3人卵巢癌细胞中,分别作为实验组细胞和对照组细胞,通过Transwell侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力,通过Transwell迁移实验检测两组细胞的迁移能力,通过蛋白质印迹法检测两组细胞MMP-2和MMP-9的表达情况。结果人卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3和A2780中MEG3的表达显著低于人卵巢上皮细胞IOSE80(均P<0.05)。通过慢病毒转染外源性上调SKOV3细胞MEG3的表达,实验组细胞MEG3表达显著高于对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示实验组穿过基质胶的细胞数显著少于对照组(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示实验组迁入下室的细胞数显著少于对照组(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示实验组细胞MMP-2和MMP-9表达水平均显著低于对照组(均P<0.05)。结论 MEG3低表达于人卵巢癌细胞系,并可下调MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。 相似文献
79.
目的 探讨外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)在急性乙型肝炎(AHB)患者临床转归中的变化及作用。方法 纳入2015年6月至2017年5月收治的急性乙型肝炎(AHB组)患者40例, 给予退黄、降酶、保肝等药物,并加用恩替卡韦0.5 mg空腹口服,1次/d。另纳入健康体检者26例为健康对照组( HC组)。HC组于体检当天、AHB组于治疗前及治疗后6周采集外周静脉全血,采用ELISA法检测2组血浆HBV DNA、HBsAg、HbeAg及肝功能指标水平,并应用流式细胞仪检测pDCs的频数及其功能分子CD86的表达水平。结果 治疗6周后,AHB组临床症状显著缓解,血清学指标和乙型肝炎标志物水平显著下降(P<0.01)。治疗6周后,AHB组HBV DNA转阴率为82.5%,HBsAg清除率为72.5%,HBeAg血清学转换率为75.0%,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01), HC组pDCs频数显著高于AHB组治疗前。AHB组治疗后CD86+pDCs显著高于治疗前。HC组CD86ABC显著低于AHB组治疗前。结论 在急性乙型肝炎患者外周血pDCs的数量降低。急性乙型肝炎患者在治疗后CD86+pDCs增多。急性乙型肝炎患者pDCs上CD86表达上调。 相似文献
80.
目的 探讨血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)水平在诊断肺恶性肿瘤的临床价值。 方法 选择2016年5月—2018年3月浙江省丽水市人民医院收治的27例肺恶性肿瘤患者、45例肺良性肿瘤患者及30例体检健康者作为研究对象,分别设为肺恶性肿瘤组、肺良性肿瘤组及健康对照组,采用电化学发光方法检测入选患者血清CYFRA21-1水平,采用酶联免疫吸附试验入选患者血清检测TTF-1、MMP-9水平。应用统计学方法比较差异。 结果 肺恶性肿瘤组的血清CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1水平均明显高于良性肿瘤组和健康对照组,有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1与肺良性肿瘤均无相关性(P>0.01),与肺恶性肿瘤有相关性(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1诊断肺恶性肿瘤的AUC明显高于MMP-9和TTF-1,有统计学意义(P<0.05),MMP-9与TTF-1之间的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清CYFRA21-1诊断肺恶性肿瘤敏感性、特异性分别为67.8%、93.1%;MMP-9诊断肺恶性肿瘤分别为42.1%、87.2%;TTF-1分别为44.3%、95.7%。 结论 血清CYFRA21-1、MMP-9、TTF-1水平在诊断肺恶性肺肿瘤方面具有一定的潜在价值,其中以CYFRA21-1最高。 相似文献